醫(yī)學(xué)微生物學(xué)

微生物:存在于自然界的一大群體形微小、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、肉眼直接看不見(jiàn)，必須借助光學(xué)顯微鏡或電子顯微鏡放大數(shù)百倍、數(shù)

千倍。甚至數(shù)萬(wàn)倍才能觀(guān)察到的微小生物。

1.微生物的分類(lèi):

種類(lèi)細(xì)胞結(jié)構(gòu)核酸特點(diǎn)代表

非細(xì)胞型微物無(wú)典型細(xì)胞結(jié)構(gòu)DNA或RNA,無(wú)產(chǎn)生能量的酶系統(tǒng),只能在活病毒

構(gòu)兩者不同時(shí)存細(xì)胞內(nèi)生長(zhǎng)增值

在

原核細(xì)胞型微生物無(wú)核膜、核仁，僅DNA和RNA古生菌、細(xì)菌（細(xì)菌、支原體、

有核糖體衣原體、立克次體、螺旋體和

放線(xiàn)菌）

真核細(xì)胞型微生物細(xì)胞核分化程度DNA和RNA真菌

很高，有核膜核

仁，細(xì)胞器完整

3、病原微生物:少數(shù)具有致病性，能引起人類(lèi)、植物病害的微生物。

機(jī)會(huì)致病性微生物:在正常情況下不致病，只有在特定情況下導(dǎo)致疾病的微生物。

4,郭霍法則:①特殊的病原菌應(yīng)在同一種疾病中查見(jiàn)，在健康人中不存在；②該特殊病原菌能被分離培養(yǎng)得純種；③該純

培養(yǎng)物接種至易感動(dòng)物,能產(chǎn)生同樣病癥；④自人工感染的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體內(nèi)能重新分離得到該病原菌純培養(yǎng)。

郭霍法則的特殊麗

5、免疫學(xué)：㈠主動(dòng)免疫；㈡被動(dòng)免疫。

第一篇細(xì)菌學(xué)

第一章細(xì)菌的形態(tài)與結(jié)構(gòu)

第一節(jié)細(xì)菌的大小與形態(tài)

1、觀(guān)察細(xì)菌常采用光學(xué)顯微鏡，一般以微米為單位。

2、按細(xì)菌外形可分為：

①球菌（雙球菌、鏈球菌、葡萄球菌、四聯(lián)球菌、八疊球菌）

②桿菌（鏈桿菌、棒狀桿菌、球桿菌、分枝桿菌、雙歧桿菌）

③螺形菌（弧菌、螺菌、螺桿菌）

第二節(jié)細(xì)菌的結(jié)構(gòu)

1、基本結(jié)構(gòu)：細(xì)胞壁、細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)、核質(zhì)

特殊結(jié)構(gòu)：莢膜、鞭毛、菌毛、芽胞

2、革蘭陽(yáng)性菌（G+）：顯紫色；革蘭陰性菌（G-）：顯紅色。

3、

細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)革蘭陽(yáng)性菌G+革蘭陰性菌G-

由聚糖骨架、四肽側(cè)鏈、五肽交由聚糖骨架、四肽側(cè)鏈構(gòu)成疏

肽聚糖組成

聯(lián)橋構(gòu)成堅(jiān)韌三維立體結(jié)構(gòu)松二維平面網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)

肽聚糖厚度20?80nm10?15nm

肽聚糖層數(shù)可達(dá)50層僅1?2層

肽聚糖含量占胞壁干重50-80%僅占胞壁干重5-20%

磷壁酸有無(wú)

外膜無(wú)有

4、G-菌的外膜｛脂蛋白、脂多糖（LPS）-【脂質(zhì)A,核心多糖，特異多糖】、脂質(zhì)雙層、｝

脂多糖（LPS）：即G-菌的內(nèi)毒素。LPS是G-菌的重要致病物質(zhì)，使白細(xì)胞增多，直至休克死亡；另一方面，LPS也可增強(qiáng)

