2023年生物技術期末復習-基因工程原理（生物技術）考試上岸拔高歷年高頻考點真題含答案（圖片大小可自由調整）卷I一.綜合考核題庫(共85題)1.PCR的衍生技術包括A、反轉錄PCRB、實時熒光定量PCRC、反向PCRD、巢式PCRE、RACE-PCR2.隱性質粒3.Nick和Gap的含義是不同的，前者指DNA的單鏈中有較小的缺失，后者僅是斷開了一個磷酸二酯鍵。4.通過比較用不同組合的限制性內切核酸酶處理某一特定基因區域所得到的不同大小的片段，可以構建顯示該區域各限制性內切核酸酶切點相互位置的_________。5.基因工程藥物的特點是高技術，短周期，高投入，高風險，高收益。6.限制酶命名采用Smith和Athens提議的方案，第一個字母大寫取自來源細菌的屬名的第一個字母；第二、三個字母取自來源細菌的種名的前兩個字母；第四個字母（如果有）取自來源菌的____。7.對柯斯質粒(cosmid)描述正確的是A、它具有COS位點，因而可進行體外包裝B、它具有質粒DNA的復制特性C、進入受體細胞后，可引起裂解反應D、進入受體細胞后，可引起溶源化反應E、能與有同源序列的質粒進行重組8.核酸雜交探針就是帶有放射性標記的DNA分子。9.M13噬菌體屬于A、雙鏈噬菌體B、單鏈噬菌體C、質粒D、亞病毒10.在_________的作用下，含目的基因的DNA片斷與克隆載體連接成為重組DNA分子。11.PCR反應中常用的酶是______。12.pSC101質粒是第一個成功克隆真核DNA的載體，屬于松弛控制型的質粒。13._________是指利用基因工程原理和技術，將感興趣的基因在植物中表達并實現穩定遺傳。14.切口平移法標記DNA探針時應用的酶是_____。15.雙鏈DNA中一段自我互補的序列被稱為回文序列，這種序列一般具有哪些特征。A、有對稱軸B、兩條鏈的5’→3’方向的序列相同C、是Ⅱ類酶的識別序列D、可增強基因的表達E、是I類酶的識別序列16.染色質免疫沉淀技術是檢測（)的技術A、RNA－蛋白相互作用B、蛋白－蛋白相互作用C、RNA－RNA相互作用D、DNA－蛋白相互作用17.影響限制性核酸內切酶酶切的反應條件有哪些A、溫度B、鹽離子濃度C、緩沖體系D、反應體積和甘油濃度E、限制性核酸內切酶反應的時間18.應用藥物敏感基因轉染腫瘤細胞，以提高腫瘤患者細胞對藥物的敏感性。這是基因治療策略中的哪一項A、基因激活B、基因失活C、免疫調節D、藥物敏感療法19.DNA片段之間的連接方式有哪些？20.______________是遺傳物質的基本單位,也是作為遺傳物質的核酸分子上的一段片段。21.接合質粒22.將含有一個mRNA的DNA拷貝的克隆稱作一個cDNA克隆，源于同一批RNA制備物的克隆群則構建了一個______。23.試述免疫共沉淀技術的原理？24.何謂基因組文庫？25.擴增外源基因時需要DNA載體中的（）性質A、青霉素抗性B、卡那霉素抗性C、自我復制能力D、自我轉錄能力26.限制性核酸內切酶切割DNA后產生A、5’磷酸基和3’羥基基團的末端B、3’磷酸基和5’羥基基團的末端C、5’磷酸基和3’磷酸基團的末端D、5’羥基和3’羥基基團的末端27._________是指轉錄因子用于識別靶DNA的蛋白結構域。28.能夠產生防御病毒侵染的限制性內切核酸酶的細菌，其本身的基因組中沒有被該核酸酶識別的序列。29.T4DNA聚合酶具有幾種酶活性A、2種B、3種C、4種D、1種30._________是利用同源重組去改變內源性基因，通過基因打靶可以成功剔除一個基因外顯子，增加一個基因和引起點突變。31.擴增與已知DNA區段相連接的未知染色體DNA序列的PCR技術是A、常規PCRB、逆轉錄PCRC、反向PCRD、多重PCR32.大腸桿菌作為外源基因表達系統的優點是A、繁殖迅速B、操作方便C、基因克隆機表達系統成熟完善D、全基因組測序完成E、被美FDA批準為安全的基因工程受體生物33.下面關于穿梭質粒載體描述最正確的是A、在不同的宿主中具有不同的復制機制B、在不同的宿主細胞中使用不同的復制起點C、在不同的宿主細胞中使用不同的復制酶D、在不同的宿主細胞中具有不同的復制速率34.欲將一真核生物的結構基因克隆后轉移到原核生物(如E．coli)中進行表達，克隆時應注意哪些問題？35.cDNA文庫的特點是什么？36.細菌抗藥性基因一般存在于A、核酸DNAB、質粒C、RNAD、小的直線型DNA37.EcoRI的識別序列是A、5-GATTC-3B、5-CTGGCAG-3C、5-CCCGGG-3;D、5-GGATCC-338.Klenow酶在有_________情況下，呈現DNA聚合酶活性，39.在DNA分離過程中，通常要進行透析，其目的是_________。