工程名稱：血管發(fā)育和穩(wěn)態(tài)維持的遺傳及表觀遺傳機(jī)制

2023.12023.8總后勤部衛(wèi)生部一、關(guān)鍵科學(xué)問題及爭(zhēng)論內(nèi)容關(guān)鍵科學(xué)問題脊椎動(dòng)物的血管發(fā)生和血管形成是一個(gè)高度保守的涉及多種細(xì)胞特化和定管發(fā)生和血管形成漸漸發(fā)育成具有精細(xì)簡(jiǎn)單等級(jí)構(gòu)造的功能性血管網(wǎng)絡(luò)并保持注的關(guān)鍵科學(xué)問題。具體包括：1、血管發(fā)生的遺傳和表觀遺傳機(jī)制：血管系統(tǒng)形態(tài)建成的分子機(jī)制；表觀遺傳修飾的轉(zhuǎn)變〔重點(diǎn)關(guān)注組蛋白的甲基化修飾以及基因組的甲基化修飾〕是否可以在血管形成過程中起到調(diào)整作用。2、血管內(nèi)皮細(xì)胞特化和定向分化的分子根底：原始造血系統(tǒng)中成血管母細(xì)胞分化成血細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞的譜系關(guān)系及其分子機(jī)理；定向造血系統(tǒng)中主動(dòng)脈腹側(cè)內(nèi)皮細(xì)胞如何維持其細(xì)胞特異性或轉(zhuǎn)化為造血干細(xì)胞的分子機(jī)理；冠脈內(nèi)皮細(xì)胞特化的分子機(jī)制。3、重要信號(hào)通路影響血管重塑的遺傳和表觀遺傳機(jī)制：TGF-和VEGF信號(hào)通路及其調(diào)控的miRNA-血管重塑和穩(wěn)態(tài)維持的功能和機(jī)制。4、血管損傷后重塑的分子機(jī)制：血管損傷及重塑過程中凋亡平滑肌細(xì)胞的炎癥放大作用及其機(jī)制；牽拉刺激引起內(nèi)皮細(xì)胞炎癥分子的釋放；血管損傷及重塑過程中血管平滑肌細(xì)胞增生的分子機(jī)制和干預(yù)措施。主要爭(zhēng)論內(nèi)容1、血管發(fā)生是血管發(fā)育的早期大事，涉及圖式形成、內(nèi)皮細(xì)胞命運(yùn)打算和分化等發(fā)育生物學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)根本科學(xué)問題。本工程擬利用斑馬魚作為模式生物，通過大規(guī)模誘變技術(shù)篩選血管發(fā)生特別的突變體，查找血管及相關(guān)組織器官發(fā)育的重要調(diào)控因子與標(biāo)記基因，進(jìn)而深入爭(zhēng)論它們?cè)谘馨l(fā)生過程中的功能。在血管發(fā)生的表觀遺傳學(xué)機(jī)制方面，通過表達(dá)譜測(cè)序來得到斑馬魚中特定時(shí)期可能存在的甲基化酶或去甲基化酶，克隆得到這些基因，通過體mRNA建表達(dá)甲基化酶或者去甲基化酶的轉(zhuǎn)基因魚，結(jié)合體外生化試驗(yàn)驗(yàn)證這些甲基化酶或者去甲基化酶在血管形成不同時(shí)期的生理功能。此外，通過轉(zhuǎn)基因方法在血管內(nèi)皮細(xì)胞中特異性表達(dá)綠色或紅色熒光蛋白〔GFPRF合長時(shí)間在體雙光子或共聚焦顯微鏡成像技術(shù)，實(shí)時(shí)記錄和跟蹤中腦內(nèi)的全部血管的三維形態(tài)變化。進(jìn)而，運(yùn)用圖像分析、流體力學(xué)模型分析、細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)等手段，爭(zhēng)論腦血管網(wǎng)絡(luò)發(fā)生和發(fā)育的宏觀規(guī)律和分子機(jī)制。