機(jī)體非特異性抵抗力，并有抗腫瘤等有益作用。

①脂質(zhì)A：內(nèi)毒素的毒性和生物學(xué)活性的主要成分，無(wú)種屬特異性，不同細(xì)菌的脂質(zhì)A骨架基本一致，故不同細(xì)菌產(chǎn)生的內(nèi)

毒素的毒性作用均相似。

②核心多糖：有屬特異性，位于脂質(zhì)A的外層。

③特意多糖：即G-菌的菌體抗原（0抗原），是脂多糖的最外層。

5、細(xì)胞壁的功能：維持菌體固有的形態(tài),并保護(hù)細(xì)菌抵抗低滲環(huán)境。

G-菌的外膜是一種有效的屏障結(jié)構(gòu)，使細(xì)菌不易受到機(jī)體的體液殺菌物質(zhì)、腸道的膽鹽及消化酶等的作用。

6、細(xì)菌細(xì)胞壁缺陷型（細(xì)菌L型：細(xì)菌細(xì)胞壁的肽聚糖結(jié)構(gòu)受到理化或生物因素的直接破壞或合成被抑制，這種細(xì)菌壁受

損的細(xì)菌在高滲環(huán)境下仍可存活者稱(chēng)為細(xì)菌細(xì)胞壁缺陷型。

原生質(zhì)體：G+菌細(xì)胞壁缺失后，原生質(zhì)層僅被一層細(xì)胞膜包住

原生質(zhì)球：G-菌肽聚糖層受損后尚有外膜保護(hù)

■細(xì)菌L型的誘發(fā)因素,如：溶菌酶，青霉素，溶葡萄球菌素，膽汁，抗體，補(bǔ)體等。

溶菌酶：能裂解肽聚糖中N-乙酰葡萄胺和N-乙酰胞壁酸之間的B-1,4糖背鍵，破壞聚糖骨架，引起細(xì)菌裂解。

青霉素：能與細(xì)菌競(jìng)爭(zhēng)合成肽聚糖過(guò)程中所需的轉(zhuǎn)肽酶，抑制四肽側(cè)鏈上D-丙氨酸與五肽橋間的聯(lián)結(jié)，使細(xì)菌不能合成完

整的肽聚糖，在一般滲透壓環(huán)境中科導(dǎo)致細(xì)菌死亡。

■細(xì)菌L型需在高滲低瓊脂含血清的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)。

G+菌細(xì)胞壁缺損形成的原生體，在普通培養(yǎng)基中很容易脹裂死亡,必須保存在高滲環(huán)境中。

7、細(xì)胞膜：

細(xì)胞膜的主要功能：①物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)；②呼吸和分泌；③生物合成；④參與細(xì)菌分裂：細(xì)菌部分細(xì)胞膜內(nèi)陷、折疊、卷曲形成的

囊狀物，稱(chēng)為中介體。

8、細(xì)胞質(zhì)：

①核糖體：鏈霉素（與細(xì)菌核糖體的30s亞基結(jié)合）和紅霉素（與細(xì)菌核糖體的50s亞基結(jié)合）均能干擾其蛋白質(zhì)合成，從

而殺死細(xì)菌，但對(duì)人體核糖體無(wú)害。

②質(zhì)粒：染色體外的遺傳物質(zhì)，為閉合環(huán)狀的雙鏈DNA

③胞制顆粒：貯臧有營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。異染顆粒（也成遷回體，嗜堿性強(qiáng)，用甲基藍(lán)染色時(shí)著色較深呈紫色）常見(jiàn)于白喉棒狀桿菌。

9、核質(zhì)：細(xì)菌的遺傳物質(zhì)。

10、|細(xì)菌的特殊結(jié)構(gòu)

