第三章

試驗室生物安全第1頁本章內容第一節試驗室生物安全概述

1第二節生物安全試驗室與設備要求2第三節生物安全試驗室操作技術規范3第2頁學習目標學習目標：

1.掌握：試驗室生物安全和試驗室生物安全保障概念；BSL-2試驗室安全操作技術規范；BSL-1、BSL-2在安全設備、個體防護方面不一樣。2.熟悉：病原微生物危害程度分類等級和試驗室生物安全防護水平分級；感染性物質操作與處理。

3.理解：臨床微生物試驗室布局及設計和建造要求。

本章重點：★試驗室生物安全概念，BSL-2試驗室生物安全設備要求、試驗室分布及安全防護措施。

★試驗室生物安全防護水平分級。感染性物質操作與處理。第3頁第一節

試驗室生物安全概述

一、試驗室生物安全與保障

（一）試驗室生物安全概念和防護措施1．試驗室生物安全概念

：試驗室生物安全是指用以避免試驗室發生病原體或毒素意外暴露及釋放防護標準、技術及實踐。第4頁第一節

試驗室生物安全概述

?安全設備和個體防護（一）試驗室生物安全概念和防護措施2．試驗室生物安全防護措施?試驗室設計與建造?試驗室生物安全管理規章制度?安全操作規程第5頁?安全設備和個體防護生物安全柜防護服安全裝備和個體防護裝備使用能夠實現將操作者和被操作對象之間隔離，以避免操作者被感染，也稱一級屏障。?安全設備生物安全柜、離心機罩帽、負壓隔離器等?個體防護帽子、手套、面罩、試驗服、隔離衣、防護服、鞋套等第6頁?試驗室設計與建造生物安全試驗室和外部環境隔離，稱為二級屏障，建立此級屏障目標是避免試驗室外人員被感染。第7頁?試驗室生物安全管理規章制度試驗室工作人員資格和培訓制度試驗室準入制度第8頁?安全操作規程第9頁第一節

試驗室生物安全概述

1.概念：即單位和個人為避免病原體或毒素丟失、被竊、濫用、轉移或故意釋放而采取安全措施。2.措施：

?

病原體和毒素貯存位置、接觸人員資料、使用統計、運輸統計、對材料進行滅活和（或）丟棄等情況最新調查成果；

?有關人員作用和責任；

?必要時公共衛生和安全保障管理部門在發生違反安全保障事件時介入程度、作用和責任等；

?調查并糾正違規行為。（二）試驗室生物安全保障概念和措施第10頁二、微生物危害評定進行微生物危害度評定最有用工具之一就是列出微生物危險度等級。適當初還應考慮以下因素：?病原微生物致病性和感染量；?暴露潛在后果；?自然傳輸途徑；?實驗室操作所致其他感染途徑；?病原微生物在環境中穩定性；第一節

試驗室生物安全概述

第11頁?所操作病原微生物濃度；?病原微生物宿主；?從動物研究和試驗室感染報告或臨床報告中得到信息；?擬進行試驗操作（如超聲處理、離心等）；?也許會擴大微生物宿主范圍或變化病原微生物對于已知有效治療方案敏感性所有基因技術；?本地是否能進行有效預防或治療。第一節

試驗室生物安全概述

第12頁三、病原微生物分類管理第一節

試驗室生物安全概述

第13頁第14頁四、試驗室生物安全主要意義第一節

試驗室生物安全概述

是建立病原微生物研究安全平臺需要是生物防護（國防）需要是出入境檢查檢疫需要是動物防疫需要是傳染病預防與控制需要是醫院感染控制需要GOARN監測網絡離不開生物安全試驗室第15頁第二節

生物安全試驗室與設備要求

一、試驗室生物安全防護水平分級

《試驗室生物安全通用要求》（GB19489-2023）根據生物安全試驗室所操作生物因子危害程度及采取防護措施，將生物安全試驗室生物安全防護水平分為4級。分級處理對象BSL-1對個體和群體低危害，不具有對健康成人、動物致病致病因子。BSL-2對個體中等危害，對群體危害較低，對人和動物有致病性，但對健康成人、動物和環境不會造成嚴重危害。具有有效預防和治療措施。BSL-3對個體高度危害，對群體危害程度較高。通過直接接觸或氣溶膠使人傳染上嚴重甚至是致命疾病致病因子，一般有預防和治療措施。BSL-4對個體和群體具有高度危害性，通過氣溶膠途徑傳輸或傳輸途徑不明，或未知、高度危險致病因子。沒有預防和治療措施。第16頁第二節