40.什么是穿梭載體？41.何謂cDNA文庫？42.通過基因敲除技術使生物體缺失一個或更多基因，從而判斷這些被敲掉基因的功能，常稱之為_______________。43.逆轉錄病毒載體的優點不包括A、高效感染宿主細胞B、拷貝數高C、侵染范圍廣D、基因組小并且簡單44.第一個成功地用于基因工程的大腸桿菌質粒是pBR322質粒。45.基因組文庫和cDNA文庫的區別？46.下列哪一種限制性核酸內切酶是單功能酶A、I型B、II型C、III型D、IV型47.雙酶切或多酶切時，一般先用低鹽濃度的酶切，再用高鹽濃度的酶切。48.試述基因組文庫的構建流程。49.酵母表達系統是最常用的真核表達系統。50.說明SangerDNA測序法的原理。51.迄今發現的質粒DNA都是環狀的。52.klenow片段聚合酶具有哪些活性A、3’-5’聚合酶活性B、5’-3’聚合酶活性C、5’-3’DNA外切酶活性D、3’-5’外切酶活性E、末端轉移酶活性53.多核苷酸激酶之所以能夠用于DNA片段的標記，是因為它能夠將單個的32P標記的單核苷酸加到每一DNA鏈的5’端。54.基因工程又叫遺傳工程、____________、分子克隆。55.在微生物遺傳學和分子遺傳學研究領域中的理論上的三大發現對基因工程的誕生起到了決定性的作用，這三大發現是下列哪些A、發現了生物的遺傳物質是DNA而不是蛋白質B、明確了DNA的雙螺旋結構和半保留復制機制C、遺傳密碼子的破譯D、質粒改造成載體以攜帶DNA片段克隆E、逆轉錄酶的使用56._________決定PCR擴增產物的特異性與長度。57.寫出分子克隆的載體應具備的條件？58.核酸雜交的原理是根據RNA分子間互補。59.下面關于多克隆位點MultipleCloneSite（MCS)的描述錯誤的一項是A、僅位于質粒載體中B、具有多種酶的識別序列C、不同酶的識別序列可以有重疊D、一般是人工合成后添加到載體中60.大腸桿菌表達系統是目前使用最為廣泛的原核表達系統。61.1982年在美國誕生了世界上第一種基因工程藥物A、重組人胰島素B、人生長激素C、凝血因子D、干擾素62.下列哪一項不是逆轉錄病毒的特點A、基因組很小B、表達時間短C、可感染分裂細胞D、可整合到宿主染色體上63.DNA聚合酶I_________的是用枯草桿菌蛋白酶切割DNA聚合酶I得到的分子質量為76kDa的大片段。64.什么是熒光定量PCR?65.具有EcoRI末端的外源DNA片段可以以兩個方向插入到EcoRI末端的載體中。66.DNA連接酶根據來源不同，可以分為三類，即_________和T4DNA連接酶及熱穩定的DNA連接酶。67.PCR反應中的復性溫度要求高于A、37℃B、55℃C、72℃D、96℃68.酵母人工染色體要在酵母細胞中穩定存在，必須有哪些基本的結構？69.何謂基因工程？70.基因工程中的工具酶有哪些A、限制性核酸內切酶B、DNA連接酶C、DNA聚合酶D、堿性磷酸酶E、末端核苷酸轉移酶71.基因工程中使用的II類限制性內切核酸酶不僅有內切核酸酶的活性，而且有甲基化酶的活性。72._________是自然界存在的植物基因工程的天然載體。73.基因組文庫中包括有內含子和外顯子，而cDNA文庫中則不含_________。74.啟動子從轉錄模式上可分為哪兩種？表達系統常選用哪一種？其機理是什么？75.Ptrp表示（）A、噬菌體啟動子B、色氨酸啟動子C、乳糖和色氨酸復合啟動子D、乳糖啟動子76.重組DNA技術領域常用的質粒DNA是A、細菌染色體DNA的一部分B、細菌染色體外的獨立遺傳單位C、病毒基因組DNA的一部分D、真核細胞染色體DNA的一部分77.基因治療通常采用哪種載體比較合適A、逆轉錄病毒B、Ti質粒C、噬菌體D、質粒pBR32278.第一個用于構建重組體的限制性內切核酸酶是____。79.基因治療是把健康的外源基因導入A、有基因缺陷的染色體中B、有基因缺陷的細胞器中C、有基因缺陷的DNA分子中D、有基因缺陷的細胞中80.T4DNA連接酶和E．coli連接酶都能催化雙鏈DNA和單鏈DNA的連接。81.對基因功能的研究，首先需要獲取基因或基因片段，即______________。82.甲醇酵母表達系統具有的抗藥性基因是A、氨芐青霉素和卡那霉素B、四環素和氨芐青霉素C、氨芐青霉素和慶大霉素D、四環素和慶大霉素83.Cre-loxP系統兩個loxP位點位于不同的DNA鏈或染色體上，Cre重組酶誘導loxP間的序列互換。84.限制性內切酶可特異性識別A、雙鏈DNA的特定堿基對B、雙鏈DNA的特定堿基序列C、單鏈RNA的特定堿基序列D、單鏈DNA的特定堿基序列85.寫出動物基因工程的常用方法？