⑴莢膜：包繞在細(xì)胞壁外的一層粘液性物質(zhì)，為多糖或蛋白質(zhì)的多聚體，用理化方法去除后并不影響菌細(xì)胞的生命活動(dòng)。

①厚度M0.2微米邊界明顯的稱(chēng)為莢膜或大莢膜；厚度＜0、2微米的為微莢膜。

②若粘液物質(zhì)疏松地附著于菌細(xì)胞表面，邊界不明顯且易被洗脫者成為粘液層。

③大多數(shù)細(xì)菌的莢膜為多糖，多糖分子組成和構(gòu)型的多樣化使其結(jié)構(gòu)極為復(fù)雜，成為血清學(xué)分型的基礎(chǔ)。

④莢膜對(duì)一般堿性染料親和力低，不易著色。

■莢膜的功能：①抗吞噬作用:②粘附作用：③抗有害物質(zhì)的損傷作用。

⑵鞭毛：包括：?jiǎn)蚊㈦p毛菌、叢毛菌、周毛菌

鞭毛由基礎(chǔ)小體、鉤狀體、絲狀體三部分組成。

■鞭毛的功能：使細(xì)菌能在液體中自由游動(dòng)，速度迅速。細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)有化學(xué)趨向性，常向營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)處前進(jìn)，而逃離有害物質(zhì)。

有些細(xì)菌的鞭毛與致病性有關(guān)。

⑶菌毛：必須用電子顯微鏡觀(guān)察

①普通菌毛：與細(xì)菌粘附有關(guān)。

②性菌毛：僅見(jiàn)于少數(shù)G-菌。具有傳遞遺傳物質(zhì)作用。

⑷芽胞：細(xì)菌的休眠形式，營(yíng)養(yǎng)缺乏尤其是C、N、P元素不足時(shí)，細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖減速，啟動(dòng)芽胞形成的基因。

■細(xì)菌的芽胞由內(nèi)向外依次是：核心、內(nèi)膜、芽胞壁、皮質(zhì)、外膜、芽胞殼和押寶外衣。

■芽胞的形成與發(fā)芽：芽胞具有完整的核質(zhì)、酶系統(tǒng)和合成菌體組分的結(jié)構(gòu)，能保存細(xì)菌的全部生命必須物質(zhì)，芽胞形成后

細(xì)菌即失去繁殖能力。一個(gè)細(xì)菌只形成一個(gè)芽胞，一個(gè)芽胞也只能生成一個(gè)菌體。

■芽胞的功能：細(xì)菌的芽胞對(duì)熱力、干燥、輻射、化學(xué)消毒劑等理化因素均有強(qiáng)大的抵抗力。此外，當(dāng)芽胞成為繁殖體后，

能迅速大量繁殖而致病。

第二章細(xì)菌的生理

第一節(jié)細(xì)菌的理化性質(zhì)

1、細(xì)菌的化學(xué)組成：水、無(wú)機(jī)鹽、蛋白質(zhì)、糖類(lèi)、脂肪、核酸

2、細(xì)菌的物理性狀：①光學(xué)性質(zhì)；②表面積；細(xì)菌的相對(duì)表面積大，有利于同外界進(jìn)行物質(zhì)交換；③帶電現(xiàn)象；④半透性:

細(xì)菌的細(xì)胞膜和細(xì)胞壁都有半透性，有利于吸收營(yíng)養(yǎng)和排除代謝產(chǎn)物；⑤滲透壓：細(xì)菌所處一般環(huán)境相對(duì)低滲。

第二節(jié)細(xì)菌的營(yíng)養(yǎng)和生長(zhǎng)繁殖

一、細(xì)菌的營(yíng)養(yǎng)類(lèi)型

1、自養(yǎng)菌：化能自養(yǎng)菌、光能自養(yǎng)菌

2、異養(yǎng)菌：腐生菌、寄生菌

所有的病原菌都是異養(yǎng)菌，大部分屬寄生菌。

二、細(xì)菌的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)

