第四章生藥的鑒定學(xué)習(xí)目標(biāo)：掌握生藥鑒定的目的和意義、生藥鑒定的依據(jù)和一般程序、生藥鑒定的主要方法；熟悉中國(guó)藥典藥材及飲片的記載格式和規(guī)定項(xiàng)目；了解生藥鑒定的新技術(shù)和新方法。重點(diǎn)難點(diǎn)：生藥鑒定的目的和意義，生藥鑒定的依據(jù)，生藥鑒定的主要方法。第一節(jié)生藥鑒定的目的和意義

第二節(jié)生藥鑒定的依據(jù)和一般程序第三節(jié)生藥鑒定的方法第四節(jié)生藥鑒定的新技術(shù)和新方法簡(jiǎn)介第一節(jié)生藥鑒定的目的和意義

生藥鑒定：在繼承中醫(yī)學(xué)理論和實(shí)踐的基礎(chǔ)上，應(yīng)用現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)手段來研究生藥的來源、性狀、顯微特征、理化特征等方面的一項(xiàng)重要基礎(chǔ)工作。

生藥鑒定的目的和意義：鑒定生藥品種的真?zhèn)蝺?yōu)劣，保證患者用藥的安全與有效。

⑴中藥的同名異物和同物異名現(xiàn)象普通存在，直接影響到生藥的質(zhì)量，影響到化學(xué)成分、藥理作用等研究的科學(xué)性和制劑生產(chǎn)的正確性，以及臨床應(yīng)用的有效性和安全性。中藥同名異物：例如：各地商品生藥，“白頭翁”有多達(dá)20種以上不同的植物來源，分屬于毛茛科、薔薇科、石竹科、菊科等；正品應(yīng)為毛茛科植物白頭翁的根。正品“白頭翁”含皂苷，有抑制阿米巴原蟲生長(zhǎng)的作用，臨床治療阿米巴痢疾有效，而屬于石竹科及菊科的一些同名異物白頭翁則均無抑制阿米巴原蟲的作用。“王不留行”有12種，“獨(dú)活”有15種以上，“貫眾”有58種，“金銀花”有20種，“沙參”有36種，“石斛”有48種植物來源。現(xiàn)今各地所用“貫眾”分屬于多個(gè)不同的科，其中鱗毛蕨屬綿馬鱗毛蕨、歐鱗毛蕨等同屬植物的根莖及葉柄基部有間隙腺毛，所分泌的油樹脂中含有驅(qū)絳蟲成分綿馬酸類，而屬于其它科屬的未見有間隙腺毛和類似成分。中藥同物異名：如：益母草，在東北稱坤草，又叫楞子棵；在江蘇稱天芝麻或田芝麻，浙江叫三角胡麻，青海叫千層塔，四川叫血母草等。大血藤科植物大血藤的莖，有的地方稱“紅藤”，有的稱“雞血藤”，而豆科植物雞血藤在某些地區(qū)又稱“大血藤”。

⑵在生藥商品流通中，以次充好、以假充真，特別是一些貴重生藥，時(shí)有發(fā)現(xiàn)偽品或摻假現(xiàn)象。貴重生藥，如麝香、血竭、熊膽、羚羊角、番紅花、冬蟲夏草等。

如砂仁近年來由于用量增加，藥源趨緊，致使一些非正品砂仁混入市場(chǎng)，造成品種混亂，影響療效又如以亞香棒蟲草、香棒蟲草、地蠶、人工偽制蟲草及用白僵蠶冒充冬蟲夏草等。因此，有必要對(duì)同名異物、同物異名的生藥，通過調(diào)查研究，加以科學(xué)鑒定，澄清品名，盡量做到一藥一名，互不混淆，保證生藥的真實(shí)性，以及療效和用藥安全。開展生藥的品質(zhì)評(píng)價(jià)，制訂生藥的鑒別依據(jù)和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)十分重要；對(duì)來源單一的常用生藥及其類同品以及進(jìn)口生藥，也都需要進(jìn)行鑒定研究，制訂可供鑒別、檢驗(yàn)的依據(jù)和標(biāo)準(zhǔn)，以保證質(zhì)量。

