維生素類藥物的分析詳解演示文稿1本文檔共79頁；當前第1頁；編輯于星期二\5點43分（優選）維生素類藥物的分析2本文檔共79頁；當前第2頁；編輯于星期二\5點43分維生素：是維持人體正常代謝機能所必需的微量營養物質。脂溶性：VitA、D2、D3、E、K1等水溶性：VitB族(B1、B2、B6、B12)、VitC、葉酸、煙酸、煙酰胺3本文檔共79頁；當前第3頁；編輯于星期二\5點43分維生素的共同特點：這些化合物或其前體化合物都在天然食物中存在；它們不能供給機體熱能。也不是構成組織的基本原料，主要功用是通過作為輔酶的成份調節代謝過程，需要量極小；它們一般在體內不能合成，或合成量不能滿足生理需要，必須經常從食物中攝取；長期缺乏任何一種維生素都會導致相應的疾病。4本文檔共79頁；當前第4頁；編輯于星期二\5點43分維生素缺乏導致的病癥維生素A缺乏——夜盲癥、干眼病（動物內臟、富含胡蘿卜素的蔬菜水果）維生素B1缺乏——腳氣病（谷類、豆類、堅果類、瘦豬肉及動物內臟）維生素C缺乏——壞血病（新鮮蔬菜和水果）維生素D缺乏——小兒佝僂病與成人骨軟化病(足夠的日光、海魚、動物內臟、蛋黃)維生素E缺乏——一般不缺乏（體內駐留時間長）。（植物油）5本文檔共79頁；當前第5頁；編輯于星期二\5點43分R:-H維生素A醇-COCH3維生素A醋酸酯-COC15H31維生素A棕櫚酸酯第一節維生素A一、結構與性質環己烯共軛多烯醇6本文檔共79頁；當前第6頁；編輯于星期二\5點43分結構特點：（1）環己烯+共軛多烯側鏈；（2）天然VA側鏈為全反式；（3）天然來源主要是魚肝油，為醋酸酯，棕櫚酸酯等,目前多由人工合成。7本文檔共79頁；當前第7頁；編輯于星期二\5點43分性質：1、紫外吸收＊具有共軛多烯側鏈－－紫外吸收。＊最大吸收波長在325～328nm，隨VA存在狀態以及所用的溶劑，最大吸收波長的位置有所不同。＊有干擾物質存在（VitA2、VitA3、鯨醇）。8本文檔共79頁；當前第8頁；編輯于星期二\5點43分VitA2VitA3鯨醇脫水去氫二聚體9本文檔共79頁；當前第9頁；編輯于星期二\5點43分2、不穩定性：共軛多烯側鏈易被氧化，△或有金屬離子存在時氧化↑環氧化物VitA醛VitA酸10本文檔共79頁；當前第10頁；編輯于星期二\5點43分CHCl33.與三氯化銻發生呈色反應（鑒別、含量測定）4.溶解性：不溶于水，易溶于有機溶劑和植物油等。11本文檔共79頁；當前第11頁；編輯于星期二\5點43分條件：無水、無醇CHCl3二、鑒別試驗1.三氯化銻反應藍色紫紅12本文檔共79頁；當前第12頁；編輯于星期二\5點43分注意事項：無水－－水可使三氯化銻水解成氯化氧銻（SbOCl）白色沉淀，干擾比色。無醇－－乙醇可以和碳正離子作用使其正電荷消失。13本文檔共79頁；當前第13頁；編輯于星期二\5點43分λmax326nm一個吸收峰λmax350～390nm三個吸收峰2、UV法（BP2000）去水VitA（VitA3）↓VitA14本文檔共79頁；當前第14頁；編輯于星期二\5點43分15本文檔共79頁；當前第15頁；編輯于星期二\5點43分3、TLC法