卷I參考答案一.綜合考核題庫1.正確答案:A,B,C,D,E2.正確答案:指宿主細胞含有某種質粒，但無異樣性狀表現，目前的檢測手段還未能檢測出因含該基因而導致性狀、宿主代謝物等的改變。3.正確答案:錯誤4.正確答案:限制酶切圖譜5.正確答案:錯誤6.正確答案:株名7.正確答案:A,B,D,E8.正確答案:錯誤9.正確答案:B10.正確答案:DNA連接酶11.正確答案:TaqDNA聚合酶12.正確答案:錯誤13.正確答案:轉基因植物14.正確答案:DNA聚合酶I15.正確答案:A,B,C16.正確答案:D17.正確答案:A,B,C,D,E18.正確答案:D19.正確答案:具黏性末端的DNA片段之間的連接、具平末端DNA片段之間的連接、DNA片段末端修飾后進行連接、DNA片段加連桿（linker）后的連接。20.正確答案:基因21.正確答案:指含有nic/born基因，能自我轉移的質粒。22.正確答案:cDNA文庫23.正確答案:以抗體和抗原之間的相互作用為基礎的用于研究蛋白質相互作用的經典方法。是確定兩種蛋白質在完整細胞內生理性相互作用的有效方法。24.正確答案:指將某生物的全部基因阻DNA切割成一定長度的DNA片段克隆到某種載體上而形成的集合。25.正確答案:C26.正確答案:A27.正確答案:鋅指結構域28.正確答案:正確29.正確答案:A30.正確答案:基因打靶技術31.正確答案:C32.正確答案:A,B,C,D,E33.正確答案:B34.正確答案:應注意的問題有：啟動子、密碼子、剪接、分泌。35.正確答案:基因特異性、器官特異性、代謝或發育特異性、不均勻性、各cDNA均可獲得表達。36.正確答案:B37.正確答案:A38.正確答案:Dntp39.正確答案:除去小分子的無機離子40.正確答案:是指那些既能在真核細胞中繁殖又能在原核細胞中繁殖的載體。41.正確答案:指某生物某一發育時期所轉錄的mRNA經反轉錄形成的cDNA片段與某種載體連接而形成的克隆的集合。42.正確答案:缺失基因功能43.正確答案:B44.正確答案:錯誤45.正確答案:cDNA文庫是有時效性的，cDNA文庫構建時的信息供體是某一時空條件下的細胞的總mRNA，它是在轉錄水平上反映該生物在某一特定發育時期、某一特定組織在某種環境條件下的基因表達情況，并不能包括該生物有機體的全部基因。46.正確答案:B47.正確答案:正確48.正確答案:生物供體DNA片段的制備；載體的選擇與制備；DNA片段與載體的連接；重組體轉化宿主細胞；基因文庫質量的評價。49.正確答案:正確50.正確答案:(1)核酸是依賴于模板在聚合酶的作用下由5'端向3'端聚合(DNA聚合酶參與了細菌修復DNA合成過程)；(2)可延伸的引物必須能提供游離的3'羥基末端，雙脫氧核苷酸由于缺少游離的3'羥基末端，因此會終止聚合反應的進行。如果分別用4種雙脫氧核苷酸終止反應，則會獲得4組長度不同的DNA片段。通過比較所有DNA片段的長度可以得知核苷酸的序列。51.正確答案:錯誤52.正確答案:B,D53.正確答案:錯誤54.正確答案:DNA重組技術55.正確答案:A,B,C56.正確答案:引物57.正確答案:自主復制，即具有復制原點；易于擴增分離純化；有適宜的限制酶切位點；具備對重組體易于檢測的選擇性遺傳標記；表達載體還應有表達調控元件。58.正確答案:錯誤59.正確答案:A60.正確答案:正確61.正確答案:A62.正確答案:B63.正確答案:Klenow片段64.正確答案:是一種利用外參或者內參為標準，在PCR體系中加入熒光信號強度與DNA數目相關的熒光物質，并通過對PCR擴增反應中每一個循環產物熒光信號的實時變化檢測來實現對起始模板定量及定性的分析工作。65.正確答案:正確66.正確答案:大腸桿菌的DNA連接酶67.正確答案:B68.正確答案:(1)著絲粒；(2)端粒；(3)ARS序列。69.正確答案:一般指利用分子生物學的手段，將不同生物的遺傳物質按人們的意志或需要，進行基因的定向改造、突變與重組，從而使生物體的遺傳性狀發生變異。70.正確答案:A,B,C,D,E71.正確答案:錯誤72.正確答案:Ti質粒73.正確答案:內含子74.正確答案:啟動子從轉錄模式上分為：組成型啟動子和誘導型啟動子，表達系統常選用誘導型啟動子，機理：指在某些特定的物理或化學信號的刺激下，該種類型的啟動子可以大幅度的提高基因的轉錄水平。75.正確答案:B76.正確答案:B77.正確答案:A78.正確答案:EcoRl79.正確答案:D80.正確答案:錯誤81.正確答案:目的基因82.正確答案:A83.正確答案:錯誤84.正確答案:B85.