保健食品用原料蜂蜜1范圍本文件適用于保健食品用原料蜂蜜。2規范性引用文件下列文件對于本文件的應用是必不可少的。下列文件中所包含的部分條款通過相關標準的引用而成為本標準的部分內容。凡是注明日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注明日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改版本）適用于本文件。GB2761食品安全國家標準食品中真菌毒素限量GB2762食品安全國家標準食品中污染物限量GB2763食品安全國家標準食品中農藥最大殘留限量GB5009.11食品安全國家標準食品中總砷及無機砷的測定GB5009.12食品安全國家標準食品中鉛的測定GB5009.17食品安全國家標準食品中總汞及有機汞的測定GB16740食品安全國家標準保健食品《中華人民共和國藥典》一部《中華人民共和國藥典》四部3技術要求3.1來源蜂蜜為蜜蜂科昆蟲中華蜜蜂ApisceranaFabricius或意大利蜂ApismelliferaLinnaeus所釀的蜜。春至秋季采收，濾過。3.2感官要求應符合表1的規定。表1感官要求項目要求檢驗方法色澤白色至淡黃色或橘黃色至黃褐色在日光下觀察顏色；如斷面不易觀察，可削平后觀察滋味、氣味氣芳香，味極甜滋味可取少量直接口嘗，或加熱水浸泡后嘗浸出液；氣味可直接嗅聞，或在折斷、破碎或搓揉時進行形態本品為半透明、帶光澤、濃稠的液體，放久或遇冷漸有白色顆粒狀結晶析出在日光下觀察；長度、寬度及厚度測量時應用毫米刻度尺；質地是指用手折斷時的感官感覺3.3理化指標應符合表2的規定。表2理化指標項目指標檢驗方法水分，%≤24.0《中華人民共和國藥典》2020年版四部通則0622“折光率測定法”方法相對密度，≥1.349《中華人民共和國藥典》2020年版四部通則0601“相對密度測定法”方法寡糖應符合規定附錄A5-羥甲基糠醛，%（以干燥品計）≤0.004附錄B蔗糖、麥芽糖，%（以干燥品計）≤5.0附錄C鉛（以Pb計），mg/kg≤0.5GB5009.12總砷（以As計），mg/kg≤1.0GB5009.11總汞（以Hg計），mg/kg≤0.3GB5009.17注：其他未列污染物限量應符合GB2762相應食品類別（名稱）的規定或有關規定；未列農藥最大殘留限量應符合GB2763相應食品類別/名稱的規定或國家有關規定。3.5真菌毒素限量真菌毒素限量應符合GB2761中相應食品類別（名稱）的規定或有關規定。4其他保健食品所用原料為本品的炮制加工品，其炮制加工前的原料應符合本標準。炮制方法為凈制、切制的，除另有規定外，炮制加工品應符合本標準。炮制方法為其他炮制工藝的，炮制加工品應符合相應標準的規定。

附錄A（規范性附錄）寡糖薄層鑒別檢驗方法A.1一般規定本標準所用試劑在沒有注明其他要求時，均指分析純試劑和GB/T6682規定的三級水。實驗中所用的溶液在未注明用何種溶劑配制時，均指水溶液。A.2方法提要本品經活性炭固相萃取柱在真空泵的吸引下，用7%乙醇洗脫，棄去洗脫液。再用50%乙醇洗脫，收集洗脫液，置水浴中減壓濃縮至干，殘渣加30%乙醇溶解提取后，采用薄層色譜法，以麥芽五糖為對照對樣品進行鑒別分析。A.3儀器A.3.1分析天平：感量為0.01mg和0.0001g。A.3.2真空泵。A.3.3水浴型旋轉蒸發器。A.3.4鼓風干燥箱。A.3.5點樣器：玻璃毛細管（直徑為0.5mm，長度為100mm）或微量注射器。A.3.6色譜展開缸：密閉玻璃槽（長度、寬度及高度可根據實際使用進行選擇）。A.3.7玻璃噴霧瓶。A.4試劑和耗材A.4.1活性炭固相萃取柱。A.4.2硅藻土。A.4.3活性炭。A.4.4乙醇。A.4.5正丙醇。A.4.6水。A.4.7三乙胺。A.4.8苯胺-二苯胺-磷酸的混合溶液：取二苯胺1g，苯胺1mL，磷酸5mL，加丙酮至50mL，混勻。A.4.9高效硅膠G薄層板。A.4.10對照提取物麥芽五糖對照品英文名稱、CAS號、分子式和相對分子量見表A.1。