分子生物學的興起與發展概況1.1分子生物學的興起分子生物學：是研究核酸，蛋白質等生物大分子的結構與功能的，并從分子水平上表明蛋白質與蛋白質，蛋白質與核酸之間的相互作用以及它的基因表達調控機理的學科[1]。從20世紀50年代以來分子生物學是生物學的前沿和生長點，包括蛋白質系統、蛋白質系統和核酸系統。圖1.11953年沃森、克里克提出DNA分子的雙螺旋結構模型標志著分子生物學就此誕生。分子生物學檢測是分子生物技術在臨床實驗室診斷中的高級應用。它以疾病為中心，以生物標志物為新一代檢測手段的臨床診斷技術，能夠快速檢測并微型化微生物樣本、生物力學和微生物，是疾病風險分析的重要手段，目前在生物實驗中有多種分子生物學技術，包括由一組生物固定技術組成的分子生物傳感器[2]。分子生物傳感器是一種對生物物質敏感并能將其濃度轉換為電信號進行檢測的儀器。它是一個完整的分析系統，由冷凍的生物分子作為檢測元件，由合適的理化傳感器和信號放大器組成，分子生物傳感器可廣泛應用在小分子有機化合物的檢測，為疾病診斷和工作環境監測提供可靠的分析數據[3]。1.1.1分子生物學技術發展分子生物學的發展經歷了準備與醞釀建立與發展和深入發展三個主要階段，并且隨著臨床分子生物學檢測技術的不斷提高，尤其是臨床醫學各學科與分子遺傳學，分子生物學和儀器分析學等，其他學科不斷的交叉和互相滲透，下面就分子生物學的發展不足之處與今后的發展進行探討[4]。1.1.2技術復雜以及儀器要求過高分子生物學是一門新興的醫學傳感技術，目前分子生物學傳感技術的發展存在著許多需要改進的問題，其中分子生物學傳感技術過于復雜。對檢測儀器的質量要求也很高，用于檢測的藥物和反應容器價格昂貴，這些條件嚴格制約了分子生物學的發展。為了解決這些問題，需要合理的醫學研究項目，提高醫學分子生物學檢測技術的靈敏度，但在提高醫學篩選標準方面還有很多工作需要做，例如：如果種植結核桿菌，則無需選擇昂貴的培養容器[5]。臨床疾病調查不應過分依賴分子生物學技術的臨床證據，雖然分子生物學技術可以提高醫生的診療效率，但也存在技術錯誤。因此，應結合臨床調查得出結論。1.1.3監測管理力度不夠分子生物學技術中存在著許多問題，其中，各部門間的檢驗管理不充分，按照國際醫學檢驗規則，對重要任務進行監督管理，醫院必須盡管分子生物技術仍然存在許多問題，但發展速度不容忽視，但隨著技術的飛速發展，應加強管理。積極推進分子生物學實驗室建設，建立專門的管理和監督機制，保障分子生物學臨床試驗的可持續發展。1.1.4分子生物納米技術在醫學實驗室中，大多數設施被稱為生物活性物質，雖然抗體是最重要和最常見的生物活性物質，但將抗原或特異性抗體固定在磁性納米臭氧的表面是納米技術的基礎，納米技術可包括熒光材料、放射性同位素、生物活性物質等，生物技術分子納米技術更方便、更靈敏，與傳統微重力技術相比，一些締約方將抗體相關的磁性納米探針用于臨床醫學檢查，并與化學發光免疫分析有效結合，這是個好結果[6]。自動免疫分析能快速有效地檢測1型和2型抗體，可用于形成人的胰島素。1.2分子生物學技術在臨床的應用分子生物學是診斷和治療疾病的重要手段，進入21世紀以來，分子生物學在醫學發展中發揮了重要作用，并被廣泛應用于科學實驗中[7]。藥物的作用機制和新藥的研發是從理論到實踐的一大步，分子生物學是以核酸生物化學為基礎的研究方法。該技術的發展為益生菌篩選、癌癥診斷與評估、遺傳性疾病診斷和免疫系統疾病診斷提供了重要依據和創新思路[8]。1.2.1免疫測定和培養鑒定與傳統的免疫分析和培養方法相比，生物芯片技術采用PCR技術檢測致病微生物，添加到反應管中的特定物質同時從PCR中發現的多種或單一病原體中鑒定出來，結果的準確性不受大量死亡細菌或微生物和混合樣品生長時間的影響。結果靈敏度和有效性高，可同時檢測出數百種病原微生物[9]。癌癥和遺傳病已被相應疾病的診斷所證實[10]。這兩種疾病基本上都有一定程度的遺傳缺陷。它們的精確診斷是建立在遺傳和人類相互作用的基礎上的。