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雙光子和光譜掃描在激光共聚焦顯微鏡上的應用經驗浙江大學生命科學學院儀器與技術服務平臺機型：ZeissLSM710nlo32通道陣列PMT690-1080nm可調諧飛秒激光器激光共聚焦顯微鏡的非常規應用利用雙光子分辨目標熒光和自發熒光利用光譜掃描鑒定微弱熒光信號的真假轉基因材料快速篩選嘈雜背景下的細胞計數非線性效應光刻和深度掃描模擬近紅外光源GFP標記水稻根中自發熒光的清除單光子激發，水稻根帶有強烈的黃綠色自發熒光雙光子激發，自發熒光為藍色ex488nm，Lambdamodeex820nm

,lambdamodeGFP標記水稻根中自發熒光的清除雙光子激發下GFP熒光與自發熒光的波長分離，820nm激發時，僅采集493-542nm區間的信號以保證特異性Ex820nm,channelmode微弱或自發熒光存在下的信號鑒定Promoter::GFP載體注射煙草葉片（lambdamode成像）轉GFP弱表達

轉GFP不表達鏡下目視特征：綠色信號被強烈紅光掩蓋GFP和RFP弱時無法分辨Lambda合成圖特征：GFP：綠色偏藍自發熒光：綠色偏黃葉綠素熒光：紅色光譜特征：GFP：主發射峰位于約518nm副發射峰位于約540nm后者高度約為前者的一半呈臺階形自發熒光：在560nm左右對稱分布葉綠素熒光：625nm以上強烈信號GFP葉綠素非線性效應：碳納米管498518421原理：某些材料在雙光子激發，會發射波長為激發光一半的熒光利用不同波長的雙光子激光照射可能含碳納米管的靶向藥物，lambda掃描發現熒光信號呈現嚴格的倍頻關系Ex850Ex1000Ex1040光刻和深度掃描一種人工合成的透明有機晶體，在一定強度的近紫外光下會發生局部變性，從而具有雙光子效應在2個不同Z坐標下做bleach，ex458nmex900nm做z-stack，顯示多層光刻效果，信號隨深度增加而衰減葉表面蠟質層成像及厚度測

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