BP雜質對照品法顯色劑：三氯化銻USP顯色劑：磷鉬酸規定斑點顏色和Rf值16本文檔共79頁；當前第16頁；編輯于星期二\5點43分三、含量測定UV法:三點校正法（ChP2010第一法）三氯化銻比色法HPLC法（ChP2010第二法）17本文檔共79頁；當前第17頁；編輯于星期二\5點43分1、為何要采用三點校正法？維生素A原料藥中常混有雜質，如維生素A2、維生素A3等，這些雜質在維生素A的最大吸收波長附近有吸收，采用三點校正法可以消除這些雜質的干擾。2、測定原理1）在310～340nm范圍內，雜質吸收呈一直線，且隨波長的增大吸收度下降。2）物質對光吸收呈加和性。三點校正法18本文檔共79頁；當前第18頁；編輯于星期二\5點43分3、波長的選擇：一點選在維生素A的最大吸收波長處（λ1），其它兩點選在λ1的兩側。第一法（等波長差法）波長為λ1=328nm、λ2=316nm、λ3=340nm；測定對象：VA醋酸酯第二法（等吸收比法）波長為λ1=325nm、λ2=310nm、λ3=334nm；測定對象：VA醇19本文檔共79頁；當前第19頁；編輯于星期二\5點43分4、測定方法首先判斷用哪個吸收度(A328orA328(校正)）進行含量計算。第一法：供試液濃度為9～15IU/ml，溶劑為環己烷，在300、316、328、340、360nm五個波長處測定吸收度。1）最大吸收波長在326～329nm之間，計算吸收度比值Ai/A328，并與規定值相減，差值不超過±0.02，則用A328計算含量。20本文檔共79頁；當前第20頁；編輯于星期二\5點43分2）如果最大吸收波長在326～329nm之間，5個波長下的差值有一個或幾個超過±0.02，這時先計算A328（校正）：A328（校正）=3.52（2A328-A316-A340）A328（校正）-A328------------------×100%A328

再計算21本文檔共79頁；當前第21頁；編輯于星期二\5點43分若所得的數值在±3%，則仍用A328計算含量；若所得的數值在-15%～-3%之間，則用A328（校正）計算含量；若所得的數值小于-15%或大于+3%，或最大吸收波長不在326～329nm之間，則應采用第二法測定。22本文檔共79頁；當前第22頁；編輯于星期二\5點43分三點校正法第一法步驟小結：Ⅰ：最大吸收波長是否在326-329nm間符合--Ⅱ，不符合—第二法Ⅱ：測定指定波長吸收度Ⅲ：計算（A指定波長/A328）比值,并與規定值比較符合--Ⅴ，不符合—ⅣⅣ：計算校正吸收度，并與實測值比較，判斷是否需要校正Ⅴ：計算328nm處樣品的E1cm1%

Ⅵ：計算效價及標示量的百分含量維生素A醋酸酯的換算：IU/g=E1cm1%×1900

IU/丸標示量%=×100%標示量23本文檔共79頁；當前第23頁；編輯于星期二\5點43分第二法（皂化法，適用于維生素A醇）第一法無法消除雜質干擾時用此法24本文檔共79頁；當前第24頁；編輯于星期二\5點43分25本文檔共79頁；當前第25頁；編輯于星期二\5點43分26本文檔共79頁；當前第26頁；編輯于星期二\5點43分27本文檔共79頁；當前第27頁；編輯于星期二\5點43分5、討論1）維生素A醋酸酯的吸收度校正公式是用直線方程式法推導而來：維生素A醇的吸收度校正公式是用相似三角形法推導而來。2）在應用三點校正法時，除其中一點在最大吸收波長處測定外，其余兩點均在最大吸收峰的兩側進行測定。如果儀器波長精度不準確時，會產生較大誤差。因此，在測定前務必要校正波長，并可用全反式維生素A進行測定，比較測定結果和比值是否與對照品相符合，以進一步核對儀器波長是否準確。測定的樣品應不得少于兩份。3）中國藥典（2010年版）收載的維生素A軟膠囊采用三點校正法測定。28本文檔共79頁；當前第28頁；編輯于星期二\5點43分

