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PEG法檢測(cè)循環(huán)免疫復(fù)合物【實(shí)驗(yàn)原理】低濃度(3~5%)的聚乙二醇(PEG)能選擇性沉淀免疫復(fù)合物。在受檢血清中加入PEG,使最終濃度為3.75%,可將血清中免疫復(fù)合物沉淀下來(lái),需用分光光度計(jì)測(cè)定吸光度值(A)表示其相對(duì)量。本法簡(jiǎn)便易行,國(guó)內(nèi)己廣泛應(yīng)用作為檢測(cè)循環(huán)免疫復(fù)合物的初(粗)篩試驗(yàn)。【試劑與材料】1、0.1mol/L硼酸緩沖液:稱取硼砂0.4g,硼酸0.51g,溶于100ml蒸餾水中,調(diào)PH至8.6。2、4.166%PEG溶液:用硼酸緩沖液配制。
PEG的分子量為6000。3、受檢血清,試管,吸管,721分光光度計(jì)。實(shí)驗(yàn)方法1.吸待檢血清0.2ml,用硼酸緩沖液0.4ml稀釋(血清稀釋3倍)。2.分對(duì)照管和測(cè)定管:對(duì)照管:硼酸緩沖液2ml+稀釋血清0.22ml;測(cè)定管:4.166%PEG2ml+稀釋血清0.22ml(此時(shí)PEG最終濃度為3.75%)混勻后兩管均放4℃冰箱1h后取出,室溫放置10min。用7210.5×1cm比色杯,檢測(cè)測(cè)定管A450nm值,(對(duì)照管調(diào)零)。
結(jié)果判斷待測(cè)血清濁度值=(測(cè)定管A-對(duì)照管A)×10000正常值<510實(shí)驗(yàn)討論注意在本試驗(yàn)中要求的PEG終濃度為3.75%。受檢查血清為何要一定保持新鮮,放冰箱保存不得超過(guò)
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