2014年終工作總結(jié)之江生物HPV檢測產(chǎn)品

2023/7/22HPVHarmoniaHPVVenus2023/7/22宮頸癌篩查的意義與HPV感染的關系HPV檢測及意義宮頸癌篩查方法目錄1競品分析及計劃LSILHSIL宮頸癌的病因1ICOInformationCentreonHPVandCancer：HumanPapillomavirusandRelatedDiseasesReport(China)，VersionpostedoninDecember18th,20142

Dunneetal.JAMA.

2007;297(8):813-819HaraldzurHausen2008年諾貝爾醫(yī)學和生理學獎宮頸癌患者伴有HPV感染1

一過性感染通過自身免疫在兩年內(nèi)清除290%99.9%HPV感染宮頸癌發(fā)生必要非充分99%高危型HPV感染+10高危型HPV持續(xù)性感染人乳頭瘤病毒HPV屬于乳多空病毒科（papovaviridae）乳頭瘤病毒屬。HPV呈球形，無包膜，雙鏈DNA病毒。核殼呈對稱20面體，由72個殼粒組成，殼粒由L1、L2兩種衣殼蛋白組成[2]。HPV基因組長8000bp，編碼8個主要開放閱讀框，分為3個功能區(qū)，即早期轉(zhuǎn)錄區(qū)（E區(qū)），晚期轉(zhuǎn)錄區(qū)（L區(qū)）與長控制區(qū)（LCR）。E區(qū)編碼E1、E2、E4、E5、E6、E7等早期蛋白，參與病毒的復制、轉(zhuǎn)錄、翻譯調(diào)控和轉(zhuǎn)化等功能；L區(qū)編碼主要衣殼蛋白L1和次要衣殼蛋白L2。L1約占衣殼蛋白的80%，高度保守，L2含量較少，變異較多。LCR含有HPV基因組DNA的復制起點和HPV表達所需要的調(diào)控元件，調(diào)控病毒的轉(zhuǎn)錄與復制[3]。病毒結(jié)構(gòu)

目前已有HPV基因型別100余種，進33%的基因型與生殖道損傷有關。感染生殖道的HPV可分為兩種：低危型（LR）和高危型（HR）。其中，HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68是常見的HPV高危型感染，與宮頸癌由密切聯(lián)系；而HPV6、HPV11則為HPV低危型。HPV16、HPV18在HPV高危中最為常見，研究表明全世界有70%的宮頸癌與HPV16、18感染有關。HPV6、11與大多數(shù)的生殖器瘤樣病變有關。

持續(xù)HPV高危感染可進展為宮頸癌。在一些研究中表明，不同的高危HPV基因型有不同的致癌風險。所以，HPV基因分型對臨床有重要意義。Blavstein‘spathologyoftheFemalegenitaltract.

5thed.

NewYork,Springer-Berlag,2002

Cancer64:2184,1989AnnInternMed113:214,1990

BMJ293:659,1986

Lancet2:779,1984ObstetGynecol74:838,1989

BMJ290:1543,1985

JClinEpidemiol41:21,1988篩查降低宮頸癌發(fā)病率6中國每年約有15萬宮頸癌新發(fā)病例，每年約有10萬人死于宮頸癌，平均每6分鐘就有一名婦女死于宮頸癌。宮頸癌早期治療的5年生存率為100%，晚期治療5年生存率僅為20~50%。早診斷、早治療是防治宮頸癌的關鍵宮頸癌診斷方法細胞學組織學免疫學核酸檢測巴氏涂片（PapSmear）液基細胞學技術（TCT）特點：最常用的初步篩方法，操作簡單，成本低；易受取材、染色、生理狀況及細胞病理醫(yī)生的主觀判斷等因素的影響肉眼觀測：涂抹醋酸（VIA），碘試驗陰道鏡檢查組織活檢特點：人員素質(zhì)要求高，病人痛苦程度大HPV抗原檢測HPV抗體檢測特點：免疫原性較弱，靈敏度低雜交捕獲（HC2）：不分型PCR雜交：不分型實時熒光PCR：分型特點：敏感度和陰性預測值高，162015年，ASCCP和SGO：采用HPV檢測開展宮頸癌一線篩查。HPV檢測可作為宮頸癌篩查的首選方法20-24歲開始明顯增多40-44歲達到峰值市場潛力32014年衛(wèi)生和計劃生育委員會開展了針對54.6萬農(nóng)村婦女的HPV篩查試點項目國內(nèi)育齡婦女有1.6億，篩查年齡是20-60歲，每3~5年市場可觀。適齡（中國推薦30歲以上，美國推薦25歲以上）普通女性。篩查間隔為3年。隨著HPV疫苗上市（2016年），會拉動HPV檢測市場。HPV的市場容量預估5個億高危型人乳頭瘤病毒（HPV）分型核酸測定試劑盒