正確答案:顯微注射技術構建轉基因小鼠；基因打靶策略；病毒載體法；精子載體法；ZFN介導轉基因；TALEN技術。卷II一.綜合考核題庫(共85題)1.除了常規PCR外，還有一些特殊的PCR，常見的有反向PCR、反轉錄PCR、______________、多重PCR、巢式PCR。2.常用的DNA探針標記方法是切口平移法和隨機引物法。3.下列哪一種酶不能標記DNA分子探針A、Klenow片段B、T4DNA聚合酶C、DNA連接酶D、大腸桿菌聚合酶I4.1986年第一例植物基因工程產品----_________問世。5.一個質粒含有四環素抗性基因(tetr)和LacZ基因，tetr內有一HindIII位點，LacZ中有一EcoRI

位點。如用這兩種切割載體一并連接入相應的外源片段，則帶有該重組質粒的細胞將A、對四環素敏感，在X-gal平板上呈現藍色B、有四環素抗陛，在X-gal平板上呈現白色C、對四環素敏感，在X-gal平板上呈現白色D、有四環素抗性，在X-gal平板上呈現藍色6.PCR反應中DNA模板量一般為A、100-10000拷貝B、100-100000拷貝C、1000-10000拷貝D、10-100拷貝7.DNA連接酶反應的時間一般為_____________就足以取得較好的連接效果。8.一般情況下，質粒既可以整合到染色體上，也可以獨立存在。9.甲醇酵母表達系統有幾個乙醇氧化酶基因A、2個B、3個C、4個D、1個10.人類基因組是指人體DNA分子所攜帶的全部遺傳信息。人類基因組計劃就是分析測定人類基因組的核苷酸序列。其主要內容包括繪制人類基因的遺傳圖、物理圖、序列圖和轉錄圖。科學家應對多少染色體進行分析A、46條B、24條C、23條D、22條11.在引物存在的情況下才能發揮作用的酶是A、限制性核酸內切酶B、末端轉移酶C、逆轉錄酶D、DNA連接酶12.克隆基因目的蛋白的表達形式主要有哪些類型？13.YAC是下列哪種克隆載體的縮寫A、酵母人工染色體B、人工Y染色體C、細菌人工染色體D、粘粒14.Ti質粒中能插入到植物基因組DNA區段是A、復制遠點區B、毒素蛋白區C、T-DNA區D、冠嬰堿代謝區15.基因工程最知名的也是飽受爭議的應用之一是_____________。16.________主要是根據蛋白質的氨基酸序列設計一組混合引物來合成相應的基因。17.基因工程的基本流程是A、目的基因的分離、獲取與制備B、目的基因與載體連接構建成為重組載體分子C、重組DNA分子導入到受體細胞D、外源目的基因陽性克隆的鑒定和篩選E、外源目的基因的表達18.質粒生物學特性不包括A、自我復制B、轉移性C、相容性D、高拷貝數19.蛋白質的融合表達式指外源基因與載體已有的擔體蛋白的編碼基因拼接在一起，并作為一個新的____________進行表達。20.將含有外源基因組一個酶切片段的質粒稱之為含有一個基因組DNA克隆,各種此類質粒的集合體稱之為構建了一個_______.21.下列哪一種疾病是獲得性免疫缺陷綜合癥A、血友病BB、心血管疾病C、艾滋病D、囊性纖維化22.cDNA合成第一鏈時所用的引物是A、PolyCB、PolyTC、發夾結構D、PolyA23.非接合質粒24.轉基因植物技術在農業領域主要有哪些應用？就其中一方面應用進行舉例說明。25.Southern印跡是用DNA探針檢測DNA片段，而Northern印跡則是A、用RNA探針檢測RNA片段B、用DNA探針檢測RNA片段C、用DNA探針檢測蛋白質片段D、用RNA探針檢測DNA片段26.第一個作為重組DNA載體的質粒A、ColElB、pSCl01C、pUCl8D、pBR32227.抗性基因（Resistant？gene）是目前使用的最廣泛的選擇標記，常用的抗生素抗性有哪幾種？28.用同一種酶切割載體和目的基因后進行連接，連接產物會含大量自身環化載體，采用下列哪種酶處理，可防止自身環化A、核酸外切酶B、核苷酸激酶C、末端轉移酶D、堿性磷酸酶29.連接酶通常使用的連接反應溫度是A、37℃B、20℃C、16℃D、50℃30.cDNA文庫包括該種生物的A、某些結構基因B、內含子C、所有的結構基因D、內含子和調控區31.下列測序方法哪個是屬于經典的DNA測序方法A、ABISOLID測序B、Illumina測序C、Roche454D、雙脫氧終止法32.限制酶主要是從_________中分離純化出來的。33.以mRNA為模板合成CDNA時，所用的工具酶是A、DNA聚合酶IB、DNA連接酶C、逆轉錄酶D、核酸內切酶34.一般來說，識別序列的堿基對越多，則這種酶在DNA上出現的頻率越高。35.同尾酶36.動脈硬化屬于（）類型的疾病A、心血管疾病B、惡性腫瘤C、血友病D、艾滋病37.