腫瘤抑制基因可以通過微陣列進行識別，腫瘤特異性標記物可以通過生物傳感器進行有效的診斷1.2.2病原微生物檢驗分子生物學技術在醫院臨床微生物學檢查中的應用可用于液體中導體蛋白、小分子蛋白和微量元素的檢測。應用分子生物學技術可以檢測物質，醫院健康，并能消滅大量活菌，具有很大的優勢。從技術上講，它不影響液體中的其他微生物，可確定正確的治療原因，提高分子生物學在醫院微生物學研究中的應用。PCR可提高臨床病理檢測的有效性，并可用于檢測液體物質、微量蛋白質、蛋白質、小分子物質等。作為一種健康的分子醫院生物技術，分子生物技術可用于大量細菌，其最大的技術優勢是不受其他微生物的干擾[11]。分子生物技術可以提高疾病的檢測和診斷效率，生物微電路和pcr技術比傳統的免疫和文化檢測更敏感。病原微生物多為勞動密集型、規模大；生物芯片在醫學檢測中的應用顯示出高效、靈敏的特點。這使得同時發現數百種致病微生物成為可能，并為快速發現基因提供了有效的臨床建議.1.2.3診斷腫瘤及遺傳疾病在腫瘤和遺傳疾病的臨床診斷中，我們使用分子生物學技術時，基因片段分析是分子科學的一個研究領域，合理利用分子生物學技術，就能迅速發現有缺陷的基因短篇。利用基因芯片鑒定靶基因P53是否有抑制癌癥的突變，以及是否有生物傳感器，細胞儀器等技術可以有效地識別腫瘤的象征物，分子生物技術可以識別遺傳疾病家庭基因中的特異性多集成體，單鏈聚合、DNA限制性短篇長度分析、熒光原位雜交染色體分析、酶微排列和控制技術。需要注意的是，DNA結構非常復雜，尤其是雙螺旋結構。免疫系統疾病診斷是利用分子生物技術對免疫系統疾病進行識別和診斷，可以快速判斷免疫系統疾病中是否存在基因缺陷，從而研究人類免疫系統短基因的自然狀態。比如抗體、免疫分析、磁性修飾材料檢測、同位素、熒光、酶固化、特異性抗原、磁性納米粒子的納米生物技術檢測出HIV；1型抗體、2型抗體的自動檢測，免疫系統疾病有幾種類型，所以要用分子微生物學技術來識別其中一些類型的疾病[12]。2臨床PCR檢驗2.1標本的類型在臨床PCR中，血清（血漿）、血液、外周血單核細胞、痰、棉片、膿液等體液（胸腔積液、腹水、腦脊液、尿液等）、乳液、運輸和保存對檢測結果有影響。因此，為了驗證試驗結果的正確性，必須制定收集、運輸和保存臨床樣品的標準程序。2.2標本的采集2.2.1標本采集時間采集過早或過晚都可能會給出假陽性結果，所以一定要把握好最佳時間。2.2.2標本采集部位消毒在開始取樣之前，應清潔取樣點，以去除受污染的微生物或其他雜質。但是，這必須是適當的，過度凈化可能會去除或破壞目標微生物。2.2.3采樣量樣本的類型和數量應根據已經識別出的引起疾病的微生物來確定，一般要根據引起充足數量疾病的微生物樣本來確定，用于提取核酸和測量此后的增長。在病原體含量低的樣品中，樣品的尺寸是測量的關鍵[13]。例如，PCR用于血液檢查，血液中的特異性抗原或抗體一般含有較少的病原體，因此需要更多的樣本。2.2.4樣品采集器衛生棉條和其他收集的材料必須是一次性的，運輸容器還必須是密封的一次性消毒器。材料中使用的抗凝劑和相關試劑不應妨礙基因的擴大和測試。2.2.5采樣過程中的防污染最好使用一次性材料，而不是直接治療；采集時應特別注意防止污染，混入作業人員皮膚細胞、痰盂等；如果使用玻璃器皿，則必須在0.1%高壓水下處理，以使核糖核酸酶能夠存活和降解，這可以抑制聚合酶鏈反應。2.3標本的運送一旦收集了所有的PCR樣品，就應暫時儲存在2-8℃之下，然后再送往實驗室。應盡快將其送到實驗室。在無菌條件下收集的DNA靶標樣品應在室溫下交付實驗室8小時；如果核酸是RNA，它可以在室溫下運輸10分鐘。如果需要很長的時間，它應該在冰上運輸。2.4標本驗收、拒收采集的樣本必須從原容器中采集，不能與生化、免疫學等其他樣本混用，因為它們之間感染的可能性很高[14]。應拒收溶血或高脂血癥等血樣。對于沙眼衣原體的擴張，應在顯微鏡下觀察表皮，因為病原體是在上皮細胞中形成的，如果下一層上皮沒有或很少，如果在顯微鏡下觀察到的白細胞很少，說明沒有收集到合格標本。2.5標本的預處理和保存血清(漿)標本

