第2節(jié)動(dòng)物細(xì)胞工程第2課時(shí)動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)與單克隆抗體課時(shí)·訓(xùn)練基礎(chǔ)鞏固1.下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞融合的說(shuō)法,錯(cuò)誤的是()A.細(xì)胞融合前要用酶解法分散成單個(gè)細(xì)胞B.細(xì)胞融合的原理是細(xì)胞膜的流動(dòng)性C.融合后得到的雜交細(xì)胞能表現(xiàn)出兩個(gè)親本細(xì)胞的特點(diǎn)D.融合后得到的雜交細(xì)胞具有兩個(gè)細(xì)胞核答案:D解析:動(dòng)物細(xì)胞融合前需用胰蛋白酶、膠原蛋白酶等處理將組織分散成單個(gè)細(xì)胞,A項(xiàng)正確。動(dòng)物細(xì)胞融合的原理是細(xì)胞膜具有流動(dòng)性,B項(xiàng)正確。融合后得到的雜交細(xì)胞獲得了兩個(gè)親本的遺傳物質(zhì),能表現(xiàn)出兩個(gè)親本細(xì)胞的特點(diǎn),C項(xiàng)正確。融合后得到的雜交細(xì)胞是單核細(xì)胞,D項(xiàng)錯(cuò)誤。2.下列不屬于細(xì)胞融合技術(shù)應(yīng)用的是()A.細(xì)胞遺傳與細(xì)胞免疫的研究B.生物新品種的培育C.單克隆抗體的制備D.誘導(dǎo)產(chǎn)生iPS細(xì)胞答案:D3.下圖表示細(xì)胞融合技術(shù)的過(guò)程,下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.若該過(guò)程表示植物原生質(zhì)體的融合,則甲、乙細(xì)胞可用酶解法獲取B.若該過(guò)程表示動(dòng)物細(xì)胞融合,可用滅活的病毒誘導(dǎo)C.若該過(guò)程表示制備單克隆抗體,則丙細(xì)胞是雜交瘤細(xì)胞D.以上三個(gè)過(guò)程體現(xiàn)了細(xì)胞的全能性答案:D解析:植物細(xì)胞融合需先用纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁,制備原生質(zhì)體,再誘導(dǎo)細(xì)胞融合,A項(xiàng)正確。若該過(guò)程表示動(dòng)物細(xì)胞融合,則可用物理、化學(xué)和生物的方法誘導(dǎo),生物方法即用滅活的病毒誘導(dǎo),B項(xiàng)正確。若該過(guò)程表示制備單克隆抗體,則丙細(xì)胞是雜交瘤細(xì)胞,C項(xiàng)正確。以上三個(gè)過(guò)程都體現(xiàn)了細(xì)胞膜的流動(dòng)性,D項(xiàng)錯(cuò)誤。4.下圖是單克隆抗體制備流程的示意圖。下列有關(guān)敘述正確的是()A.①是從已免疫的小鼠脾中獲得的T淋巴細(xì)胞B.②中使用胰蛋白酶有利于雜交瘤細(xì)胞的形成C.③同時(shí)具有脾細(xì)胞和鼠骨髓瘤細(xì)胞的特性D.④是經(jīng)篩選培養(yǎng)獲得的能分泌特異性抗體的細(xì)胞群答案:D解析:①是從小鼠脾中獲得的已免疫的B淋巴細(xì)胞,A項(xiàng)錯(cuò)誤。②中應(yīng)該使用能促進(jìn)細(xì)胞融合的促融劑,如聚乙二醇等,B項(xiàng)錯(cuò)誤。③同時(shí)具有從脾中分離出的B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞的特性,C項(xiàng)錯(cuò)誤。④是經(jīng)篩選培養(yǎng)獲得的能分泌特異性抗體的細(xì)胞群,D項(xiàng)正確。5.下列有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞融合的敘述,正確的是()A.動(dòng)物細(xì)胞融合的結(jié)果是獲得新個(gè)體B.只有兩個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合成一個(gè)細(xì)胞的過(guò)程才叫動(dòng)物細(xì)胞融合C.滅活的病毒是動(dòng)物細(xì)胞融合和植物體細(xì)胞雜交常用的促融劑D.