1、水

2、碳源

3、氮源：作為菌體成分的原料

4、無(wú)機(jī)鹽：常用元素（P、S、K、Na、Mg、Ga、Fe）微量元素（Zn、Cu、Mn、鉆）

各類(lèi)無(wú)機(jī)鹽的公用：①構(gòu)成有機(jī)化合物，成為菌體的成分；②作為酶的組成成分，維持酶的活性；③參與能量的儲(chǔ)存和

轉(zhuǎn)運(yùn)；④調(diào)節(jié)菌體內(nèi)外滲透壓；⑤某些元素與細(xì)菌的生長(zhǎng)繁殖和致病作用密切相關(guān)。

5、生長(zhǎng)因子：生長(zhǎng)因子是指，某些細(xì)菌細(xì)菌生長(zhǎng)所必須的但自身又不能合成，必須由外界供給的物質(zhì)。

三、細(xì)菌攝取營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的機(jī)制

1、被動(dòng)擴(kuò)散：

2、主動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)：①依賴(lài)于周漿間隙結(jié)合蛋白的轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)；

②化學(xué)滲透趨勢(shì)轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)；

③基團(tuán)轉(zhuǎn)移。

四、影響細(xì)菌生長(zhǎng)的環(huán)境因素（簡(jiǎn)答）

1、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：水、碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽及生長(zhǎng)因子為細(xì)菌的代謝及生長(zhǎng)繁殖提供必需的原料和充足的能量

2、酸堿度（pH）：多數(shù)病原菌最適pH為72-7.6,而結(jié)核桿菌最適pH值為6.5-68,霍亂弧菌最適pH值為84-9.2。

3、溫度：病原菌最適溫度為37度。

4、氣體：

。2:根據(jù)細(xì)菌代謝時(shí)對(duì)氧氣的需要與否分四類(lèi)：

①專(zhuān)性需氧菌:具有完善的呼吸酶系統(tǒng)，需要分子氧作為受氫體以完成需氧呼吸，僅能在有氧環(huán)境下生長(zhǎng)。

②微需氧菌:在低氧壓（5%-6%）生長(zhǎng)最好。

③兼性厭氧菌:兼有有氧呼吸和無(wú)氧發(fā)酵兩種功能，在有氧、無(wú)氧環(huán)境中均能生長(zhǎng)，但以有氧時(shí)生長(zhǎng)較好。大多數(shù)病原菌

屬于此。

⑥專(zhuān)性厭氧菌:缺乏完善的呼吸酶系統(tǒng)，只能進(jìn)行無(wú)氧發(fā)酵，必須在無(wú)氧環(huán)境中生長(zhǎng)。

C02：對(duì)細(xì)菌生長(zhǎng)也很重要，大部分細(xì)菌在代謝中產(chǎn)生的C02可滿(mǎn)足需要，個(gè)別細(xì)菌初次分離時(shí)需人工供給5-10%CO2。

5、滲透壓：

五、細(xì)菌的生長(zhǎng)繁殖

1、細(xì)菌個(gè)體的生長(zhǎng)繁殖：

繁殖方式--細(xì)菌以簡(jiǎn)單的二分裂方式進(jìn)行無(wú)性繁殖。

繁殖速度--繁殖一代所需時(shí)間（代時(shí)）約20-30min。但少數(shù)細(xì)菌代時(shí)較長(zhǎng)，如結(jié)核分枝桿菌代時(shí)為18小時(shí)。

2、細(xì)菌群體的生長(zhǎng)繁殖：遲緩期、對(duì)數(shù)期、穩(wěn)定期、衰退期

遲緩期：細(xì)菌被接種培養(yǎng)基的最初一段時(shí)間，主要是適應(yīng)新環(huán)境，同時(shí)為分裂繁殖作物質(zhì)準(zhǔn)備，此時(shí)細(xì)菌體積比較大，含有