之江生物HPVVenusHPV檢測試劑中的高端產(chǎn)品、品牌產(chǎn)品序號篩查點合作單位1順義區(qū)婦幼保健院北京人民大學醫(yī)院2滿洲里市第二醫(yī)院首都醫(yī)科大學北京朝陽醫(yī)院3瓦房店市婦幼保健院大連醫(yī)科大學4撫順市第二人民醫(yī)院中國醫(yī)科大學盛京醫(yī)院5雙流縣婦幼保健院四川大學6萬州區(qū)婦幼保健院重慶腫瘤醫(yī)院7鹽亭縣婦幼保健院四川省腫瘤醫(yī)院

與羅氏診斷共同參與由郎景和院士、喬友林教授主持的《適合中國農(nóng)村地區(qū)的宮頸癌篩查基礎與示范研究》重大專項。

參與國家重大專項病因篩查診斷治療有效濃縮高風險人群，避免過度診斷和治療，為區(qū)分HPV持續(xù)感染提供依據(jù)提供治療和療效的判斷依據(jù)5判定高危型HPV的持續(xù)感染HPV檢測具有更高的敏感度和陰性預測值產(chǎn)品功能HPVVenus高危型HPV分型檢測實時熒光PCR技術

實時熒光PCR技術是利用熒光信號的變化實時檢測PCR擴增反應中每一個循環(huán)擴增產(chǎn)物量的變化，通過Ct值和標準曲線的關系對起始模板進行定量分析。6HPV分型檢測原理通過多對特異性引物僅對樣本中15種致癌危害最大的HPV型別的特異性DNA核酸片段進行擴增，分別用不同標記的特異性熒光探針進行檢測7HPVVenus高危型HPV分型檢測HPVVenus可避免因區(qū)域片段基因丟失造成的假陰性

因L1區(qū)域發(fā)生缺失變異，以L1段為靶區(qū)域的PCR方法漏檢率占CIN3和宮頸癌病例的6.3%，且包括HPV16、HPV18感染病例HPVVenus檢測位點位于E基因區(qū)段，有效避免漏檢HPV相對定量檢測宮頸上皮細胞無法進行等量采樣，樣本中細胞數(shù)含量將影響評估結(jié)果單拷貝MNBH作為校正，結(jié)果更具臨床價值細胞量核酸載量MNBHQ1Q2MNBH為人單拷貝基因，其含量可作為校正宮頸上皮細胞的參照對樣本中宮頸上皮細胞數(shù)量進行監(jiān)控，避免假陰性結(jié)果在相同的細胞數(shù)上比較HPV載量，更具臨床價值11當測定的核酸載量相同而細胞量不同時，患者的HPV感染程度是顯著不同的HPVVenus高危型HPV分型檢測之江生物HPVVenus對15種高危型HPV分型、單型別相對定量檢測的熒光定量PCR檢測試劑，適用于宮頸癌篩查、高危型持續(xù)性感染判定，“分層管理”，療效評價及HPV疫苗使用指導和評價。產(chǎn)品賣點項目F（技術）F（功能）必須掌握！A（優(yōu)勢）必須掌握！B（價值）必須掌握！檢測方法基于熒光PCR技術平臺實現(xiàn)高危HPV分型檢測平臺項目可拓展性好臨床主任：可實現(xiàn)一個樣本多項檢測檢驗科主任：可作為其他核酸檢測項目的共用平臺操作人員：多個項可同時檢測，效率高分型熒光探針技術可進行15種高危型HPV分型檢測精確分型，型別更全，包含66、82型臨床主任：覆蓋宮頸癌99%以上的型別，明確判定持續(xù)性感染、多重感染檢驗科主任：可滿足臨床需求