質粒是基因工程最常用的運載體，它的主要特點是：①能自主復制②不能自主復制③結構很小④蛋白質⑤環狀RNA⑥環狀DNA⑦能“友好”地“借居”A、①③⑤⑦B、②④⑥C、①③⑥⑦D、②③⑥⑦38.逆轉錄酶具有下列哪些酶活性A、5’-3’聚合酶活性B、5’-3’DNA外切酶活性C、3’-5’外切酶活性D、末端轉移酶活性E、RnaseH活性39.請寫出Southern雜交的操作過程。40.巴斯德畢赤氏酵母表達系統較釀酒酵母表達系統具有哪些優勢？41.LacZ基因通常用于構建質粒載體的目的是A、編碼藍色色素產物，可用于示蹤轉化的細胞B、編碼一種酶，將RNA轉化為DNAC、編碼一種抗生素抗性的酶D、編碼一種可檢測的酶,當基因內部的位點插入任何外源片段，ORF遭到破壞時，產物即不能表達42._________是指以精子為載體，通過動物受精過程將外源基因導入胚胎，產生轉基因動物。43.核酸分子雜交的探針只能是標記的小片段DNA分子44.請敘述反轉錄PCR的含義。45.大腸桿菌DNA聚合酶有幾種酶活性A、5種B、2種C、3種D、4種46.在非最適反應條件下，有些限制性核酸內切酶能切割和識別與特定識別序列相似的序列，這種改變的特殊活性叫做______。47._________是一種最為普遍的與年齡相關的認知障礙退行性疾病。48.用不同的產生黏性末端的限制性內切核酸酶分別切割載體和外源DNA，得到的黏性末端是不親和的黏性末端。49.被FDA批準為安全的基因工程受體生物的細菌是A、金黃色葡萄球菌B、蠟樣芽孢桿菌C、大腸桿菌D、變形桿菌50.連接反應中，哪一種組分的作用是激活連接酶反應A、Tris-HCLB、MgCl2C、ATPD、DTT51.基因工程是_________年代發展起來的遺傳學的一個分支學科。52.標記靈敏度高效果好的探針是A、32PB、地高辛C、生物素D、熒光素53.對Ti質粒描述正確的是：A、可從農桿菌轉到植物細胞中B、作為雙鏈DNA被轉移C、在植物中導致腫瘤D、介導冠癭堿的合成，作為細菌的營養物和植物的生長激素E、需要細菌的vir 基因幫助轉移54.融合蛋白實際上就是雜合蛋白，含有兩個或多個蛋白質的氨基酸序列。55.表達人類蛋白質的最理想的細胞體系是A、E.coli表達體系B、酵母表達體系C、昆蟲表達體系D、哺乳類細胞表達體系56.酵母雙雜交法是檢測（)的技術A、RNA－蛋白相互作用B、蛋白－蛋白相互作用C、RNA－RNA相互作用D、DNA－蛋白相互作用57.下面關于松弛型質粒(relaxedplasmid)性質的描述不正確的是A、質粒的復制只受本身的遺傳結構的控制，而不受染色體復制機制的制約，因而有較多的拷貝數B、可以在氯霉素作用下進行擴增C、通常具有較少的拷貝數D、同嚴緊型質粒整合后，雜合質粒優先使用松弛型質粒的復制子

58.原核啟動子是由兩端緊密連接且又高度保守的核苷酸序列組成。59.什么是動物乳腺生物反應器？60.在眾多的植物轉基因方法中，_________的方法應用最多。61.在分離DNA時，要戴手套操作，原因是手上常有________。62.基因克隆中低拷貝數的質粒載體是不起作用的。63.Amp是（）的表示A、氨芐青霉素B、卡那霉素C、氯霉素D、四環素64.Southern雜交時，探針與膜上的（）雜交A、DNAB、RNAC、蛋白質D、染色體65.末端脫氧核苷酸轉移酶在基因工程的操作中主要是防止載體自連。66.質粒具有下列哪幾項生物學特性A、質粒的復制B、拷貝數C、不相容性D、轉移性E、表達性67.根據Northern印跡的結果可以說明：_________。68.關于宿主控制的限制修飾現象的本質描述不太恰當的是A、由作用于同一DNA序列的兩種酶構成B、這一系統中的核酸酶都是II類限制性內切核酸酶C、這一系統中的修飾酶主要是通過甲基化作用對DNA

進行修飾D、不同的宿主系統具有不同的限制--修飾系統69.基因操作的核心部分是_________。70.λ噬菌體DNA和M13單鏈噬菌體DNA在成熟前的DNA復制都是用滾環模型。71.Northern雜交時，探針與膜上的（）雜交A、DNAB、RNAC、蛋白質D、染色體72.westernblot雜交時，探針與膜上的（）雜交A、DNAB、RNAC、蛋白質D、染色體73.根據Northern印跡的結果可以說明_________。74.在長模板鏈的指導下，引物延伸合成長的DNA互補鏈時應選用A、T4DNA聚合酶B、Klenow酶C、大腸桿菌DNA聚合酶ID、T7DNA聚合酶75.在LacI標記基因插入外源基因，經IPTG誘導，在X-gal培養基中顯_________色，為陽性克隆。76.質粒具有____________，它是指在自然條件下，很多質粒可以通過稱為細菌接合的作用轉移到新宿主內。