地塞米松和酚妥拉明對小鼠腎上腺素過量性肺水腫的影響

實驗目的探討地塞米松及酚妥拉明對大劑量腎上腺素引起的小鼠肺水腫的影響。實驗原理急性中毒性肺水腫是多種中毒可引起的嚴重并發癥之一。肺水腫病因復雜，主要病理改變為肺毛細血管壓力升高，肺泡細血管膜損傷及通透性增大使用大劑量的a受體激動劑一腎上腺素，可致肺動脈壓急劇升高，產生急性肺水腫。臨床上經常使用糖皮質激素治療急性肺水腫，但對于腎上腺素過量中毒所引起的肺水腫，使用糖皮質激素及僅一腎上腺素能受體阻滯劑的酚妥拉明的效果如何值得探討.本研究通過建立大劑量的腎上腺素所致小鼠肺水腫模型，探討使用地塞米松及酚妥拉明對小鼠肺水腫的影響。材料與方法實驗動物及分組小鼠24只，雌雄各半，體質量17．5～25．0g。小鼠先按體質量相近分為6組(雌雄各半)再將每組中的小鼠隨機分到6個實驗組中，每組小鼠也是雌雄各半。6組小鼠分別為腎上腺素組、腎上腺素+地塞米松組、腎上腺素+酚妥拉明組、地塞米松組、酚妥拉明、生理鹽水組(對照組)。藥品鹽酸腎上腺素注射液,地塞米松磷酸鈉注射液,甲磺酸酚妥拉明注射液器材聽診器，手術刀，眼科剪，注射器，操作臺，結扎線等實驗步驟給藥以0.09mg／10g體質量的量經腹腔給腎上腺素組小鼠注射濃度為1mg／ml的腎上腺素以0.09mg／l0g體質量的量經腹腔給腎上腺素+地塞米松組小鼠注射濃度為1mg／ml的腎上腺素后，按0.03mg／l0g體質量的量迅速經腹腔注射0.25mg／ml地塞米松以0.09mg／10g體質量的量經腹腔給予腎上腺素+酚妥拉明組小鼠注射濃度為1mg/ml的腎上腺素后，接著迅速注射濃度為0．1mg／ml的酚妥拉明，其用藥量為每鼠0．01mg／10g體質量以0．03mg／l0g體質量的劑量經腹腔給予地塞米松組小鼠注射濃度為0．125mg／ml的地塞米松。以注射濃度為0．1mg／ml的酚妥拉明，其用藥量為每鼠0．01mg／10g體質量以上各組小鼠腹腔注射藥液量均不足0．6ml，均以生理鹽水補足至0．6ml。

經腹腔給予生理鹽水組(對照組)每只小鼠注射0．6ml生理鹽水。計數小鼠呼吸頻率于注射藥物(或生理鹽水)前、給藥(或生理鹽水)后立即、給藥后5min、10min時分別計數小鼠每分鐘呼吸頻率。肺形態觀察和肺系數測定用聽診器小鼠肺部。小鼠死后(因肺水腫死亡或處死)，將鼠頸部及胸腔剖開，用線扎住氣管下端把肺完整地取下，稱肺的重量，計算肺系數：肺系數=肺重(mg)／體質量(g)，并觀察肺的顏色和形態結果各組小鼠的呼吸狀況

腎上腺素組用藥后的呼吸頻率先變慢后加快腎上腺素+地塞米松組用藥后的呼吸頻率明顯下降

腎上腺素+酚妥拉明組用藥后的呼吸頻率有所加快地塞米松組用藥后的呼吸頻率略下降后又上升生理鹽水組略下降注藥前,各組小鼠的呼吸頻率間差異無統計學意義(P>0．05)，注藥后,10min腎上腺素+地塞米松組與腎上腺素+酚妥拉明組的呼吸頻率之間差異具有顯著性(P<0．05全身狀況及肺的大體觀察生理鹽水組無明顯變化腎上腺素組小鼠除呼吸的深度明顯加深外有一只小鼠發生抽搐現象，給藥后29min后死亡腎上腺素+地塞米松組一只小鼠給藥后立即出現明顯的抽搐，2min后即死亡，吐出粉紅色的泡沫樣水腫液，一只給藥9min后死亡，也同樣出現抽搐的現象，其余4只僅有呼吸方面的變化，未出現死亡腎上腺素+酚妥拉明組有呼吸稍微加深的變化地塞米松組基本沒有變化生理鹽水組的肺外觀呈白色，較實，沒有水腫腎上腺組的肺呈紅色，體積明顯比生理鹽水組大，外觀飽滿，肺內含有大量水腫液腎上腺素+地塞米松組用藥后就死亡的肺比腎上腺素組大,呈深紅色，外觀飽滿，肺內含有大量水腫液，沒有死亡小鼠的肺比腎上腺素組的小，但也呈紅色腎上腺素+酚妥拉明組的肺大致呈白色，但有淤血點或小面積的紅色水腫區地塞米松組的肺外觀呈白色，與生理鹽水組基本相同酚妥拉明討論為什么給小鼠腹腔注射大劑量腎上腺素可以復制急性肺水腫模型？這主要是由于大劑量的腎上腺素作用于a-腎上腺素能受體，使受體密度較高的體循環小動脈劇烈收縮，微循環由于毛細血管前括約肌的收縮而大量關閉，使體循環的壓力急劇升高。心臟排血受到阻礙。而肺毛細血管上a-腎上腺素能受體較少，相對來講處于擴張狀態，因此肺循環內的壓力較小，使得大量體循環的血液轉入肺循環，造成了急性肺淤血。肺毛細血管的流體靜壓升高，液體濾入肺間質增加，另外肺毛細血管內壓的增大及毛細血管被動擴張可使毛細血管內皮細胞間隙擴大，導致血管的通透性增大（有研究表明注射了大劑量腎上腺素的小鼠，肺水腫是與血管加壓藥導致的流體靜壓增高引起的血液中的液體外滲和激肽釋放造成血管通透性增高有關）。組織損傷所產生的炎性介質可引起淋巴管閉塞或損傷，則淋巴回流代償受阻，使肺水腫加重為什么地塞米松會對其產生作用？地塞米松的這種抗肺水腫作用與他的抗炎作用有關。①激活特異的糖皮質激素受體②抑制某些細胞因子，包括白介素1(IL一1)、I13—6、IL、腫瘤壞死因子(TNF一a)和粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(GM—CSF)等③與其誘導脂皮素一1的生成和抑制炎性介質有關④“非基因組效應機制”，該效應可能由細胞膜上的多種“受體”樣分子介導，然后通過環一磷酸腺苷(cAMP)和鈣離子(Ca2+)等信號通路激活蛋白激酶C、蛋白激酶A去誘導細胞的一系列反應地塞米松同時能減輕血管擴張，改變血管的反應性，增加肺內血管的張力，迅速降低毛細血管的通透性并能促進Ⅱ型肺泡上皮細胞的分泌功能，有助于水腫液的吸收和消退。而地塞米松的允許作用可以增強腎上腺素的縮血管作用，使肺水腫加重，與他可以延長腎上腺素作用時間有關為什么酚妥拉明對其有作用？a-腎上腺素能受體拮抗劑酚妥拉明能松弛血管平滑肌、有較強的擴血管作用既可擴張小動脈，降低外周小動脈的阻力，減輕心臟后負荷，又可擴張靜脈系統，減輕心臟前負荷