豐富的酶和中間代謝產(chǎn)物。

對(duì)數(shù)期：細(xì)菌分裂繁殖最快的時(shí)期，菌數(shù)以幾何級(jí)數(shù)增長(zhǎng)，研究細(xì)菌的最佳時(shí)期。

穩(wěn)定期：由于營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消耗，代謝產(chǎn)物的堆積，繁殖數(shù)與死亡數(shù)幾乎相等。活菌數(shù)保持穩(wěn)定。一些細(xì)菌的芽胞、外毒素和

抗生素等代謝產(chǎn)物大多在穩(wěn)定期產(chǎn)生。

衰退期：繁殖變慢，死菌數(shù)超過(guò)活菌數(shù)。細(xì)菌形態(tài)發(fā)生改變，生理活動(dòng)趨于停滯。

第三節(jié)細(xì)菌的新陳代謝和能量轉(zhuǎn)換

一、細(xì)菌的能量代謝

■細(xì)菌能量代謝活動(dòng)中主要涉及ATP形式的化學(xué)能。細(xì)菌的有機(jī)物分解或無(wú)機(jī)物氧化過(guò)程中釋放的能量通過(guò)底物的磷酸化或

氧化磷酸化合成ATPo

■生物體能量代謝的基本生化反應(yīng)是生物氧化，其方式包括：加氧、脫氫和托電子反應(yīng)，細(xì)菌則以脫氫或氫的傳遞更為常見(jiàn)。

■發(fā)酵：以有機(jī)物為受氫體的生物氧化。呼吸：以無(wú)機(jī)物為受氫體的生物氧化。以分子氧為受氫體的是有氧呼吸，以其他無(wú)

機(jī)物為受氫體的是厭氧呼吸。

■病原菌合成細(xì)胞組分和獲得能量的基質(zhì)主要為糖類(lèi)，通過(guò)糖的氧化或酵解釋放能量，并以高能磷酸鍵的形式（ATP/ADP）

儲(chǔ)存能量。

1、EMP途徑，又稱(chēng)糖酵解。大多數(shù)細(xì)菌共有的基本代謝途徑，有些專(zhuān)性厭氧菌產(chǎn)能的唯一途徑。

2、磷酸戊糖途徑，又稱(chēng)一磷酸己糖途徑。為生物合成提供前提和還原能。

3、需氧呼吸，需氧菌和兼性厭氧菌進(jìn)行需氧反應(yīng)。

4、厭氧呼吸，專(zhuān)性厭氧菌和兼性厭氧菌都能進(jìn)行厭氧呼吸。

二、細(xì)菌的代謝產(chǎn)物

㈠分解代謝產(chǎn)物和細(xì)菌的生化反應(yīng)

㈡合成代謝產(chǎn)物及其醫(yī)學(xué)上的意義

1、熱原質(zhì)（致熱源）：是細(xì)菌合成的一種注入人體或動(dòng)物體內(nèi)能引起發(fā)熱反應(yīng)的物質(zhì)。產(chǎn)生熱致源的細(xì)菌大都為格蘭陰性菌,

熱致源即其細(xì)胞壁的脂多糖。

2、毒素及侵襲性酶：①外毒素：多數(shù)G+菌和少數(shù)G-菌在生長(zhǎng)繁殖過(guò)程中釋放菌體外的蛋白質(zhì)：

②內(nèi)毒素：G-菌細(xì)胞壁的脂多糖；外毒素毒性強(qiáng)丁?內(nèi)毒素。

③侵襲性酶：某些細(xì)菌產(chǎn)生的，能損傷機(jī)體組織，促使菌體的侵襲和擴(kuò)散，是細(xì)菌重要的致病物質(zhì)。

3、色素：①水溶性；②脂溶性。

4、抗生素：某些微生物代謝過(guò)程中產(chǎn)生的一類(lèi)能抑制或殺死某些其他微生物或腫瘤細(xì)胞的物質(zhì)。抗生素大多由放線(xiàn)菌和真