2、探討血管內(nèi)皮細(xì)胞特化和定向分化的分子根底。利用多種特異性標(biāo)記血管系統(tǒng)的轉(zhuǎn)基因魚和大規(guī)模誘變技術(shù)篩選影響血管發(fā)生和造血系統(tǒng)的突變體，通過共聚焦顯微鏡進(jìn)展實(shí)時(shí)觀看并比較野生型與突變體中血管發(fā)生和造血過程的差異，爭(zhēng)論血液血管母細(xì)胞分化成血管內(nèi)皮細(xì)胞和血細(xì)胞的譜系關(guān)系及其調(diào)控網(wǎng)絡(luò)。同時(shí)，結(jié)合內(nèi)皮細(xì)胞特異性基因敲除技術(shù)，爭(zhēng)論主動(dòng)脈腹側(cè)內(nèi)皮細(xì)胞定向分化為造血干細(xì)胞的分子調(diào)控機(jī)理。此外，查找高等哺乳動(dòng)物小鼠的冠脈內(nèi)皮細(xì)胞起源，利用Cre-LoxP技術(shù)提醒Notch信號(hào)通路調(diào)控冠脈發(fā)生以及內(nèi)皮細(xì)胞生物學(xué)活性的分子機(jī)制，說明心外膜促進(jìn)冠脈發(fā)生的重要生理功能和機(jī)制。3、在重要信號(hào)通路影響血管重塑的遺傳和表觀遺傳機(jī)制爭(zhēng)論方面，主要利用基于Cre-LoxP系統(tǒng)的小鼠組織特異性條件基因敲除技術(shù)，構(gòu)建血管內(nèi)皮細(xì)胞、血管平滑肌細(xì)胞、腦血管內(nèi)皮細(xì)胞特異性基因敲除小鼠，深入爭(zhēng)論不同類型TGF-VEGF及這種反響性特別如何導(dǎo)致血管重塑特別以及心血管疾病的發(fā)生。同時(shí)篩選TGF-調(diào)控的miRNAmiRNA-壁細(xì)胞相互作用、及其在血管重塑過程中的功能和機(jī)制進(jìn)展深入的探討。4、綜合利用基因敲除小鼠和多種血管損傷模型，深入爭(zhēng)論血管損傷后重塑的分IGF-1R-SGK1的作用、爭(zhēng)論介導(dǎo)血管損傷后凋亡平滑肌細(xì)胞的炎癥放大作用的關(guān)鍵分子機(jī)制、說明血管損傷及重構(gòu)過程中炎癥細(xì)胞的來源、說明阻斷COX-2來源的前列腺素對(duì)血管損傷后內(nèi)膜增生的保護(hù)作用及其分子機(jī)制。同時(shí)明確深海EPA/DHACOXEPA能否調(diào)整動(dòng)脈損傷后血管重塑、以及深海魚油EPA與阿斯匹林協(xié)同調(diào)整血管損傷后重塑以及抗血栓作用和機(jī)制。二、預(yù)期目標(biāo)總體目標(biāo)：開展血管發(fā)生和血管形成的遺傳和表觀遺傳機(jī)制爭(zhēng)論。本工程的總體目標(biāo)如下：化和定向分化的調(diào)控機(jī)制；明確重要信號(hào)通路及其調(diào)控因子包括miRNA調(diào)整血管重塑穩(wěn)態(tài)維持的功能和機(jī)制；探究血管損傷后重塑的分子機(jī)制及其干預(yù)措施。爭(zhēng)論團(tuán)隊(duì)。五年預(yù)期目標(biāo)：1、覺察一批的調(diào)控血管發(fā)生和血管形成的基因、組蛋白修飾因子或miRNA，說明這些調(diào)控因子影響血管發(fā)育的生理功能和分子機(jī)制；研制一批模擬人類心血管疾病的型遺傳修飾動(dòng)物模型；篩選鑒定一批具有潛在臨床應(yīng)用價(jià)值的心血管疾病診斷及治療的的分子靶標(biāo)。