檢測時間基于熒光PCR技術1.5～2小時完成檢驗周期短每天至少可做4輪臨床主任：當天檢測當天出報告檢驗科主任：省時，每天檢測樣本量大，樣本提量后亦適用操作人員：省時操作便易度采用PCR檢測預混液配液步驟簡單操作簡便檢驗科主任：減少繁瑣操作導致的失誤操作人員：省力檢測過程使用熒光PCR儀擴增、檢測自動完成手工時間0.5小時檢驗科主任：解放人力操作人員：省時，便于時間統(tǒng)籌安全性采用實時熒光PCR技術實現(xiàn)全程閉管反應安全性高操作人員：對操作者無害檢測儀器僅需熒光PCR儀適用于開放性檢測平臺適配性強檢驗科主任：減少設備投資定量通過MNBH內(nèi)標基因校準實現(xiàn)定量檢測針對單個HPV型別的相對定量臨床主任：追蹤病毒載量的動態(tài)變化，反映治療效果（利于醫(yī)患溝通）檢測方式基于熒光PCR技術實現(xiàn)全程閉管檢測有效防污染檢驗科主任：保證實驗結(jié)果的準確穩(wěn)定檢測樣本數(shù)量基于分管檢測設置隨機配置構(gòu)建PCR檢測體系單次檢測樣本數(shù)靈活檢驗科主任：隨到隨檢，不浪費（必須收集大量樣本，不然耗材損失太大）結(jié)果分析基于特定的分析軟件檢測結(jié)果數(shù)字化、實時判斷結(jié)果判斷非常直觀（無需人工閱讀或需專用閱讀儀及軟件）檢驗科主任：實驗數(shù)據(jù)可追溯性強操作人員：結(jié)果判斷簡捷

連接LIS可配合全自動核酸檢測系統(tǒng)雙向連接LIS易用性強檢驗科主任：真正實現(xiàn)檢測報告流程的無紙化、標準化臨床主任：更及時獲得檢測結(jié)果操作人員：手工操作時間更短臨床溝通篇臨床適用指征：宮頸癌篩查（若陰性，提示3年內(nèi)無致癌可能）不正常陰道出血、性交后出血宮頸糜爛，尤其是重度糜爛TCT細胞學檢查提示有ASCUS及以上病變的HPV陽性，治療隨訪宮頸病變行診斷性錐切、治療性手術術后隨訪宮頸癌術后隨訪高危型HPV核酸分型檢測高危型HPV核酸分型檢測的意義1、

HPV的分型檢測為HPV持續(xù)感染、多重感染的判斷依據(jù)。

案例：如第一次檢測16型；第二次檢測為18型；說明不是持續(xù)感染，病人有足夠免疫力清除病毒。

病毒感染可以呈現(xiàn)出同一亞型持續(xù)、不同亞型新感染、不同亞型反復感染、多個亞型同時感染。同一高危亞型持續(xù)感染或多個亞型同時感染的風險顯著增加，只有通過分型才能濃縮高風險人群。