開展生藥的鑒定研究，在發(fā)掘新藥資源和尋找進(jìn)口生藥的代用品方面，也有重要意義。血竭，產(chǎn)于印度尼西亞等地，進(jìn)口生藥，經(jīng)考查發(fā)現(xiàn)，劍葉龍血樹在我國(guó)云南應(yīng)用迄今已有500余年歷史，經(jīng)鑒定研究以“廣西血竭”為名入藥。第二節(jié)生藥鑒定的依據(jù)和一般程序一、生藥鑒定的法定依據(jù)《中國(guó)藥典》局頒藥品標(biāo)準(zhǔn)二、生藥鑒定的一般程序一、生藥的取樣

1、取樣前：

詳細(xì)記錄品名、產(chǎn)地、規(guī)格、等級(jí)及包件式樣是否一致，檢查包裝的完整性、清潔程度及有無水跡、霉變或污染等情況，作詳細(xì)記錄。

2、取樣原則：

總包件少于5件，逐包取樣；總包件5～99件，取樣5件；總包件100～

1000件，按5%取樣；超過1000件的，超過部分按1%取樣貴重藥無論多少件，要逐包取樣。3、破碎的、粉末狀的或大小在1厘米以下的生藥，用采樣器取樣，每包至少在不同部位取2～

3份樣品。4、將抽取的樣品混勻（總樣品），依對(duì)角線劃×，分為四等份，取對(duì)角兩份。重復(fù)操作至足夠完成必要的試驗(yàn)及留樣數(shù)（平均樣品）。

平均樣品的量不少于實(shí)驗(yàn)所用量的3倍數(shù)，即1/3實(shí)驗(yàn)分析，1/3供復(fù)核，1/3留樣保存。二、雜質(zhì)檢查

雜質(zhì)包括非藥用部位、沙石、泥塊、塵土等，算重量百分比。雜質(zhì)重量百分比（%）=

雜質(zhì)重量供試品重量×100%第三節(jié)生藥鑒定的方法一、來源鑒定應(yīng)用植（動(dòng)、礦）物的分類學(xué)等知識(shí)，對(duì)生藥的來源進(jìn)行鑒定，確定其正確的學(xué)名，以保證應(yīng)用品種的準(zhǔn)確無誤。以原植物鑒定為例：1、觀察植物形態(tài)對(duì)具有較完整植物的標(biāo)本，應(yīng)注意其根、莖、葉、花、果實(shí)等器官的觀察，對(duì)繁殖器官(花、果、孢子囊、子實(shí)體等)應(yīng)特別仔細(xì)，可借助放大鏡或解剖顯微鏡，觀察微小的特征，如毛茸、腺點(diǎn)的形態(tài)構(gòu)造。同時(shí)注意對(duì)藥用部位進(jìn)行觀察。2、核對(duì)文獻(xiàn)根據(jù)檢品的形態(tài)特征及其產(chǎn)地、別名、效用等線索，可查閱相關(guān)的中草藥書籍和圖鑒，加以分析對(duì)照。重要參考文獻(xiàn)、著作：