2、建立一整套血管發(fā)生和血管形成爭(zhēng)論的技術(shù)平臺(tái)和技術(shù)體系。3、培育一批中青年學(xué)術(shù)帶頭人和學(xué)術(shù)骨干；培育爭(zhēng)論生〔含碩、博50博士后12名以上。4、在國際一流雜志〔IF>10〕發(fā)表論文8篇以上，在有影響力的雜志〔IF>5〕上發(fā)表論文20篇以上。三、爭(zhēng)論方案總體爭(zhēng)論思路和工程爭(zhēng)論的技術(shù)路線及可行性側(cè)重，又嚴(yán)密連接。課題組間通過合作相互促進(jìn)。課題一：血管發(fā)生和調(diào)控的分子機(jī)制選到的轉(zhuǎn)基因庫入手，通過FACS分選結(jié)合一代測(cè)序技術(shù)得到血管及相關(guān)組織趣的基因，特別是編碼甲基化酶、去甲基化酶的基因。隨后，綜合運(yùn)用多種手段mRNA或morpholino〔MO〕Hsp、Gal4/UAS等系統(tǒng)的時(shí)空特異性轉(zhuǎn)基因魚系以穩(wěn)定轉(zhuǎn)變基因的表達(dá)，或者通過人工鋅指核酸酶〔ZFN〕介導(dǎo)的基因打靶獲得突變體，同時(shí)從已有的突變體庫中遴〔通過整體胚胎原位雜交〕檢測(cè)血管的發(fā)育與分子調(diào)控機(jī)制供給必要的理論與試驗(yàn)根底。在血管網(wǎng)絡(luò)的形態(tài)發(fā)生方GFP或RFP過程。同時(shí)，結(jié)合圖像分析、流體力學(xué)模型分析，并應(yīng)用細(xì)胞生物學(xué)與分子生物總體爭(zhēng)論方案如下：課題二：血管內(nèi)皮細(xì)胞特化和分化的調(diào)控機(jī)制本課題將利用轉(zhuǎn)基因斑馬魚遺傳學(xué)和胚胎發(fā)育的優(yōu)勢(shì)以及本課題組篩選到統(tǒng)的轉(zhuǎn)基因斑馬魚sclα-DsRed和sclβ-GFP，通過共聚焦顯微鏡進(jìn)展實(shí)時(shí)觀看〔liveimage〕并比較野生型與突變體中造血及血管生成過程的差異，從而說明sclscl基因敲低的Scl的分子機(jī)制。主要通過Cre-LoxP系統(tǒng)的組織特異性條件基因敲除技術(shù)，構(gòu)建冠脈內(nèi)皮特異性Cre小鼠，同時(shí)利用體內(nèi)組織特異性轉(zhuǎn)錄因子標(biāo)記技術(shù)和免疫共ChIP-SeqNotchHIF轉(zhuǎn)錄因子在調(diào)控冠脈內(nèi)皮細(xì)胞的增值和分化過程中的分子機(jī)制。總體方案如下：課題三：血管內(nèi)皮細(xì)胞及其微環(huán)境在血管重塑中的作用和機(jī)制系統(tǒng)的組織特異性條件基因敲除技術(shù)，研制血以及VEGFR2 條件基因敲除小鼠，深入爭(zhēng)論血管內(nèi)皮細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞如何對(duì)TGF-和VEGF信號(hào)做出準(zhǔn)確反響并調(diào)整內(nèi)皮分泌血管重塑以及腦血管重塑和穩(wěn)定性的生理功能和機(jī)制利用高通量芯片酵母雙雜交免疫共沉淀結(jié)合質(zhì)譜型血管調(diào)控候選因子并深入爭(zhēng)論這些候選因子對(duì)血管生成靶基因的選擇性及表達(dá)的影響探究候選因子調(diào)控血管生成的分子機(jī)制此外利認(rèn)真血管特異性條件基因敲除小鼠篩選受TGF-信號(hào)調(diào)