高危型HPV核酸分型檢測的意義2、不同亞型致癌能力不同，HPV16,18,33,58等致病力較強，易導致宮頸高度病變及宮頸癌的發(fā)生。國內(nèi)高度病變型別中58、52、33均高于18，存在國內(nèi)外差異，細胞與病毒的親和力是有不同的。（北京朝陽醫(yī)院數(shù)據(jù)）高危型HPV核酸分型檢測的意義3、通過分型檢測，對患者進行個體化評估，預測宮頸病變發(fā)生的風險度，實現(xiàn)《分級管理》，從而決定篩查的間隔、臨床處理及治療方案的選擇與制定等。高危型HPV核酸分型檢測的意義4、HPV基因分型檢測及定量結(jié)果對宮頸病變病人手術前后隨訪提供依據(jù)；如術后HPV仍呈陽性，有兩種情況1）若治療后HPV仍為同一亞型陽性，復發(fā)的可能性大；2）如果是其它亞型陽性，則為重復感染，手術病灶切除干凈。高危型HPV核酸分型檢測的意義5、指導疫苗的使用和評價國內(nèi)外HPV感染的亞型有差異，國內(nèi)HPV感染亞型以16，52，58，18和33為主，而國外則以16，18，45，31等亞型為主。目前國外研制的疫苗以預防16，18感染為主，并不完全符合國內(nèi)情況。因此，進行HPV分型檢測可了解中國不同地區(qū)的HPV感染亞型分布，研發(fā)出適合中國國情的HPV疫苗。高危型HPV核酸定量檢測宮頸上皮細胞無法實現(xiàn)等量采樣不等量的宮頸上皮細胞采集，導致無法準確評估患者的感染程度在進行有效的HPV病毒載量評估前應調(diào)整標本中的細胞數(shù)內(nèi)參校正基因，校正宮頸細胞數(shù)到相同水平進行病毒載量比較細胞量核酸載量內(nèi)參校正基因樣本1樣本2高危型HPV核酸定量檢測熒光PCR法高危分型HPV核酸檢測可對患者體內(nèi)HPV含量進行相對定量，更真實反映感染狀態(tài)。如何判斷HPV感染水平？

源結(jié)果校正后標本116型2030內(nèi)參1828

源結(jié)果校正后標本216型2019內(nèi)參2928高危型HPV核酸定量檢測的臨床意義1、監(jiān)控假陰性，對樣本采集質(zhì)量作出判斷2、混合感染，通過定量可以判斷優(yōu)勢型別3、相對定量結(jié)果可以反應HPV病毒載量動態(tài)變化，明確病毒是在清除還是大量復制過程，從而為篩查的間隔提供依據(jù)，準確監(jiān)測病毒感染的進展，為隨訪提供參考依據(jù)4、治療：通過定量提供治療療效判斷依據(jù)，更直觀的表現(xiàn)出治療效果，為患者后續(xù)隨訪提供依據(jù)，更利于醫(yī)患的溝通。XXX醫(yī)院檢驗報告單檢驗項目：高危型人乳頭瘤狀病毒（HPV）基因分型檢測檢驗方法：熒光PCR法姓名：性別：科室：樣本類型：出生年月：門診號：送檢醫(yī)師：樣本質(zhì)量：標識號：床號：送檢時間：樣本標識：編號項目結(jié)果Ct值正常參考值1HPV16型陰性（－）---陰性2HPV18型陽性（＋＋）25陰性3HPV31型陰性（－）---陰性4HPV33型陰性（－）---陰性5HPV35型陰性（－）---陰性6HPV39型陰性（－）---陰性7HPV45型陰性（－）---陰性8HPV51型陰性（－）---陰性9HPV52型陰性（－）---陰性10HPV56型陰性（－）---陰性11HPV58型陰性（－）---陰性12HPV59型陰性（－）---陰性13HPV68型陽性（＋）32陰性14HPV66型陰性（－）---陰性15HPV82型陰性（－）---陰性結(jié)果判斷HPV18型陽性(Ct:25)HPV68型陽性(Ct:32)檢驗時間：檢驗者：審核者：說明：1、高危型HPV基因分型檢測可以反映宮頸病變進展，關鍵是做到早期篩查。2、Ct值表示受檢者感染HPV真實的病毒載量，Ct值越小表示病毒感染程度越高。Ct值>30（+）輕度感染；30≥Ct值＞20（++）中度感染；Ct值≤20（+++）重度感染。3、不同HPV亞型的致病能力不同，各型別的Ct值大小不具有可比性。4、若檢出一種或多種高危HPV亞型陽性，應按醫(yī)生指導定期復查或做進一步檢出。5、此結(jié)果僅對標本負責，結(jié)果供臨床醫(yī)師參考。6、本報告單應妥善保管，以便跟蹤兩次檢驗期間的感染程度變化。HPVVenus賣點功能即賣點！15種高危型別，可覆蓋99%以上的宮頸癌