生物安全試驗室與設備要求

一、試驗室生物安全防護水平分級

危害等級生物安全水平試驗室類型試驗室操作安全設備Ⅰ級BSL-1（基礎試驗室）基礎教學、研究GMT不需要；開放試驗臺Ⅱ級BSL-2（基礎試驗室）初級衛生服務；診斷、研究GMT加防護服、生物危害標志開放試驗臺，另外需BSC用于防護也許生成氣溶膠Ⅲ級BSL-3（屏障試驗室）特殊診斷、研究在二級生物安全防護水平上增加特殊防護服、準入制度、定向氣流BSC和／或其他所有試驗室工作所需要基本設備Ⅳ級BSL-4（高度屏障試驗室）危險生物因子研究在三級生物安全防護水平上增加氣鎖入口、出口淋浴、污染物品特殊處理Ⅲ級BSC或Ⅱ級BSC加正壓服、雙開門高壓滅菌器（穿過墻體）、通過濾空氣與病原微生物危害等級相對應生物安全水平、試驗室類型、試驗室操作以及主要安全設備要求。第17頁第二節

生物安全試驗室與設備要求

1.清潔區：為未被病原微生物污染區域，包括辦公室、休息室、培養基配制室與試劑儲藏室等，此區域嚴禁帶入細菌檢查標本。

2.半污染區：為也許被病原微生物污染區域如緩沖間、工作服放置室、走廊等。

3.污染區（操作區）：為已被病原微生物污染區域，用于接收臨床標本，深入接種、分離培養、判定和藥敏試驗及成果報告等工作。

（一）臨床微生物試驗室布局二、臨床微生物試驗室布局與基本要求第18頁第二節

生物安全試驗室與設備要求

1．BSL-1和BSL-2試驗室設計安全標準

在設計試驗室時應考慮也許造成試驗室安全問題情況，主要包括：氣溶膠形成處理高濃度微生物節肢動物和嚙齒動物侵擾

儀器設備過多和過度擁擠無關人員未經允許進入試驗室某些特殊樣品和試劑使用工作流程（二）試驗室設計和建造特殊要求第19頁第二節

生物安全試驗室與設備要求

2．BSL-1設計和建造要求無需特殊選址每個試驗室應設洗手池，宜設置在接近出口處試驗室墻壁、天花板和地面應平整試驗臺面應防水，耐腐蝕、耐熱試驗室中櫥柜和試驗臺應牢靠試驗室如有可啟動窗戶，應設置紗窗在試驗室工作區外應有寄存外衣和私人物品設施試驗室門應設有門禁系統，能控制進入試驗室內應確保工作照明，避免無須要反光和強光應有合適消毒設備（二）試驗室設計和建造特殊要求第20頁第二節

生物安全試驗室與設備要求

3．BSL-2設計和建造要求

除了具有BSL-1試驗室設計和建造要求之外，尚有如下要求：應設置實行多種消毒辦法設施，如高壓滅菌器安全系統應當包括消防、應急供電、洗眼器以及應急噴淋裝置試驗室門宜帶鎖、可自動關閉。試驗室門應有可視窗試驗室出口應有發光批示標志不需特殊通風設備，可采取窗戶自然通風，同步安裝紗窗應有足夠儲存空間擺放物品以方便使用有可靠和充足電力供應和應急照明（二）試驗室設計和建造特殊要求第21頁第二節

生物安全試驗室與設備要求

一級生物安全水平試驗室示意圖二級生物安全水平試驗室示意圖第22頁BSL-1試驗室與BSL-2試驗室安全設備和個體防護要求區分：三、安全設備和個體防護第二節

生物安全試驗室與設備要求

BSL-1試驗室BSL-2試驗室安全設備對高壓滅菌、離心機安全罩沒有要求，必要時可配生物安全柜應配備Ⅱ級生物安全柜、高壓蒸汽滅菌器，根據試驗內容，確定是否需要安裝洗眼器個體防護工作服、手套防護服、手套、帽子、口罩、護目鏡第23頁第三節

生物安全試驗室操作技術規范

一、試驗室準入要求1.嚴禁非工作人員進入試驗室。參觀試驗室等特殊情況須經試驗室責任人同意后方可進入。2.試驗室門應保持關閉。3.BSL-2試驗室入口處應貼有國際通用生物危害警告標志，其下部應注明試驗室生物安全等級、試驗室名稱、責任人姓名和聯系電話等有關信息

4.進入動物房應當通過特殊同意，嚴禁將無關動物帶入試驗室。第24頁第三節

生物安全試驗室操作技術規范

二、試驗室操作要求1.所有試驗操作要按盡也許減少微小液滴和氣溶膠產生方式來進行。2.以移液器吸取液體，嚴禁舔標簽。3.應限制使用皮下注射針頭和注射器。4.盡也許應用一次性注射器，用過針頭嚴禁折彎、剪斷、折斷、重新蓋帽，嚴禁用手從注射器上取下針頭。用過針頭必須放入防穿透銳器盒中。非一次性利器必須放入銳器盒中并運輸到特定區域進行高壓滅菌。5.嚴禁用手處理破碎玻璃器具。裝有污染針、利器及破碎玻璃容器在丟棄之前必須高壓滅菌。第25頁第三節