《中國(guó)植物志》、《中國(guó)高等植物圖鑒》、《新華本草綱要》、《中國(guó)中藥資源叢書》；

《中藥志》、《中華本草》、《中國(guó)藥材學(xué)》、《常用中藥材品種整理和質(zhì)量研究》、《全國(guó)中草藥匯編》、《中藥鑒定學(xué)》等。3、核對(duì)標(biāo)本當(dāng)確定未知種是什么科屬時(shí)，可以到有關(guān)植物標(biāo)本館核對(duì)已定學(xué)名的該科屬標(biāo)本。要得到正確的鑒定，必須要求標(biāo)本館中已定學(xué)名的標(biāo)本正確可靠。二、性狀鑒定生藥性狀鑒定是運(yùn)用人體的感官看、摸、聞、嘗及水試、火試等直觀的方法，對(duì)生藥的性狀，包括形態(tài)、大小、色澤、表面、質(zhì)地、斷面、氣味等特征作為依據(jù)而進(jìn)行鑒別的方法。性狀鑒定主要觀察完整的生藥及飲片。性狀鑒定內(nèi)容：1.形狀：生藥的形狀與藥用部位有關(guān)；2.大小：指生藥的長(zhǎng)短、粗細(xì)、厚薄等；3.色澤：各種生藥的顏色不同，同一生藥的色澤變化與生藥的質(zhì)量有關(guān)；4.表面特征：生藥表面的特征不盡相同，如光滑、粗糙、皺紋、皮孔或毛茸等；5.質(zhì)地：生藥的質(zhì)地特征可分軟硬、堅(jiān)韌、疏松、致密、黏性或粉性等。6.斷面：一是指生藥的自然斷面，二是指用刀橫切（或削）成的斷面。易折性、粉塵性、斷面特征。7.氣：揮發(fā)性物質(zhì)。8.味：口嘗的實(shí)際滋味。9.火試法：是利用生藥受火燃燒后產(chǎn)生的顏色，煙霧、響聲、膨脹、熔融聚散等變化現(xiàn)象進(jìn)行鑒別。10.水試：利用生藥在水中發(fā)生沉浮溶解、顏色變化、透明度、膨脹性、旋轉(zhuǎn)性、粘性、酸堿變化等現(xiàn)象進(jìn)行鑒別。如紅花浸水中，水變金黃色不褪色。蘇木投熱水中，水顯鮮艷的桃紅色。秦皮浸水中，水浸液顯藍(lán)色熒光等作為鑒別依據(jù)。三、顯微鑒定㈠顯微鑒定的一般方法

顯微鑒定是利用顯微鏡對(duì)生藥及成方制劑中藥味的組織、細(xì)胞或內(nèi)含物等特征進(jìn)行鑒別的一種方法。是生藥鑒別的重要手段之一。㈠顯微鑒定常用的方法1.組織切片：橫切片或縱切片選取生藥適當(dāng)部位，用徒手或滑走切片法制作切片，用甘油醋酸試液、水合氯醛試液或其它試液處理后觀察。必要時(shí)可選用石蠟切片法制片觀察。對(duì)于根、根莖、莖藤、皮類等，一般制作橫切片觀察，必要時(shí)制縱切片。2.表面制片：鑒定葉、花、果實(shí)、種子、全草等類生藥，可取葉片、萼片、花冠、果皮、種皮制表面片，加適宜試液，觀察各部位的表面（皮）特征。方法為水合氯醛液，在小火焰上微微加熱透化。3.粉末制片

粉末生藥可選用甘油醋酸試液，水合氯醛試液或其他適當(dāng)試液處理后觀察。為了使細(xì)胞、組織能觀察清楚，需用水合氯醛液裝片透化。4.解離組織片如需觀察細(xì)胞的完整形態(tài)，需利用化學(xué)試劑使組織中各細(xì)胞間的細(xì)胞質(zhì)溶解，使細(xì)胞分離，再裝片觀察。㈡中成藥的顯微鑒定

主要應(yīng)用粉末鑒定的方法加以鑒定。

四、理化鑒定

生藥的理化鑒定是利用物理的或化學(xué)的方法，對(duì)生藥及其制劑中所含主要化學(xué)成分或有效成分進(jìn)行定性和定量分析，來鑒定生藥品質(zhì)優(yōu)劣程度的一種方法。一般應(yīng)用于含不同化學(xué)成分生藥的鑒定，及生藥同名異物，或性狀相似又無明顯顯微特征的生藥鑒別。㈠化學(xué)定性反應(yīng)生藥的化學(xué)成分能與某些化學(xué)試劑產(chǎn)生特殊顏色、沉淀、結(jié)晶等反應(yīng)，鑒別生藥的真?zhèn)巍＂骘@微化學(xué)反應(yīng)