細(xì)胞融合技術(shù)突破了有性雜交的局限,使遠(yuǎn)緣雜交成為可能答案:D解析:動(dòng)物細(xì)胞融合是使兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過(guò)程,一般多數(shù)為兩個(gè)細(xì)胞的融合,A、B兩項(xiàng)錯(cuò)誤。滅活的病毒只能用于誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合,不能用于植物體細(xì)胞雜交,C項(xiàng)錯(cuò)誤。細(xì)胞融合技術(shù)突破了有性雜交的局限,使遠(yuǎn)緣雜交成為可能,D項(xiàng)正確。6.下圖為雜交瘤細(xì)胞制備過(guò)程示意圖。骨髓瘤細(xì)胞由于缺乏次黃嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶(HGPRT-),在HAT選擇培養(yǎng)基中不能正常合成DNA,無(wú)法生長(zhǎng)。下列敘述錯(cuò)誤的是()A.可用滅活的病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合B.兩兩融合的細(xì)胞都能在HAT培養(yǎng)基中生長(zhǎng)C.雜交瘤細(xì)胞需進(jìn)一步篩選才能用于生產(chǎn)D.細(xì)胞膜的流動(dòng)性是細(xì)胞融合的基礎(chǔ)答案:B解析:滅活的病毒是誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法之一,A項(xiàng)正確。B淋巴細(xì)胞之間融合的細(xì)胞在體外長(zhǎng)期培養(yǎng)會(huì)死亡,骨髓瘤細(xì)胞之間融合的細(xì)胞因?yàn)槎既鄙俅吸S嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶(HGPRT-)而不能生長(zhǎng),B項(xiàng)錯(cuò)誤。第二次篩選能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞,C項(xiàng)正確。細(xì)胞融合體現(xiàn)了細(xì)胞膜的流動(dòng)性這一結(jié)構(gòu)特點(diǎn),D項(xiàng)正確。7.“豬繁殖與呼吸綜合征”是一種由PRRSV病毒引發(fā)的傳染病。科學(xué)家制備出PRRSV-GP3蛋白的單克隆抗體,可對(duì)該病進(jìn)行診斷和治療,制備過(guò)程如下圖所示。請(qǐng)回答下列問(wèn)題。(1)圖中涉及的生物工程技術(shù)有,將GP3蛋白注射小鼠的目的是。

(2)培養(yǎng)細(xì)胞乙、丙、丁過(guò)程中均表現(xiàn)有現(xiàn)象,第1次篩選是用特定的選擇培養(yǎng)基篩選,在該培養(yǎng)基上,都會(huì)死亡,第2次篩選的目的是。

(3)圖中擴(kuò)大培養(yǎng)通常采用的方法有。

(4)單克隆抗體被廣泛用作診斷試劑,其原因是。

答案:(1)動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)獲得抗GP3蛋白抗體的B淋巴細(xì)胞(2)細(xì)胞貼壁和接觸抑制未融合的親本細(xì)胞和融合的具有同種核的細(xì)胞篩選出能產(chǎn)生抗GP3蛋白抗體的雜交瘤細(xì)胞(3)將細(xì)胞丁注射到小鼠腹腔內(nèi)或在體外條件下大規(guī)模培養(yǎng)(4)單克隆抗體能準(zhǔn)確地識(shí)別抗原的細(xì)微差異,與特定抗原發(fā)生特異性結(jié)合,并且可以大量制備能力提升1.如圖所示,將由2種不同的抗原分別制備的單克隆抗體分子,在體外解偶聯(lián)后重新偶聯(lián)可制備雙特異性抗體,簡(jiǎn)稱雙抗。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是()A.雙抗可同時(shí)與2種抗原結(jié)合B.利用雙抗可以將蛋白類藥物運(yùn)送至靶細(xì)胞C.篩選雙抗時(shí)需使用制備單克隆抗體時(shí)所使用的2種抗原D.同時(shí)注射2種抗原可刺激B細(xì)胞分化為產(chǎn)雙抗的漿細(xì)胞答案:D解析:雙抗同時(shí)含有抗體1、2的部分結(jié)構(gòu),可與2種抗原結(jié)合,A項(xiàng)正確。根據(jù)抗體與抗原特異性結(jié)合的特點(diǎn),利用雙抗可以將蛋白類藥物運(yùn)送至靶細(xì)胞,B項(xiàng)正確。