77._________是革蘭氏陽性細菌，在芽孢形成過程中能產生大量的伴孢晶體。78._________是指編碼產物能夠被快速測定，常用來判斷外源基因是否已經成功導入寄主細胞并檢測其表達活性的一類特殊用途的基因。79.一般來說，完全切割質粒或病毒DNA，要比切割線狀DNA需要更多的酶，最高的需要20倍。80.目的蛋白與擔體蛋白GST的分離是用哪一種酶進行水解的？A、腸激酶酶解B、溴化氫裂解C、凝乳酶酶解D、凝血酶酶解81.________技術是基于互補的DNA單鏈分子能夠形成穩定雙螺旋結構的天然特性而發展起來的。82.構建cDNA文庫的首要步驟是A、分離既定組織或者細胞的DNAB、分離既定組織或者細胞的mRNAC、逆轉錄合成cDNAD、cDNA的克隆83._________是分子生物學、組織化學及細胞學相結合而產生的一門新興技術，始于20世紀60年代。84.基因工程中常用的DNA聚合酶有A、大腸柑橘聚合酶IB、Klenow大片段酶C、T4噬菌體聚合酶D、T7噬菌體聚合酶E、逆轉錄酶85.最早建立成功的轉基因哺乳動物是_________。卷II參考答案一.綜合考核題庫1.正確答案:實時熒光定量PCR2.正確答案:正確3.正確答案:C4.正確答案:除草劑耐受煙草5.正確答案:C6.正確答案:B7.正確答案:30min8.正確答案:錯誤9.正確答案:A10.正確答案:B11.正確答案:C12.正確答案:表達蛋白按溶解特性通常包括：不溶性蛋白和可溶性蛋白兩類，具體包括如下幾種結構形態：包涵體型蛋白、融合型蛋白、分泌型蛋白。13.正確答案:A14.正確答案:C15.正確答案:轉基因食品16.正確答案:簡并引物PCR17.正確答案:A,B,C,D,E18.正確答案:C19.正確答案:開放閱讀框20.正確答案:基因組文庫21.正確答案:C22.正確答案:B23.正確答案:指不含nic/born基因，不能自我轉移的質粒。24.正確答案:抗蟲轉基因作物；抗病毒轉基因作物；抗菌轉基因植物；抗逆轉基因植物；抗除草劑轉基因植物；改良作物品質。具體實例可以從這幾個方面挑一項進行說明，比如：抗除草劑轉基因植物，這類植物轉入了抗除草劑基因，表現出抗不同類型除草劑的性狀，目前已獲得了一些抗除草劑作物，如抗草丁膦轉基因作物冬油菜，抗草甘膦轉基因作物大豆、玉米、棉花、油菜、向日葵、甜菜，抗磺酰脲類除草劑轉基因作物大豆，棉花。25.正確答案:B26.正確答案:B27.正確答案:氨芐青霉素抗性基因、四環素抗性基因、氯霉素抗性基因、卡那霉素和新霉素抗性基因以及琥珀突變抑制基因。28.正確答案:D29.正確答案:C30.正確答案:C31.正確答案:D32.正確答案:原核生物33.正確答案:C34.正確答案:錯誤35.正確答案:有的限制性核酸內切酶雖然識別序列各不相同，但切割后都產生相同的黏性末端，稱之為同尾酶。36.正確答案:A37.正確答案:C38.正確答案:A,B,C,D,E39.正確答案:基因組DNA提取和限制酶消化；瓊脂糖凝膠電泳分離基因組DNA樣品及預處理；轉膜；探針標記；預雜交、雜交和洗膜；放射性自顯影檢測。40.正確答案:生長迅速，外源蛋白表達水平高，產物可翻譯后修飾，產物可正確折疊和高效分泌，可利用簡單無機鹽培養基，高密度發酵，生物量大，實驗室和工業操作簡單。41.正確答案:D42.正確答案:精子載體法43.正確答案:錯誤44.正確答案:是一種利用逆轉錄酶將組織和細胞中的RNA反轉錄成cDNA，并以此為模板通過PCR進行DNA擴增來間接檢測RNA的鏈式聚合酶反應。45.正確答案:C46.正確答案:星活性47.正確答案:阿爾茨海默病48.正確答案:錯誤49.正確答案:C50.正確答案:B51.正確答案:20世紀70年代52.正確答案:C53.正確答案:A,C,D,E54.正確答案:正確55.正確答案:D56.正確答案:B57.正確答案:C58.正確答案:錯誤59.正確答案:能夠分泌乳汁的轉基因動物生產其他來源的基因產品，并通過乳腺分泌出來。60.正確答案:農桿菌介導61.正確答案:核酸酶62.正確答案:錯誤63.正確答案:A64.正確答案:A65.正確答案:錯誤66.正確答案:A,B,C,D67.正確答案:外源基因是否進行了轉錄68.正確答案:B69.正確答案:基因克隆70.正確答案:正確71.正確答案:B72.正確答案:C73.正確答案:外源基因是否進行了轉錄74.正確答案:D75.正確答案:白76.正確答案:轉移性77.正確答案:Bt78.正確答案:報告基因79.正確答案:正確80.正確答案:D81.正確答案:核酸雜交82.正確答案:B83.正確答案:原位雜交技術84.