整的miRNA，并深入爭(zhēng)論這些miRNA調(diào)整血管內(nèi)皮細(xì)胞或者血管平滑肌細(xì)胞功能和穩(wěn)態(tài)維持的作用和機(jī)制總體爭(zhēng)論方案如下：課題四：血管損傷以及重塑的分子機(jī)制血管平滑肌細(xì)胞腔內(nèi)遷移與增生導(dǎo)致官腔變窄是血管成形術(shù)和自體血管移滑肌細(xì)胞凋亡的分子機(jī)制〔IGF-1R-SGK1信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路；進(jìn)一步利用基〔如巨噬細(xì)胞激活作用〕,結(jié)合特別轉(zhuǎn)基因工具小鼠的靜脈移植模型爭(zhēng)論靜脈移植過程中〔內(nèi)皮細(xì)胞剝脫〕為爭(zhēng)論模型〔仿照動(dòng)脈成形術(shù)，以轉(zhuǎn)基因動(dòng)物為爭(zhēng)論工具，圍繞膜磷脂代謝通路，〔如前列腺素或深海魚油代謝產(chǎn)物對(duì)動(dòng)脈損傷后血管重制劑總體爭(zhēng)論方案如下：創(chuàng)點(diǎn)和穩(wěn)態(tài)維持的分子機(jī)制。2、綜合利用遺傳修飾斑馬魚和小鼠的優(yōu)勢(shì)，實(shí)行正向遺傳學(xué)和反向遺傳學(xué)策略通路在血管重塑和穩(wěn)態(tài)維持中的機(jī)制，可能覺察血管發(fā)生和發(fā)育調(diào)控的的機(jī)制。3、建立和完善血管發(fā)育爭(zhēng)論的的爭(zhēng)論方法和技術(shù)體系。4、實(shí)現(xiàn)在血管發(fā)生、血管形成及其穩(wěn)態(tài)維持爭(zhēng)論方面的理論創(chuàng)。5、建立型人類心血管疾病的遺傳修飾動(dòng)物模型，為心腦血管疾病的預(yù)防和治療供給靶標(biāo)。課題設(shè)置課題1、血管發(fā)生和調(diào)控的分子機(jī)制主要爭(zhēng)論內(nèi)容：以斑馬魚為主要的爭(zhēng)論模式，充分利用本課題獨(dú)有的轉(zhuǎn)基因與突變魚系資源，綜合應(yīng)用morpholinoknockdown、人工鋅指核酸酶介導(dǎo)的基因定點(diǎn)突變等各種遺傳學(xué)手段，結(jié)合整體胚胎原位雜交、FACS分選以及深度測(cè)序等各種分子基化酶，通過注射mRNA、構(gòu)建多種形式的轉(zhuǎn)基因魚〔例如時(shí)空或組織特異性表達(dá)甲基化酶或去甲基化酶或其突變形式在血管形成的不同時(shí)期人為轉(zhuǎn)變整個(gè)胚胎中的組蛋白或DNA的甲基化水平，檢測(cè)這些基因?qū)ρ馨l(fā)生的作用。通過轉(zhuǎn)基因方法在血管內(nèi)皮細(xì)胞中特異性表達(dá)綠色或紅色熒光蛋白〔GFP或RFP，分子生物學(xué)等手段，爭(zhēng)論腦血管網(wǎng)絡(luò)發(fā)育的宏觀規(guī)律和分子機(jī)制。預(yù)期目標(biāo)：形態(tài)發(fā)生以及基因表達(dá)調(diào)控網(wǎng)絡(luò)提醒脊椎動(dòng)物血管系統(tǒng)發(fā)生和調(diào)控的遺傳與表腫瘤的預(yù)防、診斷與治療、再生醫(yī)學(xué)等應(yīng)用供給堅(jiān)實(shí)的理論根底。