篩選雙抗時(shí)需使用制備單克隆抗體時(shí)所使用的2種抗原,才能刺激機(jī)體產(chǎn)生2種B細(xì)胞,進(jìn)而產(chǎn)生2種抗體,而不是刺激B細(xì)胞分化為產(chǎn)雙抗的漿細(xì)胞,C項(xiàng)正確,D項(xiàng)錯(cuò)誤。2.人絨毛膜促性腺激素(HCG)是女性懷孕后胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞分泌的一種糖蛋白,制備抗HCG單克隆抗體可用于早孕的診斷。下圖是抗HCG單克隆抗體制備流程示意圖,下列有關(guān)說(shuō)法錯(cuò)誤的是()A.①過(guò)程可產(chǎn)生多種雜交瘤細(xì)胞B.②過(guò)程篩選出的雜交瘤細(xì)胞都能產(chǎn)生抗HCG抗體C.③過(guò)程以HCG為抗原進(jìn)行檢測(cè)D.④過(guò)程可在體內(nèi)進(jìn)行,也可在體外進(jìn)行答案:B解析:①過(guò)程是動(dòng)物細(xì)胞融合,可產(chǎn)生多種雜交瘤細(xì)胞,A項(xiàng)正確。②過(guò)程篩選出的雜交瘤細(xì)胞不一定都能產(chǎn)生抗HCG抗體,還需要進(jìn)行專一抗體檢測(cè),B項(xiàng)錯(cuò)誤。③過(guò)程以HCG為抗原,利用抗原—抗體雜交的原理進(jìn)行檢測(cè),C項(xiàng)正確。④過(guò)程可在體內(nèi)進(jìn)行,也可在體外進(jìn)行,D項(xiàng)正確。3.下圖表示核苷酸合成的兩條途徑,物質(zhì)A可以阻斷其中的全合成途徑。正常細(xì)胞內(nèi)含有補(bǔ)救合成途徑所必需的轉(zhuǎn)化酶和激酶。制備單克隆抗體時(shí)選用的骨髓瘤細(xì)胞缺乏轉(zhuǎn)化酶。現(xiàn)用加入H、A、T三種物質(zhì)的HAT培養(yǎng)基來(lái)篩選特定的雜交瘤細(xì)胞。下列關(guān)于篩選原理的敘述,正確的是()A.免疫的B淋巴細(xì)胞及其相互融合細(xì)胞因全合成途徑被A阻斷,在HAT培養(yǎng)基上不能增殖B.骨髓瘤細(xì)胞及其相互融合細(xì)胞因無(wú)法進(jìn)行上述兩條途徑,而在HAT培養(yǎng)基上不能增殖C.雜交瘤細(xì)胞可進(jìn)行上述兩條途徑,因此能在HAT培養(yǎng)基上大量增殖D.HAT培養(yǎng)基上篩選出的所有雜交瘤細(xì)胞,既能大量增殖又能產(chǎn)生較高純度的目標(biāo)抗體答案:B解析:免疫的B淋巴細(xì)胞及其相互融合細(xì)胞是有補(bǔ)救合成途徑的,但是因?yàn)檫@兩種細(xì)胞本身沒(méi)有增殖能力,所以在HAT培養(yǎng)基上不會(huì)有這兩種細(xì)胞的增殖,A項(xiàng)錯(cuò)誤。骨髓瘤細(xì)胞及其相互融合細(xì)胞因無(wú)法進(jìn)行上述兩條途徑而在HAT培養(yǎng)基上不能增殖,B項(xiàng)正確。雜交瘤細(xì)胞因?yàn)榭梢赃M(jìn)行補(bǔ)救合成途徑,所以能在HAT培養(yǎng)基上大量增殖,C項(xiàng)錯(cuò)誤。HAT培養(yǎng)基上篩選出的雜交瘤細(xì)胞,并不都能產(chǎn)生高純度的目標(biāo)抗體,D項(xiàng)錯(cuò)誤。4.新型冠狀病毒(一種RNA病毒)表面的S刺突蛋白是侵染細(xì)胞的關(guān)鍵蛋白質(zhì),其結(jié)構(gòu)域S-RBD能夠與人細(xì)胞表面受體ACE2結(jié)合,介導(dǎo)病毒進(jìn)入宿主細(xì)胞。科研人員進(jìn)行了抗S-RBD單克隆抗體的制備及相關(guān)研究,將得到的4種雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng),分別獲取上清液進(jìn)行抗體陽(yáng)性檢測(cè),從中選出產(chǎn)生“最優(yōu)抗體”的雜交瘤細(xì)胞。檢測(cè)的流程如圖甲所示,檢測(cè)的結(jié)果如圖乙所示。甲乙(1)圖甲所示實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,將S-RBD固定,將上述4種雜交瘤細(xì)胞的上清液和未免疫小鼠血清加入反應(yīng)體系,然后加入酶標(biāo)抗體。由圖甲可知,酶標(biāo)抗體與待測(cè)抗體結(jié)合,將待