表A.1化學對照品（標準品）信息中文名稱英文名稱CAS號分子式相對分子量麥芽五糖Maltopentaose34620-76-3C30H52O26828.72A.5色譜條件點樣量：3μL；展開劑：正丙醇-水-三乙胺（60∶30∶0.7，v/v/v）；觀測條件：日光下檢視。A.6操作方法A.6.1對照提取物溶液的制備：取麥芽五糖對照品，加30%乙醇制成每1mL含1mg的溶液，備用。A.6.2供試品溶液的制備：取蜂蜜2g，置燒杯中，加入10mL水溶解后，緩緩加至活性炭固相萃取柱（在固相萃取空柱管底部塞入一個篩板，壓緊，置固相萃取裝置上。稱取硅藻土0.2g，加水適量混勻，用吸管加至固相萃取柱管中，自然沉降形成3mm厚的硅藻土層，打開真空泵吸引，稱取活性炭0.5g加10mL水攪拌，混勻，用吸管加入，在真空泵的吸引下使活性炭沉降，當水面接近活性炭層面時，再次注入0.2g用水混勻的硅藻土，在真空泵的吸引下，以1秒/滴的速度用25mL的水預洗，當液面到達柱面上2mm時關掉活塞，再壓入上篩板，備用）中，打開活塞，在真空泵的吸引下，使溶液通過柱子，待液面下降到柱面以上2mm時，用7%乙醇25mL洗脫，棄去洗脫液。再用50%乙醇10mL洗脫，收集洗脫液，置65℃水浴中減壓濃縮至干，殘渣加30%乙醇1mL使溶解，備用。A.6.3鑒別分析方法：照薄層色譜法（《中華人民共和國藥典》2020年版四部0511）試驗，分別吸取供試品溶液與對照品溶液各3μL，分別點于同一高效硅膠G薄層板上，放入薄層板，展開，取出，晾干，噴以苯胺-二苯胺-磷酸的混合溶液，加熱至斑點顯色清晰，置日光下檢視。A.7結果判別供試品溶液色譜中，在與對照品溶液麥芽五糖相應的位置上，不應顯示相同顏色的熒光斑點。

附錄B（規范性附錄）5-羥甲基糠醛檢驗方法B.1一般規定本標準所用試劑和水，在沒有注明其他要求時，均指分析純試劑和GB/T6682規定的三級水。實驗中所用的溶液在未注明用何種溶劑配制時，均指水溶液。B.2方法提要本品經10%甲醇溶解后，采用反相高效液相色譜法測定，以內標法計算其中5-羥甲基糠醛的含量。B.3儀器B.3.1分析天平：感量為0.01mg和0.0001g。B.3.2紫外-可見分光光度計。B.3.3高效液相色譜儀：配有紫外檢測器。B.4試劑和耗材B.4.1乙腈B.4.2甲酸。B.4.3甲醇。B.4.40.45μm微孔濾膜（有機相）。B.4.5對照品鳥苷、5-羥甲基糠醛對照品英文名稱、CAS號、分子式和相對分子量見表B.1。表B.1化學對照品（標準品）信息中文名稱英文名稱CAS號分子式相對分子量鳥苷Guanosine118-00-3C10H13N5O5283.245-羥甲基糠醛5-Hydroxymethyl-2-furaldehyde67-47-0C6H6O3126.11B.5色譜條件及系統適用性B.5.1色譜條件色譜柱：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；流動相：乙腈-0.1%甲酸溶液（5∶95,v/v），等度洗脫；檢測波長：5-羥甲基糠醛檢測波長為284nm，鳥苷檢測波長為254nm。進樣量：10μL；流速：1mL/min。B.5.2系統適用性理論板數按鳥苷峰計算應不低于3000。B.6操作方法B.6.1對照品溶液的制備取鳥苷對照品適量，精密稱定，加10%甲醇制成每1mL含鳥苷0.2mg的溶液，搖勻，即得。另取5-羥甲基糠醛對照品適量，加10%甲醇制成每1mL含4μg的溶液，作為定位用。B.6.2供試品溶液的制備取蜂蜜1g，置燒杯中，精密稱定，加10%甲醇適量溶解，并分次轉移至50mL量瓶中，精密加入鳥苷對照品溶液1mL，加10%甲醇至刻度，搖勻，備用。B.6.3供試品溶液的測定照高效液相色譜法（《中華人民共和國藥典》2020年版四部0512）試驗，精密吸取供試品溶液10μl，注入液相色譜儀，測定；另取鳥苷對照品溶液，5-羥甲基糠醛對照品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，用以確定供試品色譜中5-羥甲基糠醛及鳥苷的色譜峰；以鳥苷對照品計算含量并乘以校正因子0.340進行校正，即得。