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文檔簡介

41I本文件按照GB/T1.1—2020《標準化本文件起草單位：河南省農業科學院畜牧研究所、河南聯科物聯網科技站、河南省獸藥飼料監察所、河南省動物衛生監督所、河南省動物疫病預防控制病預防控制中心、南陽市動物衛生監督所、西峽縣動物衛生監督所、鄧州市動物動物疫病預防控制中心、南陽宛城區動物衛生監督所、淅川縣農業農村局、濮陽縣動物衛生監督所、新野縣動物疫病預防控制中心、南陽市臥龍區臥龍崗街道辦本文件主要起草人：李海利、賈松濤、王春筍、李清永欽、吳亞權、朱進華、王金好、王澤仁、馮東亞、管素2下列文件中的內容通過文中的規范性引用而構成本文件必不件，僅該日期對應的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包NY/T2664—2014標準化養殖場NY/T5038—2006無公害食品家禽養殖生產管從雞蛋清或蛋殼膜中提取、精制獲得的畜牧業用溶菌酶。由129個氨基酸新鮮或冰凍蛋清250g，用試紙測pH應為8左右，解凍過篩，除去蛋清中的臍帶、蛋殼碎片及保持在0℃~5℃,攪拌吸附5h，0℃~5℃靜置過夜。3把上層清液漸漸傾出，下層樹脂用清水洗去吸附的蛋白質，反復洗4次，注將樹脂抽濾除去水分。另取0.15mol/L（pH6.5）磷酸緩沖液1min，每次攪拌后減壓抽濾去水分，再用10%硫酸銨200mL分4次洗脫溶菌酶，每次攪拌半小時，過濾抽干，合并洗脫液，按總體積加入32%(質量體積比)固體硫酸銨使含量達到44.1.4透析將粗制品加蒸餾水50mL溶解,裝入透析袋,0℃~5℃透析24h～36h,除去大部分硫酸銨得透析液。取蛋殼膜用循環水沖洗后粉碎，加1.5倍量0.5%氯化鈉溶液，用2m40℃攪拌提取45min，過濾，濾渣再提取2次，合并前2次濾液，4.2.3精制于沸水浴中迅速升溫至80℃,隨即攪拌冷卻，再用乙酸調pH至4.6，使卵蛋白在等電點沉淀，離傾去上層渾濁液。收取黏附于容器的溶菌酶-聚丙烯酸凝聚物，懸于水中，加碳酸鈉溶解凝聚物。再加入聚丙烯酸用量1/25的50%氯化鈣溶液使溶菌酶解離，用分離上清液(沉淀用硫酸處理除去硫酸鈣，回收聚丙烯酸氫氧化鈣，取清液加入氯化鈣到5%，靜置結晶，粗結晶溶于pH4.6乙酸溶液中，分去不溶物進行再結4精密稱取本樣品4mg，加磷酸緩沖液取磷酸二氫鈉11

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