顯微化化學(xué)反應(yīng)是將生藥的干粉、手切片或浸出液少量，置于載玻片上，滴加某些化學(xué)試劑使產(chǎn)生沉淀或結(jié)晶，在顯微鏡下觀察反應(yīng)結(jié)果；或產(chǎn)生特殊的顏色，從而進(jìn)行鑒定。㈢微量升華

利用生藥中所含的某些化學(xué)成分，在一定溫度下能升華的性質(zhì)，獲得升華物，在顯微鏡下觀察其形狀、顏色以及化學(xué)反應(yīng)作為鑒別特征。例如：茶葉的升華物，為白色針狀結(jié)晶（咖啡堿）。大黃的升華物為黃色針狀或羽狀結(jié)晶（蒽醌化合物），加堿液溶解并顯紅色。㈣熒光分析

熒光分析是利用生物中的某些化學(xué)成分，接受自然光或紫外光照射時(shí)，能發(fā)生熒光，其特性和強(qiáng)度可以進(jìn)行定性或定量分析。㈤物理常數(shù)

物理常數(shù)包括相對(duì)密度、旋光度、折光率、凝點(diǎn)、熔點(diǎn)等。對(duì)于油脂類、揮發(fā)油及樹脂類藥材的真實(shí)性和純度的鑒別具有特別重要的意義。㈥色譜法

色譜法又稱層析法，是一種對(duì)混合物進(jìn)行分離和分析的物理化學(xué)方法，也是生藥化學(xué)成分分離和鑒別的重要方法之一。根據(jù)色譜分離原理分類可分為吸附色譜、分配色譜、離子交換色譜與排阻色譜等。根據(jù)色譜分離方法分類可分為紙色譜法、薄層色譜法、柱色譜法、氣相色譜法、高效液相色譜法等。㈦分光光度法分光光度法是通過測(cè)定被測(cè)物質(zhì)在某些特定波長(zhǎng)處或一定波長(zhǎng)范圍內(nèi)光的吸收度，對(duì)該物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析的方法。

1、紫外分光光度法

2、可見分光光度法

3、紅外分光光度法

4、原子吸收分光光度法㈧水分測(cè)定

2010版《中國(guó)藥典》規(guī)定水分含量的測(cè)定方法有4種：烘干法：適用于不含或少含揮發(fā)性成分的生藥。甲苯法：適用于含揮發(fā)性成分的生藥。減壓干燥法：適用于含揮發(fā)性成分的貴重生藥。氣相色譜法：

㈨灰分測(cè)定

總灰分：生藥本身經(jīng)過灰化后遺留的不揮發(fā)性無機(jī)鹽、生藥表面附著的不揮發(fā)性無機(jī)鹽類。總灰分的大小反映生藥中泥土、砂石等無機(jī)雜質(zhì)含量。對(duì)于組織中含有較多無機(jī)鹽類的生藥，應(yīng)測(cè)定酸不溶性灰分方能反映生藥中無機(jī)雜質(zhì)的含量。㈩浸出物測(cè)定針對(duì)有效成分不明確或尚無精確定量方法的生藥，可進(jìn)行浸出物測(cè)定。（十一）揮發(fā)油測(cè)定（十二）含量測(cè)定對(duì)生藥的有效成分、主要成分、指示性成分、有毒成分的含量測(cè)定。

五、生物檢定以藥物的藥理作用為基礎(chǔ)，通過比較檢品與相應(yīng)對(duì)照品或標(biāo)準(zhǔn)品在一定條件下產(chǎn)生特定生物反應(yīng)的劑量比例，測(cè)得檢品的效價(jià)。

第四節(jié)生藥鑒定的新技術(shù)和新方法簡(jiǎn)透射電子顯微鏡、掃描電子顯微鏡、掃描電子顯微鏡+X射線衍射能譜分析等儀器的應(yīng)用；組織化學(xué)色譜法技術(shù)的應(yīng)用；計(jì)算機(jī)圖形學(xué)、計(jì)算機(jī)三維重建、體視學(xué)和圖像分析系統(tǒng)的應(yīng)用；分子生物技術(shù)的應(yīng)用。