VitAD膠丸中VitA的含量測定

精密稱取本品(規格10000VitAIU/丸)裝量差異項下（平均裝量0.08262g/丸）的內容物0.2399g至250ml量瓶中，用環己烷稀釋至刻度，搖勻；精密量取2.0ml，置另一20ml量瓶中，用環己烷稀釋至刻度，搖勻。以環己烷為空白，測定最大吸收波長為328nm，并在下列波長處測得吸收度，求本品中維生素A的含量。29本文檔共79頁；當前第29頁；編輯于星期二\5點43分A300：0.354A316：0.561A328：0.628A340：0.523A360：0.216A300/A328：0.555A316/A328：0.907A328/A328：1.000A340/A328：0.811A360/A328：0.299規定比值30本文檔共79頁；當前第30頁；編輯于星期二\5點43分A300/A328：0.564A316/A328：0.893A328/A328：1.000A340/A328：0.833A360/A328：0.3440.5550.9071.0000.8110.299+0.01－0.010+0.02+0.04－－－－－=====31本文檔共79頁；當前第31頁；編輯于星期二\5點43分32本文檔共79頁；當前第32頁；編輯于星期二\5點43分優點：簡便、快速缺點：呈色不穩定（5～10s內）水分干擾（反應需要無水條件）專屬性差（有關物質的干擾）三氯化銻有腐蝕性（注意安全）λmax618nm～620nm2、三氯化銻比色法(標準曲線法)33本文檔共79頁；當前第33頁；編輯于星期二\5點43分3、HPLC法（ChP2010新增的分析方法）適用于維生素A醋酸酯原料及其制劑中維生素A的含量測定。34本文檔共79頁；當前第34頁；編輯于星期二\5點43分第二節維生素E一、結構與性質名稱：消旋—α—生育酚醋酸酯母核：苯駢二氫吡喃衍生物苯環上有一乙酰化的酚羥基側鏈：脂肪烷烴35本文檔共79頁；當前第35頁；編輯于星期二\5點43分化學性質：1、易溶于有機溶劑，不溶于水2、UV:284nm(乙醇)3、酯鍵易水解4、對氧敏感，易氧化△36本文檔共79頁；當前第36頁；編輯于星期二\5點43分橙紅色二、鑒別1.硝酸反應（chp2010）取本品約30mg，加無水乙醇10ml溶解后，加硝酸2ml，搖勻，在75℃加熱15分鐘，溶液應顯橙紅色。37本文檔共79頁；當前第37頁；編輯于星期二\5點43分生育紅（橙紅色）生育酚HNO3強氧化劑38本文檔共79頁；當前第38頁；編輯于星期二\5點43分△[O]2.三氯化鐵－聯吡啶反應紅色39本文檔共79頁；當前第39頁；編輯于星期二\5點43分生育酚對-生育醌[O]弱氧化劑40本文檔共79頁；當前第40頁；編輯于星期二\5點43分3.UV法284nm254nm41本文檔共79頁；當前第41頁；編輯于星期二\5點43分4.TLC法薄層板硅膠G展開劑環己烷-乙醚（4：1）顯色劑硫酸（105℃5′）

