附件乳及乳制品中硫氰酸根的測定BJS20仃09i范圍本方法規定了離子色譜一電導檢測器檢測乳和乳制品中硫氰酸根的方法。本方法適用于乳及乳制品（包括嬰幼兒配方乳粉，不包括特殊醫學用途嬰幼兒配方乳粉） 中硫氰酸根的測定。2原理樣品經過稀釋，乙腈沉淀蛋白后，過脫脂柱凈化，通過陰離子分析柱，根據分析柱對各 離子的親和力不同而進行分離，進入電導檢測器進行檢測，外標法定量。3試劑和材料除另有規定外，所有試劑均為分析純，水為符合 GB/T6682中規定的一級水。3.1試劑3.1.1乙腈（CHCN:色譜純。3.1.245mmol/L氫氧化鉀溶液：稱取2.52g氫氧化鉀用水定容至1000mL。3.1.370mmol/L氫氧化鉀溶液:稱取3.92g氫氧化鉀用水定容至1000mL。3.2標準品硫氰酸鈉標準樣品的分子式、相對分子量、 CAS登錄號見表1,純度〉99%表1硫氰酸鈉標準樣品的中文名稱、英文名稱、 CAS登錄號、分子式、相對分子量中文名稱英文名稱CAS登錄號分子式相對分子量硫氰酸鈉Sodiumsulfocyanate540-72-7NaSCN81.07223.3標準溶液配制331標準儲備液：稱取硫氰酸鈉標準品（ 3.2）0.1397g，用水溶解，定容至100mL,硫氰酸根離子含量為1000mg/L。貯存于4C冰箱中，有效期6個月。3.3.2標準應用液：準確吸取硫氰酸根離子的標準儲備液（ 3.3.1）1.0mL于1000mL的容量瓶中，用水定容至刻度，硫氰酸根離子含量為 1.0mg/L。貯存于4C冰箱中，有效期3個月。3.3.2)0.0、3.3.2)0.0、2.0、4.0、10.0、0.0、0.020、0.0400.0、0.020、0.040、250mg/3mL，可采用商品化RP柱。0.100、250mg/3mL，可采用商品化RP柱。聚二乙烯基苯聚合物反相填料（或等效的脫脂柱）海砂。4儀器和設備4.1離子色譜儀（IC）:帶電導檢測器和抑制器，可進行二步梯度淋洗分析天平：感量分別為0.01g和0.0001g。4.3冰箱：帶4C冷藏。4.4超聲波清洗器。5分析步驟樣品前處理固體奶粉樣品準確稱取樣品1g（精確到0.01g）于10mL比色管中，加去離子水4mL使充分溶解并混勻，再加入乙腈（3.1.1）定容至刻度并混勻，超聲萃取 15min后，于4C冰箱中靜置10min以沉淀蛋白。取上清液1mL至10mL比色管中，用水定容至刻度，將稀釋后的溶液經過濾膜（水相，0.45F和脫脂柱（3.4）過濾，濾液直接上機分析。液體奶樣品準確量取樣品4g（精確到0.01g）于10mL比色管中，再加入乙腈（3.1.1）定容至刻度并混勻，超聲萃取15min后，于4C冰箱中靜置10min以沉淀蛋白。取上清液1mL至10mL比色管中，用水定容至刻度，將稀釋后的溶液經過濾膜（水相， 0.45卩皿和脫脂柱（3.4）過濾，濾液直接上機分析。奶酪等固體樣品準確稱取樣品0.50g（精確到0.01g），加入1g海砂（3.5）研磨均勻，轉移至10mL比色管中，加水4mL使充分溶解混勻，再加入乙腈（3.1.1）定容至刻度并混勻，超聲萃取 15min后，于4C冰箱中靜置10min以沉淀蛋白。取上清液 1mL至10mL比色管中，用水定容至刻度，將稀釋后的溶液經過濾膜（水相， 0.45Am和脫脂柱（3.4）過濾，濾液直接上機分析。注：脫脂柱使用前依次用 10mL甲醇、15mL水通過，靜置活化 30min。5.2離子色譜條件5.2.1離子色譜柱參數：IonPacAS16型陰離子分析柱4mm250mm（配備lonPacAG16型陰離子保護柱4mmx50mm），或性能相當者。流速：1.0mL/min。523電導檢測器：配4mm的陰離子抑制器。524進樣量：100k。5.2.5淋洗液：氫氧化鉀溶液（3.1.2和3.1.3）梯度洗脫，洗脫梯度見表 2表2淋洗液梯度程序時間/min氫氧化鉀濃度/（mmol/L）0.045.013.045.013.170.018.070.018.145.023.045.05.3標準工作曲線制作將標準工作溶液（3.3.3）按儀器參考條件（5.2）進行測定。以標準工作溶液的濃度為橫 坐標，以峰面積為縱坐標繪制標準工作曲線。硫氰酸根離子標準溶液色譜分離圖見附錄 A。5.4樣品測定取樣品處理液，儀器參考（5.2）進行測定，以保留時間定性，測量樣品溶液的峰面積響應值，采用外標法定量。樣品溶液中硫氰酸根的響應值應在標準線性范圍內。試樣待測液響應值若超出標準曲線線性范圍，應稀釋后進行分析。6結果計算試樣中硫氰酸根的含量按式（1）計算獲得:式中:X—試樣中硫氰酸根的含量，單位為毫克每千克（X—試樣中硫氰酸根的含量，單位為毫克每千克（mg/kg);⑷⑷/mL);C—試樣中硫氰酸根峰面積對應的濃度，單位為微克每毫升（V—試樣定容體積，單位為毫升（mL；m—試樣的量，單位為克（g）;f—稀釋倍數。計算結果以重復性條件下獲得的兩次獨立測定結果的算術平均值表示，結果保留三位有效數

7精密度在重復性條件下獲得的兩次獨立測定結果的絕對差值不得超過算術平均值的 10%。8其他0.25按5.1樣品前處理中的稱樣量和處理方法檢測時，液體乳中硫氰酸根檢出限為0.25mg/kg，定量限為0.75mg/kg;乳粉中硫氰酸根檢出限為 1.0mg/kg，定量限為3.0mg/kg奶酪、奶油等乳制品中硫氰酸根檢出限為 2.0mg/kg，定量限為6.0mg/kg。附錄A硫氰酸根離子標準樣品色譜圖圖A.1 0.2mg/L硫氰酸根離子標準溶液色譜圖本方法負責起草單位：北