B.7測定結果的計算B.7.1計算公式蜂蜜中5-羥甲基糠醛的含量以質量分數計，數值以%表示，按公式（B.1）計算：W=f×cS'×V×A式中：W：供試品中5-羥甲基糠醛的質量分數，%；f：為內標法校正因子0.340。c'S：為鳥苷的濃度（mg/mL）V：供試品溶液的稀釋體積（mL）；AX：A'Sm：供試品的稱樣量（g）。B.7.2重復性每個試樣取兩個平行樣進行測定，以算數平均值為測定結果，小數點后保留2位。在重復條件下兩次獨立測定的結果絕對差值不得超過算數平均值的10%。附錄C（規范性附錄）蔗糖、麥芽糖、果糖、葡萄糖檢驗方法C.1一般規定本標準所用試劑和水，在沒有注明其他要求時，均指分析純試劑和GB/T6682規定的三級水。實驗中所用的溶液在未注明用何種溶劑配制時，均指水溶液。C.2方法提要本品經加入40%乙腈溶解后，最終以反相高效液相色譜法測定，按標準曲線法計算蔗糖、麥芽糖、果糖、葡萄糖含量。果糖與葡萄糖含量比值不得小于1.0C.3儀器C.3.1分析天平：感量為0.01mg和0.0001g。C.3.2高效液相色譜儀：配有示差折光檢測器。C.4試劑和耗材C.4.1乙腈：色譜純。C.4.2乙腈。C.4.3C.4.4水。C.4.40.45μm微孔濾膜（有機相）。C.4.5對照品蔗糖、麥芽糖、果糖、葡萄糖對照品英文名稱、CAS號、分子式和相對分子量見表C.1。表C.1化學對照品（標準品）信息中文名稱英文名稱CAS號分子式相對分子量蔗糖Sucrose57-50-1C12H22O11342.30麥芽糖Maltose6363-53-7C12H22O11?H2O360.31果糖Fructose57-48-7C6H12O6180.16葡萄糖D-GlucoseAnhydrous50-99-7C6H12O6180.16C.5色譜條件及系統適用性C.5.1色譜條件色譜柱：以PrevailCarbohyrateES為色譜柱；流動相：乙腈-水（75∶25,v/v），等度洗脫；進樣量：15μL；流速：1mL/min。C.5.2系統適用性理論板數按果糖峰計算應不低于2000。C.6操作方法C.6.1對照品溶液的制備分別精密稱取果糖對照品1.0g，葡萄糖對照品0.8g，置同一具塞錐形瓶中，精密加入40%乙腈20mL，溶解，搖勻，作為果糖、葡萄糖對照品儲備液。另精密稱取蔗糖對照品0.2g，麥芽糖對照品0.2g，置同一具塞錐形瓶中，精密加入40%乙腈10mL，溶解，搖勻，作為蔗糖、麥芽糖對照品儲備液。C.6.2標準曲線的制備分別精密量取果糖、葡萄糖對照品儲備液和蔗糖、麥芽糖對照品儲備液，加40%乙腈配成不同濃度的果糖、葡萄糖、蔗糖、麥芽糖混合對照品溶液。每一濃度溶液配制中，儲備液的用量和稀釋體積見表C.2。精密吸取混合對照品溶液各15μL，注入液相色譜儀，分別測定。以對照品濃度為橫坐標，以峰面積值為縱坐標，繪制標準曲線，計算回歸方程。表C.2對照品儲備液的用量和稀釋體積信息序號果糖、葡萄糖蔗糖、麥芽糖稀釋體積混合對照品溶液濃度（mg/mL）對照品儲備液體積（mL）（mL）果糖葡萄糖蔗糖麥芽糖11.00.12551080.50.523.00.51015121.01.032.00.5520162.02.045.02.01025204.04.053.01.5530246.06.0C.6.3供試品溶液的制備取本品約1g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入40%乙腈20mL，溶解，搖勻，濾過，經0.45μm濾膜（C.4.4）濾過，取續濾液，即得。C.6.3供試品溶液的測定照高效液相色譜法（《中華人民共和國藥典》2020年版四部0512）試驗，精密量取供試品溶液15μL，注入高效液相色譜儀，測定，按標準曲線法計算蔗糖、麥芽糖、果糖、葡萄糖含量。C.7測定結果的計算C.7.