菌產(chǎn)生。

5、細(xì)菌素：某些菌株產(chǎn)生的?類(lèi)具有抗菌作用的蛋白質(zhì)。細(xì)菌素僅對(duì)與產(chǎn)生菌有親緣關(guān)系的細(xì)菌有殺傷作用。

6、維生素:

第四節(jié)細(xì)菌的人工培養(yǎng)

一、培養(yǎng)基

1、基礎(chǔ)培養(yǎng)基

2、增菌培養(yǎng)基

3、選擇培養(yǎng)基

4、鑒別培養(yǎng)基

5、厭氧培養(yǎng)基

二、細(xì)菌在培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)情況

㈠液體培養(yǎng)基

㈡固體培養(yǎng)基

菌落：?jiǎn)蝹€(gè)細(xì)菌分裂繁殖成肉眼可見(jiàn)的細(xì)菌基團(tuán)。

1、光滑型菌落

2、粗糙型菌落

3、粘液型菌落

㈢半固體培養(yǎng)基

三、人工培養(yǎng)細(xì)菌的用途

1、醫(yī)學(xué)：①感染性疾病的病原學(xué)診斷

②細(xì)菌學(xué)的研究

③生物制品的制備

2、工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)

3、基因工程

第三章消毒滅菌與病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全

第一節(jié)消毒滅菌的常用術(shù)語(yǔ)

1、滅菌：殺滅生物體上所有微生物的方法。

2、消毒：殺死物體上或環(huán)境中的病原微生物，并不一定能殺死細(xì)菌芽胞或非病原微生物的方法。

3、防腐：防止或抑制皮膚表面細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖的方法。

4、無(wú)菌：無(wú)菌即不存在活菌,多是滅菌的結(jié)果。無(wú)菌操作：防止細(xì)菌進(jìn)入人體或其他物品的操作技術(shù)。

5、清潔：減少微生物數(shù)量的過(guò)程。

第二節(jié)消毒滅菌的方法

?、物理消毒滅菌法：熱力、輻射、濾過(guò)、干燥和低溫等。

㈠熱力滅菌法：分為干熱滅菌和濕熱滅菌

1、干熱滅菌法：一般細(xì)菌繁殖體在干燥狀態(tài)下，80-100C經(jīng)1小時(shí)可被殺死，芽胞則需要更高溫度才能被殺死。

①焚燒：廢棄物、尸體

②灼燒：接種環(huán)、試管口

③干烤：(160~170℃,2h)利用干烤箱滅菌，一般加熱至171℃經(jīng)lh或160℃2h或121℃16h。適用于高溫下不變質(zhì)、不

損害、不蒸發(fā)的器皿(如：玻璃器皿)。

④紅外線(xiàn)(0.7~1000um波長(zhǎng)的電磁波)：醫(yī)療器械

2、濕熱滅菌法：最常用，在相同溫度下濕熱滅菌法比干熱滅菌法效果更好，因?yàn)椋篿濕熱中細(xì)菌菌體蛋白較易凝固變性；

ii濕熱的穿透力比干熱大；iii濕熱的蒸汽有潛熱效應(yīng)存在。

①巴氏消毒法：用較低的溫度殺滅液體中的病原菌或特定微生物，以保持物品中所需的不耐熱成分不被破壞的消毒方法

(61.1-62.8℃30min或71.7℃15-30s,主要用于牛乳消毒和酒類(lèi)7

②煮沸法(100℃,5min)食具、注射器等消毒

③流動(dòng)蒸汽消毒法(100℃15-30min)

④間歇蒸汽滅菌法(100℃5-30min,37℃24hX3天)

⑤高壓蒸汽滅菌法：

*壓力-103.4KPa(1.05Kg/cm2)