正確答案:A,B,C,D,E85.正確答案:轉基因小鼠卷III一.綜合考核題庫(共85題)1.基因重組的載體必須具備下列哪些特點：A、本身是一個復制單位，能在受體細胞中復制B、插入外源DNA后也不影響自身的復制C、易于進入受體細胞D、通過自身的酶系在受體細胞中復制E、通常帶有抗性基因，易于篩選和鑒定2.酶切法鑒定重組體時，最常用的方法是A、用多種限制性酶將其切出B、用S1核酸酶將其切出C、用DNA酶將其切出D、用重組時的限制性酶將其切出3.表達載體的結構元件包括哪些A、具備與克隆載體相同的復制原點、多克隆位點、篩選標記B、啟動子C、轉錄終止子D、核糖體識別位點E、翻譯起始密碼子和終止密碼子4.釀酒酵母表達系統常用啟動子有哪些？5.不是基因工程載體中的報告基因的是A、lacZB、GFPC、AmpD、ori6.獲得DNA重組體后，還需進一步鑒定，可采用的方法有A、DNA序列測定B、PCR鑒定C、酶切鑒定D、表達產物的鑒定E、進行定點突變7._________是植物細胞出去細胞壁后的部分，是一個質膜包圍的裸露細胞。8.常規PCR反應程序中，高溫變性一般設置多高的溫度A、94℃B、65℃C、55℃D、72℃9.當載有文庫的菌落被轉移到雜交膜上用于篩選時，需要堿性溶液處理的步驟，這一步驟的意義何在?A、啟動雜交探針與互補序列間的反應B、標記DNA，便于檢測C、裂解菌體細胞，并使DNA變性D、促使文庫DNA結合到雜交膜上10.何謂轉基因動物？11.經典的DNA測序方法有兩種，即Sanger雙脫氧末端終止法和_______________。12.關于回文序列，下列各項中哪些是不正確的？A、是限制性內切核酸酶的識別序列B、是某些蛋白質的識別序列C、是基因的旁側序列D、是高度重復序列E、有對稱軸13.印跡是如何形成的？14.Tet是下列哪一種抗性標記的簡寫名稱A、氨芐青霉素B、卡那霉素C、氯霉素D、四環素15.下面哪一項不是產生星號活性的主要原因A、甘油含量過高B、反應體系中含有有機溶劑C、含有非Mg2+的二價陽離子D、酶切反應時酶濃度過低16.II類限制酶反應中必須添加的陽離子是A、Na+B、Ca2+C、Mg2+D、Mn2+17.已知某一內切核酸酶在一環狀DNA上有三個切點，因此，用此酶切割該環狀DNA，可得到三個片段。18.PCR技術是_________的縮寫。19.以病毒為載體產生轉基因的動物是_________。20.何謂轉基因植物？21.在重組DNA技術領域所說的分子克隆是指A、構建重組DNA分子B、無性繁殖DNAC、有性繁殖DNAD、建立單克隆抗體22.組成型啟動子23.目的基因通常是指A、擬進行研究或利用的基因B、人工合成的基因C、載體DNA分子D、具有編碼序列的DNA分子24.II型限制性核酸內切酶在發揮作用時需要ATP和Mg2+。25.構建GST蛋白表達系統的載體是為了使目標蛋白以哪種方式表達?A、融合表達B、分泌表達C、獨立表達D、包涵體表達26.在細菌中增殖來自某一生物的染色體DNA或cDNA所形成的全部DNA片段克隆的集合體叫基因庫。27.DNA聚合酶I在基因工程中有哪些主要用途？28.II型限制酶識別位點一般長度為______個核苷酸對。29.基因工程的兩個基本特點是：分子水平上的操作和_________。30.基因治療的載體只有病毒載體系統。31.EGTA是_________離子螯合劑。32.下列哪一種限制性核酸內切酶的酶蛋白分子組成只有一單一亞基A、II型B、III型C、IV型D、I型33._________成為國際國內人體健康戰略的重中之重。34.一種間歇的培養方式，除了進氣、排氣和補加酸堿調節pH外，在培養過程中與外界沒有其他的物料交換。這種培養方式是A、補料分批培養B、連續培養C、透析培養D、分批培養35.基因工程藥品的試驗分為幾個時期A、2個B、3個C、4個D、1個36.藍白斑篩選重組子時，白色菌落不一定就是陽性克隆。37.λ噬菌體載體根據外源基因整合的方式不同，分為____________和置換型載體兩大類。38.基因工程中有三種主要類型的載體：_________、病毒DNA質粒和病毒DNA雜合體。39.克隆的進行依賴于各種參與DNA新陳代謝的_________的使用。40.所有限制性核酸內切酶的最適反應溫度為37℃。41.只能從DNA分子的末端開始水解磷酸二酯鍵，使核苷酸解離下來的酶是A、核酸外切酶B、核酸內切酶C、DNA連接酶D、末端轉移酶42.向有功能缺陷的細胞補充相應功能基因，以糾正或補償其基因缺陷，達到治療的目的。這個過程叫做A、基因治療B、基因置換C、基因修正D、基因激活43.反向PCR是以mRNA為模板進行的一類特殊PCR。44.