擔(dān)當(dāng)單位：北京大學(xué)、中國科學(xué)院上海生命科學(xué)爭(zhēng)論院、清華大學(xué)課題負(fù)責(zé)人：張博學(xué)術(shù)骨干：杜久林、賈順姬、于蓬春經(jīng)費(fèi)比例：28.8%課題二：血管內(nèi)皮細(xì)胞特化和分化的調(diào)控機(jī)制主要爭(zhēng)論內(nèi)容：DsRed或GFPscl-αscl-βscl轉(zhuǎn)基因斑馬魚。從單細(xì)胞水平觀看表達(dá)任何一scl亞型的細(xì)胞動(dòng)態(tài)行為以及其它們與其他因子的相互關(guān)系和相互作用。利用我們首創(chuàng)條件性〔可誘導(dǎo)性〕scl基因敲除斑馬魚品系，它可以在期望的細(xì)胞群scl亞型失活或恢復(fù)。加上利用斑馬魚大規(guī)模正向遺傳學(xué)66scl基因scl在淋巴管形成中的作用以及它與其它淋巴管形成調(diào)整因子的相互作用。Cre-LoxP系析，構(gòu)建體內(nèi)組織特異性轉(zhuǎn)錄因子標(biāo)記技術(shù)平臺(tái)，探究與Notch信號(hào)通路相互作用的型血管調(diào)控因子和下游調(diào)控血管內(nèi)皮細(xì)胞生物學(xué)特性的靶基因。預(yù)期目標(biāo)：說明斑馬魚原始造血系統(tǒng)中成血管母細(xì)胞分化成血細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞的脈內(nèi)皮細(xì)胞起源，利用Cre-LoxP技術(shù)爭(zhēng)論Notch信號(hào)通路如何調(diào)控冠脈發(fā)生，提醒Notch調(diào)控內(nèi)皮細(xì)胞生物學(xué)活性的機(jī)制，說明心外膜促進(jìn)冠脈發(fā)生的重要心肌病供給的治療靶點(diǎn)。擔(dān)當(dāng)單位：中國科學(xué)院上海生命科學(xué)爭(zhēng)論院、南方醫(yī)科大學(xué)課題負(fù)責(zé)人：周斌學(xué)術(shù)骨干：溫子龍、張文清、張躍波、廖旺軍、廖禹林經(jīng)費(fèi)比例：19.4%課題三：血管內(nèi)皮細(xì)胞及其微環(huán)境在血管重塑中的作用和機(jī)制主要爭(zhēng)論內(nèi)容：利用基于Cre-LoxP系統(tǒng)的組織特異性基因表達(dá)或基因敲除技術(shù)，通過系統(tǒng)的動(dòng)物整體和組織學(xué)表型分析、體外細(xì)胞功能檢測(cè)和體外生化試驗(yàn)深入爭(zhēng)論TGF-和VEGF信號(hào)在生理性血管重塑或者損傷后內(nèi)皮分泌炎癥分子以及血管重技術(shù)篩選與TGF-、雌激素和HIF-1信號(hào)通路相互作用的型血管形成調(diào)控候選因子以及受TGF-信號(hào)通路調(diào)整的miRNA/RT-PC〔ChIPChIP-seqWesternblot等方法檢測(cè)這些候選因子和miRNA對(duì)血管生成靶基因的選擇性及表達(dá)的影響，包括對(duì)血管生成相關(guān)的重要調(diào)整因子如血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子〔VEGF〕等表達(dá)的影響，探究候選因子和miRNA調(diào)控血管形成的分子機(jī)制；在體外細(xì)胞水平和體內(nèi)小鼠模型中檢測(cè)候選因子和miRNA對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖、遷移和血管形成的影響。