如果血清樣品用于DNA提取和檢測，請遵循血清樣本的一般處理程序。如果EDTA更適合RNA捕獲檢測，則嚴禁使用海洛因。因為它抑制了PCR的增加，在核酸提取過程中很難完全清除，防止凝固后1h內分離血清，4h內分離血漿，放入1.5ml無菌離心管保存。外周血單個核細胞

外周血單個核細胞可以在抗凝劑中產生。主要有兩種方法：一種是用淋巴細胞分離液分離產生外周血單個核細胞，另一種是用紅細胞溶解液分解全血中的紅細胞，用生理鹽水反復洗滌可獲得單核細胞。痰

痰屬于分泌物，臨床上經常使用DNA檢測結核，痰中含有大量粘稠雜質，DNA提取需要初步處理在室溫下用NaOH或變性劑液化約三十分鐘，如果液體樣品不能立即用于DNA提取，可以保存在-70℃下。棉拭子

在檢測性病病原體的PCR程序中，臨床樣本通常是棉絮，可將棉絮棒置于室溫下適量的生理鹽水溶液中，完全搖勻洗凈，然后在室溫下放置5至10分鐘。立即離心殘余物，隨后的沉淀可用于提取DNA[15]。如果不立即使用膠囊提取核酸，則應將其儲存于-70℃下。膿液

膿液如用于分枝桿菌測定的標本，黏液可采用痰標本的處理方法來處理，先液化，再離心取沉淀提取DNA;水樣的膿液則直接離心沉淀用生理鹽水洗2-3次后，即可用于DNA提取[16]。3.結論也就是說，分子生物學技術廣泛應用于醫學、標準化、質量管理等領域。由衛生部開發，對分子生物學的發展起到了重要作用。交叉污染的醫療檢查在一定程度上得到了解決。分子生物學的應用主要與完全自動化的醫療系統的發展有關。可有效處理聚氯乙烯污染問題的檢查[17]。此外，分子生物學技術。例如，由于自擴增系統等技術的發展，得到了人們的認可。分子生物技術的廣泛應用和醫學實驗室的標準化大大減少了醫學檢驗過程中交叉污染的相關問題，使得醫學檢驗難度大，可以提高整體效率。分子生物學檢驗技術的臨床應用，主要指應用分子生物學檢驗技術對人類疾病進行診斷和研究的過程。包括病原微生物的診斷、人類基因組相關疾病的診斷惡性腫瘤個體化治療靶點的選擇以及在移植配型和個體識別方面的應用。分子生物學檢驗技術通過檢測病原微生物的特征性基因位點以及患者自身基因結構的變化或表達異常的存在，獲得疾病的診斷依據，完成疾病的分子診斷。隨著分子生物學檢驗技術的飛速發展,分子診斷、基因診斷正日漸成為臨床上快速、準確的進行疾病診斷的重要途徑和手段。參考文獻[1]王海英.分子生物學技術在醫學檢驗中的應用進展[J].當代醫學,2011,17(06):16.[2]李鵬.現代分子生物學技術在醫學檢驗中的應用[J].臨床和實驗醫學雜志,2007,(03):161.[3]楊振華.為21世紀中國檢驗醫學事業崛起而奮斗——寫于本刊更名之際[J].中華檢驗醫學雜志,2000,(01):4.[4]姚均,何忠平,張福杰,等.核酸序列擴增早期診斷人類免疫缺陷病毒感染[J].中華檢驗醫學雜志,2002,(06):42.[5]胡頌恩.分子生物學與檢驗技術[M].北京:人民衛生出版社,2018.[6]武衛杰,冷遠逵,沈夢飛等.基于功能納米材料的液相生物芯片檢測技術[J].化學進展,2019,31(2/3):283-299.[7]徐疏梅.新一代DNA測序技術的應用與研究進展[J].徐州工程學院學報,2018,33(4):60-64.[8]香忠成，苗生虎.醫學檢驗在臨床中的地位及作用[J].中國社區醫師(醫學專業),2011,13(31):217.[9]李興祿.檢驗醫學相關進展[J].重慶醫學,2007,(10):891-892.[10]陳耀庭,劉小紅,李健生.分子生物學技術應用于病原微生物檢驗工作中發揮的作用分析[J].當代醫學,2017,23(27):60-62.[11]熊勛爵.分子生物學技術應用于病原微生物檢測中的價值研究[J].數理醫藥學雜志,2017,30(6):931-932.[12]耿一帆.現代技術與生物科學相互促進作用研究[J].科技創新導報,2017,14(16):252.[13]虞萌,黃家愷,巴俊強,等.生物標志物的篩查方法及研究進展[J].醫學綜述,2017,23(5):867-871.[14]王煒,江曉,