*溫度-121.3℃

*時(shí)間-15-20min

*效果一殺滅包括芽泡在內(nèi)所有微生物

*應(yīng)用一所有耐高溫、高壓、耐濕的物品

㈡輻射殺菌法：

①紫外線(xiàn)：波長(zhǎng)240—300nm的紫外線(xiàn)具有殺菌作用，其中以265—266nm最強(qiáng)。紫外線(xiàn)殺菌機(jī)理是干擾細(xì)菌DNA合成，導(dǎo)

致細(xì)菌變異和死亡。手術(shù)室空氣消毒常采用紫外線(xiàn)消毒

②電離輻射：高速電子、X射線(xiàn)、Y射線(xiàn)

③微波：波長(zhǎng)為1—1000mm的電磁波，不能穿透金屬表面。微波主要靠熱效應(yīng)發(fā)揮作用，且必須在有一定含水量條件下才

能顯示出來(lái)。

㈢濾過(guò)殺菌法

㈣干燥殺菌法

㈤低溫殺菌法

二、化學(xué)消毒滅菌法

原理(填空)：⑴破壞菌體蛋白；⑵干擾細(xì)菌的酶系統(tǒng)和代謝；⑶改變細(xì)胞膜的通透性。

第四節(jié)影響消毒滅菌效果的因素

㈠微生物的種類(lèi)

微生物對(duì)消毒滅菌的敏感性高低排序大致如下：真菌、細(xì)菌繁殖體、有包膜病毒、無(wú)包膜病毒、分枝桿菌、細(xì)菌芽胞。

㈡微生物的物理狀態(tài)

㈢微生物的數(shù)量

㈣消毒劑的性質(zhì)、濃度及作用時(shí)間

㈤溫度：消毒劑的殺菌作用速度隨溫宿升高而加快。

因酸堿度

(七)有機(jī)物

第五節(jié)病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全

一、病原微生物的分類(lèi)

第一類(lèi)：能夠引起人類(lèi)或動(dòng)物非常嚴(yán)重疾病的微生物，以及我國(guó)尚未發(fā)現(xiàn)或已經(jīng)宣布消滅的微生物。

第二類(lèi)：能夠引起人類(lèi)或動(dòng)物嚴(yán)重疾病，比較容易直接或間接在人與人、動(dòng)物與動(dòng)物、動(dòng)物與人間傳播的微生物。

第三類(lèi)：能夠引起人類(lèi)或動(dòng)物疾病，但一般情況下對(duì)人、動(dòng)物或環(huán)境不構(gòu)成嚴(yán)重危害，傳播風(fēng)險(xiǎn)有限，實(shí)驗(yàn)室感染后很少引

起嚴(yán)重疾病并且具備有效治療和預(yù)防措施的微生物。

第四類(lèi)：通常情況下不會(huì)引起人類(lèi)或動(dòng)物疾病的微生物。

二、病原微生物實(shí)驗(yàn)室的分級(jí)：根據(jù)生物安全防護(hù)水平（BSL）及實(shí)驗(yàn)室生物安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

一級(jí)：

二級(jí)：

三級(jí)：對(duì)人體、植物、動(dòng)物或環(huán)境具有高度危險(xiǎn)性，主要通過(guò)氣溶膠使人類(lèi)傳染上嚴(yán)重的甚至是致命的疾病，或?qū)?dòng)物植物

或環(huán)境具有高度危險(xiǎn)的致病因子。通常有預(yù)防治療措施。

四級(jí)：對(duì)人體、植物、動(dòng)物或環(huán)境具有高度危險(xiǎn)性，主要通過(guò)氣溶膠途徑傳播或傳播途徑不明或未知的危險(xiǎn)的致病因子。沒(méi)