預(yù)期目標(biāo)：說明TGF-和VEGF信號(hào)調(diào)整內(nèi)皮細(xì)胞及其微環(huán)境的遺傳和表觀遺傳機(jī)制及其調(diào)控血管重塑和穩(wěn)態(tài)維持的生理功能和機(jī)制。覺察一批的與TGF-、VEGF和雌激素信號(hào)通路相互作用的型血管形成調(diào)控候選因子以及受TGF-信號(hào)通路調(diào)整的miRNA，說明這些型調(diào)控因子在血管形成中的功能，為相關(guān)心血管疾病爭(zhēng)論供給的試驗(yàn)?zāi)Ｐ秃秃蜻x治療靶標(biāo)。擔(dān)當(dāng)單位：軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院、北京大學(xué)課題負(fù)責(zé)人：楊曉學(xué)術(shù)骨干：葉棋濃、羅金才、蘭雨、王劍、姜怡經(jīng)費(fèi)比例：32.4%課題四：血管損傷以及重塑的分子機(jī)制主要爭(zhēng)論內(nèi)容：由血管內(nèi)膜高度增生為特征的血管重塑導(dǎo)致血管堵塞性疾病的主要緣由如別爭(zhēng)論其內(nèi)在機(jī)制及其可能干預(yù)效果。靜脈移植后重塑機(jī)制：將圍繞IGF-1R-SGK1信號(hào)通路，利用機(jī)械拉力裝置、三維培育模型體外模型和IGF-1RSGK1基因敲除小鼠靜脈移植模米膠3維共培育模型，爭(zhēng)論凋亡平滑肌細(xì)胞的去除機(jī)制及炎癥放大作用。最終利用CX3CR1-GFP轉(zhuǎn)基因小鼠的靜脈移植模型，結(jié)合傳統(tǒng)的分子生物學(xué)方法說明制。動(dòng)脈機(jī)械損傷后重塑：將瞄準(zhǔn)血管急性炎癥分子COX-2及其脂質(zhì)代謝通路的關(guān)鍵酶與受體，利用小鼠的動(dòng)脈內(nèi)皮損傷模型，查找COX代謝的關(guān)鍵前列腺素、受體、介導(dǎo)血管平滑肌細(xì)胞遷移、增生的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路；同時(shí)，深海魚油〔EPA/DHA〕也通過COXCOX〔Resolvin產(chǎn)物〕。預(yù)期目標(biāo)：血管內(nèi)膜增生、管腔變窄是支架植入以及靜脈移植搭橋失敗的主要病理特如前列腺素參與了這一病理過程。本課題總的目標(biāo)：1〕利用靜脈移植模型，驗(yàn)源。2〕利用動(dòng)脈損傷模型，明確炎癥因子誘導(dǎo)表達(dá)基因COX-2在血管損傷后EPA在抗血管重塑論依據(jù)。擔(dān)當(dāng)單位：中國科學(xué)院上海生命科學(xué)爭(zhēng)論院、首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京安貞醫(yī)院課題負(fù)責(zé)人：余鷹學(xué)術(shù)骨干：杜杰、申毓軍、顧云經(jīng)費(fèi)比例：19.4%各課題間相互關(guān)系需求，設(shè)置四個(gè)子課題，總體狀況如下：觀遺傳調(diào)控機(jī)制。四、年度打算爭(zhēng)論內(nèi)容 預(yù)期目標(biāo)1、利用遺傳修飾斑馬魚模型分析血管發(fā)育相關(guān)候選基因及表觀遺傳修飾調(diào)整蛋白的時(shí)空表達(dá)譜。2、建立腦血管三維網(wǎng)絡(luò)定量分析方法。爭(zhēng)論腦血管三維網(wǎng)絡(luò)發(fā)育的規(guī)律。3、爭(zhēng)論scl-β的表達(dá)和主動(dòng)脈內(nèi)皮第細(xì)胞形成造血干細(xì)胞過程的相互關(guān)系。4、研制一系列在特定心血管系統(tǒng)細(xì)—胞特異性轉(zhuǎn)基因或條件基因敲除小鼠。5、篩選受血管發(fā)育重要信號(hào)通路調(diào)年節(jié)或相互作用的型調(diào)控分子或miRNA。6、利用小鼠靜脈移植模型和股動(dòng)脈用。