可分型、可單個型別相對定量，為臨床提供診療依據(jù)

當天出報告檢驗科/病理科溝通篇高危型HPV檢測主流方法4雜交捕獲（HC2）PCR-核酸交法實時熒光PCRRealTimePCR高危型HPV檢測方法分類比較PCR-膜雜交法PCR-流式微球技術RealTimePCRHC2是否擴增信號檢測方式擴增非擴增非實時實時檢測靈敏度防污染能力104copies10

copies閉管反應，有效避免交叉污染PCR擴增與雜交顯色兩步完成13檢測方法分類比較（產(chǎn)品優(yōu)勢）8攻擊力項目F（技術）F（功能）A（優(yōu)勢）B（價值）強1分型熒光探針技術可進行15種高危型HPV分型檢測精確分型，型別更全，包含66、82型（不分型）臨床主任：覆蓋宮頸癌99%以上的型別，明確判定持續(xù)性感染、多重感染檢驗科主任：可滿足臨床需求

2檢測時間基于熒光PCR技術1.5～2小時完成檢驗周期短（較HC2少2.5小時）每天至少可做4輪臨床主任：當天檢測當天出報告檢驗科主任：省時，每天檢測樣本量大，樣本提量后亦適用操作人員：省時3操作便易度采用PCR檢測預混液配液步驟簡單操作簡便檢驗科主任：減少繁瑣操作導致的失誤操作人員：省力4定量通過MNBH內(nèi)標基因校準實現(xiàn)定量檢測針對單個HPV型別的相對定量臨床主任：追蹤病毒載量的動態(tài)變化，反映治療效果（利于醫(yī)患溝通）5檢測樣本數(shù)量基于分管檢測設置隨機配置構(gòu)建PCR檢測體系單次檢測樣本數(shù)靈活檢驗科主任：隨到隨檢，不浪費（必須收集大量樣本，不然耗材損失太大）6連接LIS可配合全自動核酸檢測系統(tǒng)雙向連接LIS易用性強檢驗科主任：真正實現(xiàn)檢測報告流程的無紙化、標準化臨床主任：更及時獲得檢測結(jié)果操作人員：手工操作時間更短弱檢測方法基于熒光PCR技術平臺實現(xiàn)高危HPV分型檢測平臺項目可拓展性好（專用平臺）臨床主任：可實現(xiàn)一個樣本多項檢測檢驗科主任：可作為其他核酸檢測項目的共用平臺操作人員：多個項可同時檢測，效率高檢測過程使用熒光PCR儀擴增、檢測自動完成手工時間0.5小時（無需步步加液）檢驗科主任：解放人力操作人員：省時，便于時間統(tǒng)籌安全性采用實時熒光PCR技術實現(xiàn)全程閉管反應安全性高（無需接觸有毒試劑）操作人員：對操作者無害檢測儀器僅需熒光PCR儀適用于開放性檢測平臺適配性強（無需專用設備）檢驗科主任：減少設備投資檢測方式基于熒光PCR技術實現(xiàn)全程閉管檢測有效防污染檢驗科主任：保證實驗結(jié)果的準確穩(wěn)定結(jié)果分析基于特定的分析軟件檢測結(jié)果數(shù)字化、實時判斷結(jié)果判斷非常直觀（無需人工閱讀或需專用閱讀儀及軟件）檢驗科主任：實驗數(shù)據(jù)可追溯性強操作人員：結(jié)果判斷簡捷