生物安全試驗室操作技術規范

二、試驗室操作要求

6.試驗室必須制定并嚴格執行處理溢出物標準操作規程。7.在處理完感染性試驗材料和動物以及其他有害物質后，脫掉手套后及離開試驗室前，都必須洗手。8.嚴禁在試驗室工作區進食、飲水、吸煙、處理隱形眼鏡、化裝及儲存食物。9.每天工作結束后應消毒工作臺面，具有潛在危害性材料濺出后要隨時消毒。第26頁第三節

生物安全試驗室操作技術規范

二、試驗室操作要求10.所有培養物、廢棄物在運出試驗室之前必須進行高壓滅菌。需運出試驗室滅菌物品必須放在專用密閉防漏容器內儲存、運輸。11.試驗室文獻紙張只有確保未受到污染才可帶出。12.將生物安全程序納入標準操作規范或生物安全手冊，由試驗室責任人專門保管，工作人員在進入試驗室之前要閱讀規范并按照規范要求操作。13.工作人員要接收有關潛在危險知識培訓，掌握預防暴露以及暴露后處理程序。每年要接收一次最新培訓。第27頁第三節

生物安全試驗室操作技術規范

三、感染性物質操作與處理

（一）感染性物質操作

1.標本采集：必須有掌握有關職業知識和操作技能工作人員進行采集，并根據采集標本中也許具有病原微生物危害程度而采取對應個人防護。2.標本運輸：采集標本應采取避免污染工作人員、患者及環境方式在醫療機構內運輸。第28頁第三節

生物安全試驗室操作技術規范

（一）感染性物質操作3.標本接收和打開：需要接收大量標本試驗室應當設專門房間或空間。標本內層容器應在生物安全柜內打開，并備好消毒劑。

第29頁第三節

生物安全試驗室操作技術規范

（一）感染性物質操作

4.血清分離：操作時應戴手套并注意眼睛和黏膜防護。

5.感染性物質凍干管啟動和儲存：凍干管啟動應在生物安全柜中進行。首先清潔外表面，在管上接近棉花或纖維塞中部銼一痕跡，用一團酒精浸泡棉花將管包起來以保護雙手，然后從銼痕處打開。將頂部小心移去并按污染材料處理。遲緩向管中加入液體重懸凍干物，避免出現泡沫。第30頁第三節

生物安全試驗室操作技術規范

（二）暴露處理

1．銳器傷及其他損傷：受傷人員應立即停頓工作，脫防護服；清洗雙手和受傷部位，如有傷口，應當在傷口旁端輕輕擠壓，盡也許擠出損傷處血液，再用洗手液和流動水沖洗，嚴禁進行傷口局部擠壓；受傷部位傷口沖洗后，使用皮膚消毒劑，如75%乙醇或者0.5%碘伏進行消毒，必要時進行醫學處理；應統計受傷原因及有關微生物，并保存完整醫療統計。第31頁第三節

生物安全試驗室操作技術規范

（二）暴露處理

2．潛在感染性物質食入

：應立即脫防護服并進行醫學處理，要報告食入材料特性和暴露細節，并保存完整醫療統計。3．潛在危險性氣溶膠釋放：所有人員必須立即撤離現場，并及時通知試驗室責任人和生物安全責任人，暴露者接收醫學咨詢。應張貼“嚴禁進入”標志，待氣溶膠排出、粒子沉降（約1小時）后方可入內。清除污染時應穿戴合適防護裝備。第32頁第三節

生物安全試驗室操作技術規范

（二）暴露處理

4.潛在感染性物質溢出：處理溢出人員必須穿防護服，戴手套，必要時需對面部和眼睛進行保護。首先用布或紙巾覆蓋，由外圍向中心傾倒消毒劑，作用一定期間（約30分鐘）后，將布、紙巾以及破損物品清理掉，玻璃碎片應用鑷子或硬厚紙板等工具清理并置于銳器盒中，切勿直接用手，以免刺破皮膚。再用消毒劑擦拭污染區域。用于清理布、紙巾、抹布及厚紙板應放在盛放污染性廢棄物容器內，污染文獻（包括統計）復制后，將原件丟入放污染物廢棄物容器。第33頁第三節

生物安全試驗室操作技術規范

（二）暴露處理5．離心管破碎：

假如正在運行時非封閉離心桶離心機內盛有潛在感染性物質離心管發生破裂，應關閉機器電源，停頓后密閉離心桶約30分鐘，待氣溶膠沉降后開蓋。