1、篩選得到一系列與斑馬魚血管生成相關(guān)的候選基因以及表觀遺傳修飾蛋白。2、初步提醒腦血管網(wǎng)絡(luò)發(fā)育的宏觀規(guī)律。3、初步說明斑馬魚爭(zhēng)論其原始造血系統(tǒng)中成血管母細(xì)胞分化成血細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞的譜系關(guān)系及其分子機(jī)理。4、獲得一系列表達(dá)或敲除效率明確的特定心血管細(xì)胞類型特異性轉(zhuǎn)基因或條件基因敲除小鼠。5、獲得型血管調(diào)控候選因子以及在不同類型心血管細(xì)胞中受重要信miRNA。6、建立完善小鼠靜脈移植模型、股的作用。7、發(fā)表SCI3-4篇。培育8-10名。爭(zhēng)論內(nèi)容 預(yù)期目標(biāo)1、遴選感興趣的基因，利用基于ZFN或其它方法的基因定點(diǎn)突變技2、爭(zhēng)論血管生和血管修剪在腦血基于G-CaMP的腦血管內(nèi)皮細(xì)胞鈣成像技術(shù)。3、爭(zhēng)論scl-β的表達(dá)和主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞形成造血干細(xì)胞過程的相互關(guān)系。第4、連續(xù)研制型在特定心血管系統(tǒng)變小鼠進(jìn)展系統(tǒng)的動(dòng)物整體和組織二學(xué)表型分析。5，利用各種蛋白質(zhì)間相互作用技術(shù)驗(yàn)證型候選因子與相關(guān)信號(hào)通路年中核心蛋白的相互作用。6，利用體外細(xì)胞模型，檢測(cè)候選基因或miRNA對(duì)心血管系統(tǒng)細(xì)胞增殖、遷移、血管生成、內(nèi)皮細(xì)胞-周細(xì)胞相互作用等功能的影響。7、建立機(jī)械牽張力刺激下的三維細(xì)胞培育模型爭(zhēng)論候選基因?qū)o脈移形成、炎性細(xì)胞浸潤、巨噬細(xì)胞表型分化的作用。 爭(zhēng)論COX下游的前列腺素產(chǎn)物的相應(yīng)受體在動(dòng)脈損傷后重塑的作用及其分子機(jī)制。

1、初步建立血管及相關(guān)組織器官的全基因組時(shí)空表達(dá)譜。制備3個(gè)候2-3個(gè)的血管生成相關(guān)候選基因的功能。2、提醒腦血管三維網(wǎng)絡(luò)形成的細(xì)胞生物學(xué)機(jī)制。3、明確斑馬魚定向造血系統(tǒng)中主動(dòng)脈腹側(cè)內(nèi)皮細(xì)胞如何維持其細(xì)胞特異性或轉(zhuǎn)化為造血干細(xì)胞的分子機(jī)理。4，明確構(gòu)建的型心血管細(xì)胞特異性條件基因敲除小鼠的血管相關(guān)表型。5，證明型血管調(diào)控候選因子與相關(guān)信號(hào)通路中核心蛋白存在相互作用。6，明確候選基因或miRNA對(duì)心血管系統(tǒng)細(xì)胞體外功能的影響。