VitERf

=0.742本文檔共79頁；當前第42頁；編輯于星期二\5點43分三、檢查：游離生育酚硫酸鈰滴定液（0.01mol/L）指示劑：二苯胺（亮黃→灰紫）

2.試劑1.原理：利用游離生育酚的還原性，將硫酸鈰還原成硫酸亞鈰43本文檔共79頁；當前第43頁；編輯于星期二\5點43分3、方法取本品0.10g，加無水乙醇5ml溶解后，加二苯胺試液1滴，用硫酸鈰液（0.01mol/L）滴定，消耗硫酸鈰液（0.01mol/L）不得過1.0ml。44本文檔共79頁；當前第44頁；編輯于星期二\5點43分四、含量測定1.GC法（ChP2010）載氣→N2固定液→硅酮（OV-17）擔體→硅藻土或高分子多孔小球柱溫→265℃檢測器→FID內標→正三十二烷色譜條件適用性試驗n≥500，R≥245本文檔共79頁；當前第45頁；編輯于星期二\5點43分46本文檔共79頁；當前第46頁；編輯于星期二\5點43分2、JP-RP-HPLC法樣品→dl－α－生育酚固定相→十八烷基硅烷鍵合硅膠流動相→甲醇-水（49：1）檢測波長→292nmR＞2.6RSD≤0.8%色譜條件47本文檔共79頁；當前第47頁；編輯于星期二\5點43分原理：利用生育酚的易氧化性指示劑：二苯胺（亮黃→灰紫）△3、鈰量法48本文檔共79頁；當前第48頁；編輯于星期二\5點43分氨基嘧啶環－CH2－噻唑環(季銨堿)Cl-·HCl第四節維生素B1一、結構與性質49本文檔共79頁；當前第49頁；編輯于星期二\5點43分3.硫色素反應4.堿性：嘧啶環——伯氨，噻唑環——季銨可與酸成鹽與生物堿↓→↓含量測定——非水堿量法1.溶解性：易溶于水，水溶液呈酸性2.UV:246nm(鹽酸液)50本文檔共79頁；當前第50頁；編輯于星期二\5點43分1.硫色素反應（維生素B1專屬反應）二、鑒別試驗51本文檔共79頁；當前第51頁；編輯于星期二\5點43分H+H+2.沉淀反應H+52本文檔共79頁；當前第52頁；編輯于星期二\5點43分3、硝酸鉛反應4、氯化物反應53本文檔共79頁；當前第53頁；編輯于星期二\5點43分三、含量測定1.非水溶液滴定法（ChP2010）喹那啶紅－亞甲藍（紫紅→天藍）加入醋酸汞的目的－－消除氫鹵酸鹽對非水滴定的干擾。54本文檔共79頁；當前第54頁；編輯于星期二\5點43分2.UV法246nm55本文檔共79頁；當前第55頁；編輯于星期二\5點43分3.硫色素熒光法NaOH56本文檔共79頁；當前第56頁；編輯于星期二\5點43分自學--維生素D:了解雜質檢查中麥角甾醇的檢查；2.初步掌握正相高效液相色譜法的應用。57本文檔共79頁；當前第57頁；編輯于星期二\5點43分L－抗壞血酸第五節維生素C一、結構與性質58本文檔共79頁；當前第58頁；編輯于星期二\5點43分1.強還原性：烯二醇結構59本文檔共79頁；當前第59頁；編輯于星期二\5點43分△50℃2.結構與糖類相似，具糖的性質----糖類的顯色反應3.UV特征(243nm)4.溶解性：易溶于水，水溶液呈酸性。60本文檔共79頁；當前第60頁；編輯于星期二\5點43分5.酸性：一元酸C3－OH，pKa=4.17C2－OH，pKa=11.5761本文檔共79頁；當前第61頁；編輯于星期二\5點43分6.水解反應：與堿反應62本文檔共79頁；當前第62頁；編輯于星期二\5點43分二、鑒別試驗1.與氧化劑的反應63本文檔共79頁；當前第63頁；編輯于星期二\5點43分1)與AgNO3反應(ChP2010)2)與2，6-二氯靛酚反應(ChP2010)氧化型玫瑰紅色藍色OHˉ（還原型）64本文檔共79頁；當前第64頁；編輯于星期二\5點43分3)與堿性酒石酸銅反應（USP）4)與KMnO4反應65本文檔共79頁；當前第65頁；編輯于星期二\5點43分2.糖類的反應糠醛：3.UV0.01mol/LHCL液中，λmax＝243nm66本文檔共79頁；當前第66頁；編輯于星期二\5點43分指示劑：淀粉指示液三、含量測定1.碘量法（ChP2010）原理67本文檔共79頁；當前第67頁；編輯于星期二\5點43分取本品約0.2g，精密稱定，加新沸過的冷水100ml與稀醋酸10ml使溶解，加淀粉指示液1ml，立即用碘滴定液（0.1mol/L）滴定，至溶液顯藍色，在30秒內不褪。每1ml碘滴定液(0.1mol/L)相當于8.806mg的C6H8O6方法68本文檔共79頁；當前第68頁；編輯于星期二\5點43分酸性環境：減慢VitC被O2氧化速度新沸冷H2O：趕走水中O2

立即滴定：減少O2的干擾附加劑干擾的排除：討論片劑——滑石粉——過濾注射劑——抗氧劑——丙酮Na2SO3NaHSO3

Na2S2O3Na2S2O569本文檔共79頁；當前第69頁；編輯于星期二\5點43分2.2，6-二氯靛酚滴定法原理方法自身指示劑終點法70本文檔共79頁；當前第70頁；編輯于星期二\5點43分討論（1）酸性環境（HPO3-HAc）：

穩定VitC（2）快速滴定（2min內）：

防止其他還原性物質干擾（3）剩余比色測定71本文檔共79頁；當前第71頁；編輯于星期二\5點43分（4）缺點

需經常標定貯存≤一周干擾多氧化力較強（5）專屬性比碘量法高，多用于維生素C制劑的分析。不穩定72本文檔共79頁；當前第72頁；編輯于星期二\5點43分在三氯醋酸或鹽酸存在下，經水解、脫羧、失水后，加入吡咯即產生藍色產物的藥物應是A.氯氮卓B.維生素AC.普魯卡因D.鹽酸嗎啡E.維生素C習題73本文檔共79頁；當前第73頁；編輯于星期二\5點43分中國藥典（2005年版）采用以下何法測定維生素E含量A.酸堿滴定法B.氧化還原法C.紫外分光光度法D.氣相色譜法E.