實時熒光PCR法與PCR-膜雜交法的比較實時熒光PCR法PCR-膜雜交法之江HPV試劑凱普、亞能HPV試劑對客戶的價值1防污染基于熒光PCR技術平臺實現(xiàn)全程閉管反應有效防止污染（雜交為開放式反應，易產(chǎn)生交叉污染）檢驗科主任：結(jié)果準確，保證實驗室穩(wěn)定運轉(zhuǎn)操作人員：降低污染帶來的工作量2定量通過MNBH基因校正技術實現(xiàn)定量檢測單個HPV型別的相對定量臨床主任：追蹤病毒動態(tài)變化，提供治療療效依據(jù)；利于醫(yī)患溝通3檢測時間基于熒光PCR技術1.5～2小時完成檢驗周期短（較膜雜交少3～4小時）臨床主任：當天檢測當天出報告檢驗科主任：省時，每天檢測樣本量大，樣本提量后亦適用操作人員：省時4連接LIS可配合Autrax雙向連接LIS系統(tǒng)易用性強臨床主任：便于電子系統(tǒng)閱讀和追溯報告檢驗科主任：保證信息鏈的完整性操作人員：減少信息轉(zhuǎn)移的工作量5安全性采用實時熒光PCR技術實現(xiàn)全程閉管反應安全性高（擴增后開蓋，及雜交過程會接觸有危險物質(zhì)如：NBT/BCPI有毒溶液等）操作人員：對操作者安全無害5結(jié)果分析（代理商）基于PCR軟件、CT值檢測結(jié)果數(shù)字化、可預覽可預覽，自動分析，客觀性強（無需人工閱讀或需專用閱讀儀及軟件）檢驗科主任：規(guī)避風險操作人員：方便判讀，實驗結(jié)束前可預覽實時熒光曲線，提前預判

5檢測過程（代理商）基于熒光PCR技術平臺PCR反應結(jié)束即自動生成結(jié)果方便（PCR擴增+雜交技術，PCR后產(chǎn)物需要開蓋雜交，不能設備直接出結(jié)果）檢驗科主任：檢測效率更高操作人員：工作量小檢測方法（代理商）基于熒光PCR技術平臺實現(xiàn)高危HPV分型檢測平臺可拓展性好（專用只能開展HPV項目）臨床主任：可實現(xiàn)一個樣本多項檢測檢驗科主任：可作為其他核酸檢測項目的共用平臺操作人員：多個項可同時檢測，效率高檢測方法分類比較9之江HPV試劑羅氏COBAS4800HPV對客戶的價值檢測方法熒光PCR法熒光PCR法相同方法學檢測時間1.5-2小時（14：30之前）5小時（11之前送樣）出報告快，當天檢測當天出報告，標本檢測日通量高檢測儀器熒光PCR儀器平臺即可專用設備（價格在180萬）開放性熒光PCR設備，其他檢測項共用，提高設備利用率，無需增加專用設備，樣本檢測靈活檢測項目熒光PCR試劑項目均可在此平臺上開展專用試劑，只能做HPV項目1個樣本，多項檢測，提高檢測效能檢測HPV型別高危15型，精確分型14（只分型16、18，其余不分型）可監(jiān)測12種型別的持續(xù)性感染，可評估療效相對定量可以對15各型分別進行相對定量僅僅可以對16、18；無法對不分型型別相對定量持續(xù)性感染判定、風險評估、療效評估，可對復雜的HPV感染病例精準分析；靈敏度高靈敏高靈敏陰性預測值高檢測方式閉管檢測，有效防止污染閉管檢測，有效防止污染有效防控污染，保證實驗室平穩(wěn)運轉(zhuǎn)生物安全閉管反應，安全性高閉管反應，安全性高安全性好檢測方法分類比較10歐盟CE認證CFDA認證變更說明：新增66型：WHO認定為致癌證據(jù)2B級的HPV型別，已有美國FDA注冊產(chǎn)品的臨床數(shù)據(jù)支持。新增82型：WHO認定為致癌證據(jù)2B級的