7IGF-1R、AMPK在機(jī)械牽張力引起的靜脈平滑肌細(xì)胞凋亡中CARD9cathepsinS、CD73在靜脈移植后血管重構(gòu)中的E受體在動(dòng)脈損傷后重塑的作用和可能介導(dǎo)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路。8、發(fā)表SCI5-6篇。培育8-10名。爭(zhēng)論內(nèi)容 預(yù)期目標(biāo)1、選擇具有血管及相關(guān)組織器官發(fā)的來源和它們進(jìn)入腦部后的遷移方式。爭(zhēng)論Ca2+在血管內(nèi)皮細(xì)胞遷移中的作用。3、爭(zhēng)論參與EHT過程轉(zhuǎn)錄因子如scl-β、runx1c-myb之間的分子機(jī)制框架。4、爭(zhēng)論胚胎發(fā)育過程中冠脈內(nèi)皮細(xì)第型鑒定。三5、體外爭(zhēng)論重要信號(hào)通路分子在不同類型心血管細(xì)胞缺失以及過表達(dá)年分泌、胞外基質(zhì)合成等功能的影響。蛋白對(duì)血管生成靶基因的選擇性及表達(dá)的影響。7、TGF-βmiRNA靶分子的鑒定和驗(yàn)證。靜脈中細(xì)胞凋亡的作用及靜脈移植后生內(nèi)膜形成的轉(zhuǎn)變。觀看EPA/DHA對(duì)血管損傷后重塑的影EPA/DHA是否同COX子機(jī)制。

6個(gè)個(gè)的血管生成相關(guān)候選基因的功能。進(jìn)入腦部的途徑。3scl-β在造血干細(xì)胞從血源性內(nèi)皮起始的過程。血管形成缺陷。5、明確TGF-β、VEGF信號(hào)通路特定分子對(duì)不同類型心血管細(xì)胞體外功能的影響。基因的選擇性及表達(dá)的影響。7TGF-β信號(hào)通路調(diào)整miRNA在心血管系統(tǒng)細(xì)胞中的靶分子。8、驗(yàn)證IGF-1R、AMPK通過調(diào)整靜脈平滑肌細(xì)胞凋亡調(diào)控靜脈移植中CARD9、CD73的激活；驗(yàn)證巨噬細(xì)胞活化后cathepsinS對(duì)于靜脈平滑肌的調(diào)控作用。了解EPA/DHA機(jī)制。9、發(fā)表SCI6-7篇。培育10-12名。爭(zhēng)論內(nèi)容 預(yù)期目標(biāo)管及相關(guān)組織器官發(fā)育缺陷的突變體，深入分析表型與作用機(jī)制。制。以及Ca2+在血管生長和修剪中的作用。3、連續(xù)爭(zhēng)論參與EHT過程轉(zhuǎn)錄因scl-β、runx1c-myb之間的分子機(jī)制框架。第4、通過芯片比對(duì)結(jié)合體外生化試驗(yàn)〔TGF-β信號(hào)、VEGF信號(hào)、Notch信號(hào)等〕在不同類型心血管細(xì)胞的靶基因。四5、確定與重要信號(hào)通路相互作用的年6、心血管系統(tǒng)組織特異性過表達(dá)miRNA轉(zhuǎn)基因小鼠的研制。起的靜脈平滑肌細(xì)胞凋亡的分子機(jī)EPA/DHA或可可油在血管損傷后的血管重塑有無協(xié)同作用和可能機(jī)制。

110個(gè)斑馬魚基因突變3個(gè)以上關(guān)鍵基因?qū)τ诎呖貦C(jī)制。3、明確scl-β與其他轉(zhuǎn)錄因子如runx1c-myb的相互作用的調(diào)控通路及其分子機(jī)制。4、提醒重要信號(hào)通路分子〔TGF-β信號(hào)、VEGF信號(hào)、Notch信號(hào)等〕調(diào)控內(nèi)皮細(xì)胞特化和分化中重要的分子機(jī)制。5、說明與重要信號(hào)通路相互作用的miRNA轉(zhuǎn)基因小鼠。7、說明IGF-1R、AMPK調(diào)控機(jī)