湖北生物科技職業學院課 時 教 案講授人 張薇 課 時 學時 序 號課題內容

實訓一花粉生活力的測定

教學時間設計思路

先講后做，了解花粉生活力貯藏及生活力的測定方法和原理。學問目標：把握花粉生活力測定的意義和測定方法教學目標 力量目標：會進展花粉生活力的測定素養目標：培育學生的團隊精神和動手力量教學重、難點及解決方法

教學重點：花粉生活力測定的原理和意義。解決方法：通過多媒體結合案例講解后學生動手操作，教師指導。教學方法及手段 演示、學做多媒體課件、植物花粉、載玻片、蓋玻片、解剖針、毛筆、枯燥器、TTC教學預備講解花粉生活力測定的原理和方法教學過程及內容實際操作蔗糖瓊脂培育法和染色法教學過程 教師活動 學生活動 教案設計說明 時間安排教學內容

講解實訓原理演示實訓過程，布置實訓任務

觀看多媒體

結合實訓過程講解

20min教學內容 指導實訓 蔗糖瓊脂培育法 學生練習思考 90min教學內容 指導實訓 染色法 學生練習思考 45min記錄實訓結果完成記錄實訓結果完成教學內容檢查實訓內容的把握25min實訓報告教學反思湖北生物科技職業學院教案附頁一、花粉生活力測定的意義在園藝植物有性雜交工作中，常因雜交親本間花期不遇，或父本植株栽在異處(地)而必需預先收集花粉。花粉貯藏在低溫(0～4℃)、枯燥(相對濕度0～40％)、黑暗的環境下，粉不能用于雜交，這對取得雜交效果有直接影響。二、實訓材料及儀器藥品園藝植物的雄花、載玻片、蓋玻片、解剖針、毛筆、枯燥器、TTC三、花粉生活力的測定方法是將待測花粉直接授粉，然后統計結實率和結子數。此法的缺點是需時間較長，且試驗結果易受氣候條件的影響；是將待測粉受到柱頭上，隔肯定時間切下柱頭，在顯微鏡下檢查花粉的萌發狀況，依據萌發率的凹凸來鑒定花粉的生命力；1％)25％左右，蘋果和梨10～15％，桃10％左右為宜。蔗糖濃度凹凸可調整培育基的滲透壓，以防止花粉在培育基上裂開。培育基以微酸性為宜，一般在pH5.2～6之間。發芽溫度在20～25℃左B1。麻煩，要有肯定設備和肯定時間。以促進過氧化物(如HO)放氧分解。這些剛被放出的活性氧很簡潔使復原劑氧化。在本試驗中所用的無色聯苯胺-萘酚都是復原劑，但他們被氧化后卻都表現紅色或玫瑰紅色。假設反映遲遲不能進展，花粉也就保持原色。此色優點是比較快捷，但比較間接。比較粗略，有時不能真實反映出有發芽力花粉的數量。四、實訓步驟蔗糖瓊脂培育法培育基的配制：在100ml的蒸餾水中，參加瓊脂1g、蔗糖10～25g(因植物花粉種類而異)，置于燒杯中加熱煮沸，然后將該燒杯置水浴鍋或盛熱水的杯中備用，以防培育基冷卻凝固，適于羽衣甘藍花粉萌發的蔗糖濃度為150g/L，硼對促進羽衣甘藍花粉萌發的20mg/L。發芽床的設置和播撒花粉：在蓋玻片上滴一滴培育基，用棉耳棒蘸上花粉少許，鏡下檢查花粉是否分布均勻，再將載玻片置入用濕紗布或濕濾紙墊底以保濕的大培育皿中，蓋上皿蓋。在各載玻片上貼上標簽，注明花粉種類、采集時間、蔗糖濃度、播粉時間和操作25～28℃的溫箱中。播花粉后的檢查：在播花粉后，依據不同植物，經不同時間，在顯微鏡下檢查花粉發芽狀況。3～4h后檢查，每次檢查3-5個視野，統計花粉總粒數和發芽粒數填寫下表。〔花粉發芽以其花粉管伸長超過花粉直徑為標準〕本試驗65100粒花粉，統計每種測定方法中具有生活力花粉的百分率，將觀看結果記入下表。蔗糖濃度 視野1視野2視野3視野4視野5花粉粒花粉粒花粉粒花粉粒花粉粒萌發數萌發數萌發數萌發數萌發數萌發率萌發率萌發率萌發率萌發率花粉粒花粉粒花粉粒花粉粒花粉粒萌發數萌發數萌發數萌發數萌發數萌發率萌發率萌發率萌發率萌發率發芽數發芽數發芽數發芽數發芽數萌發數萌發數萌發數萌發數萌發數萌發率萌發率萌發率萌發率萌發率發芽數發芽數發芽數發芽數發芽數萌發數萌發數萌發數萌發數萌發數萌發率萌發率萌發率萌發率萌發率染色法TTC①原理：凡具有生活力的花粉，在其呼吸作用過程中都有氧化復原反響，TTC滲入有生活力的花粉時，花粉中TTCTTC變成三苯基甲(TTF)而呈紅色。②試液的配制Ⅰ.100ml0.832g的Na2HPO4·2H2O和0.273gKH2PO4pH7.17。放入棕色滴瓶內，置于暗處。TTC為有毒性物質，操作時應留意安全。1～2滴的配制液，用鑷子使其混合后，蓋上蓋玻片。將此載玻片置于人工氣候箱中(35～40℃)約(100倍)下觀看，凡具有生活力的花粉粒呈紅色，其次呈淡紅色，失去生活力的和不育的花粉粒表現無色。過氧化物酶測定法①原理：具有生活力的花粉含有活潑的過氧化物酶，它能使過氧化物放出花粉有無生活力。②試液的配制50％酒精溶液中。Ⅱ.0.15100ml50％酒精溶液中。Ⅲ.0.25g100ml的蒸餾水中。以上三種溶液分別放入棕色瓶中備用，使用時將這三種溶液等量配成試劑A，放入棕色滴瓶中備用。0.3％H2O2B，裝入棕色滴瓶中備用。AB各一滴，3-5min后置于顯微鏡下觀看。被染色后呈紅色的花粉粒，則表示有過氧化物酶存在，花粉有生活力；能發芽，如呈黃色或無色，則表示無生活力。635100粒花粉，統計每種測定方法中具有生活力花粉的百分率，將觀看結果記入下表。玻片 視野1視野2視野3視野4視野5花粉粒花粉粒花粉粒花粉粒花粉粒發芽數發芽數發芽數發芽數發芽數發芽率發芽率發芽率發芽率發芽率花粉粒花粉粒花粉粒花粉粒花粉粒五、實訓作業五、實訓作業1．分別計算出蔗糖瓊脂培育法和染色法所測