根據結構和功能特性，可將DNA限制性內切酶分為幾類A、I型酶B、II型酶C、III型酶D、IV型酶E、V型酶45.在cDNA技術中，所形成的DNA發夾環可用A、限制性內切核酸酶切除B、3’切核酸酶切除C、S1核酸酶切除D、5’切核酸酶切除46.柯斯質粒是一類人工構建的質粒-噬菌體雜合載體，它的復制子來自_________，cos位點序列來自λ噬菌體。47.用_________表達乳鐵蛋白可謂是乳腺生物反應器的典型代表。48.黏性末端連接法是最常用的連接方法，具有許多優點，但是也有一些不足，請指出這些不足之處。49.基因治療研究的基本程序不包括A、目的基因的選擇與制備B、靶細胞的選擇和培養C、基因的導入和表達D、大腸桿菌的培養50.下列哪種病不可以進行遺傳病的基因治療A、血友病BB、艾滋病C、囊性纖維化D、心血管疾病51.Cosmid的特點元件是52.限制性核酸內切酶是由細菌產生的，其生理意義是A、修復自身的遺傳缺陷B、促進自身的基因重組C、強化自身的核酸代謝D、提高自身的防御能力53.如果知道某一基因的功能及其相應的蛋白質的氨基酸序列組成，可以通過何種方法克隆該基因？54.同一種限制性核酸內切酶分別切割目的基因DNA與載體DNA時，酶切片段不能互相連接的是A、載體DNA與載體DNA之間B、目的基因與載體DNA之間C、目的基因與mRNA之間D、目的基因與目的基因之間55.重組體的篩選方法有A、抗性藥物標記選擇法B、分子雜交法C、藍白斑法D、免疫印跡法E、插入失活法56.用Sanger雙脫氧法進行DNA測序時，凝膠上讀出的序列是A、模板鏈的互補鏈B、mRNA的C、cDNA的D、模板鏈的57.常用的_________使抗生素失活，解除抗生素對轉化細胞在轉錄和翻譯過程中的抑制作用，使轉化細胞得以繼續生長。58.原生質體就是去處了細胞壁的細胞。59.質粒作為載體使用時必須具備如下條件A、拷貝數較高B、分子量較小C、具有選擇標記D、具有較多的限制性酶切位點E、具有復制起始點60._________是由磷脂組成的膜狀結構，用它包裝外源DNA分子，然后與植物原生質體共保溫。61.II型限制性核酸內切酶的切割位點是A、識別序列1000bp以外B、識別位點下游24－26bp處C、DNA分子任一位點D、識別序列內62.下列具有生物活性的外源蛋白是A、包涵體型蛋白B、分泌型蛋白C、融合蛋白D、復合蛋白63.試述理想質粒載體的構建原理？64.試述影響連接反應的因素？65.基因工程的三大基本元件是供體基因、受體細胞、_____________。66._________---阿爾茨海默病神經系統疾病模型。67.在序列5'-CGAACATATGGAGT-3'含有一個6bp的Ⅱ類限制性內切核酸酶的識別序列，該位點的序列可能是什么？68.Southern雜交的流程中，（）能否去掉非特異性雜交帶來的很高的背景A、轉膜B、預雜交C、洗膜D、電泳69.HIV為逆轉錄病毒。70.常規PCR反應的循環次數一般為多少個周期A、40B、20C、30D、5071.單個細胞中所含有的質粒DNA分子數目即為質粒的_________。72.cDNA克隆較之基因組克隆最重要的優越性就是它們含有一個基因的完整序列。73.利用反義RNA、核酶等反義技術及RNA干擾技術等能特異地封閉基因表達的特性，抑制一些有害基因的表達，以達到治療疾病的目的。這是基因治療策略中的哪一項A、基因修正B、基因增補C、基因激活D、基因失活74.常用的連接外源性DNA和載體DNA的酶是：A、DNA聚合酶B、T4DNA連接酶C、T4RNA連接酶D、RNA聚合酶75.真核生物基因組上有些DNA序列能將基因及基因簇隔開，阻止鄰近基因之間的相互作用，這些功能序列被稱為_________。76.用人工合成的含有所需堿基變化的寡聚核苷酸，可以將特殊突變引入克隆的基因。77.通常可在三種溫度下保存DNA：4～5℃、-20℃、-70℃，其中以_________最好。78.核酸序列測定技術的發展經歷了哪幾個重要階段？79.外源DNA離開染色體是不能復制的，將外源DNA與____________連接，構建成重組DNA分子，外源DNA則可被復制。80.分離總DNA比分離總RNA困難的原因是無處不在的耐高溫的DNA酶的存在。81.試述基因敲除技術的原理？82.用Sanger雙脫氧鏈終止法進行DNA測序時，必須具有幾個反應系統A、5個B、2個C、3個D、4個83.第一個被分離的Ⅱ類限制性核酸內切酶是：A、EcoKB、HindⅢC、HindⅡD、EcoB84.以RNA為模板，用反轉錄酶可同時產生單鏈和雙鏈的cDNA，雙鏈DNA是由自身引物引導合成，但這種自身引物引導的合成效率遠低于外加寡核苷酸引物引導的