有預(yù)防治療措施。

第四章噬菌體

■噬菌體是感染細(xì)菌、真菌、放線(xiàn)菌或螺旋體等微生物的病毒；

■具有病毒的基本特性：個(gè)體微小，可以通過(guò)細(xì)菌濾器；

■無(wú)細(xì)胞結(jié)構(gòu)，主要由衣殼（蛋白質(zhì)）和核酸組成；

■只能在活的微生物細(xì)胞內(nèi)復(fù)制增殖，是一種專(zhuān)性胞內(nèi)寄生的微生物。

■噬菌體分布極廣。

第一節(jié)噬菌體的生物學(xué)性狀

1、形態(tài)與結(jié)構(gòu)：

噬菌體很小，在光鏡下看不見(jiàn)，需用電鏡觀(guān)察。不同的噬菌體在電鏡下有三種形態(tài)：蝌蚪形、微球形和絲形。大多數(shù)噬菌體

呈蝌蚪形，由頭部和尾部?jī)刹糠纸M成。

2、結(jié)構(gòu)及化學(xué)組成：

核心：核酸（DN3RNA）,多位DNA線(xiàn)狀雙鏈

蛋白衣殼：蛋白質(zhì)呈20面體

噬菌體

尾部：蛋白質(zhì)與細(xì)菌（受體）接觸的部位

3、抗原性：噬菌體具有抗原性，能刺激機(jī)體產(chǎn)生特異性抗體。

4、抵抗力：噬菌體對(duì)理化因素及多數(shù)化學(xué)消毒劑的抵抗力比一般細(xì)菌的繁殖體強(qiáng)，75℃30min滅活。噬菌體能耐受低溫和

冰凍，但對(duì)紫外線(xiàn)利X射線(xiàn)敏感。

第二節(jié)毒性噬菌體

1、噬菌體感染細(xì)菌有兩種結(jié)果：

①毒性噬菌體（virulentphage）：能在宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制增殖，產(chǎn)生許多子代噬菌體，并最終裂解細(xì)菌，建立溶菌周期。

②溫和噬菌體(temperatephage)：噬菌體基因與宿主染色體整合，成為前噬菌體，細(xì)菌變成溶原性菌，不產(chǎn)生子代噬菌體,

但噬菌體DNA能隨細(xì)菌DNA復(fù)制，并隨細(xì)菌的分裂而傳代，建立溶原狀態(tài)。

2、毒性噬菌體

■毒性噬菌體在宿主菌內(nèi)以復(fù)制方式進(jìn)行增殖，增殖過(guò)程包括：吸附、穿入、生物合成、成熟和釋放。

液體培養(yǎng)基——噬菌現(xiàn)象可使渾濁菌液變得澄清。

固體培養(yǎng)基——若用適量的噬菌體和宿主菌液混合后接種培養(yǎng)，培養(yǎng)基表面可有透亮的溶菌空斑出現(xiàn)。一個(gè)空斑系由一個(gè)噬

■菌體復(fù)制增殖并裂解細(xì)菌后形成，稱(chēng)為噬斑(plaque),不同噬菌體噬斑的形態(tài)與大小不盡相同。

■若將噬菌體按一定倍數(shù)稀釋?zhuān)ㄟ^(guò)噬斑計(jì)數(shù)，可測(cè)定一定體積內(nèi)的噬斑形成單位(plaqueformingunits,pfu)數(shù)目，即噬

菌體的數(shù)目。

第三節(jié)溫和噬菌體

■前噬菌體(prophage)溫和噬菌體的基因組能與宿主菌基因組整合，并隨細(xì)菌分裂傳至子代細(xì)菌的基因組中，不引起細(xì)菌

裂解。整合在細(xì)菌基因組中的噬菌體基因組稱(chēng)為前噬菌體(prophage)o帶有前噬菌體基因組的細(xì)菌稱(chēng)為溶原性細(xì)菌。

■溶原性轉(zhuǎn)換(lysogenicconversion)：某些前噬菌體可導(dǎo)致細(xì)菌基因型和性狀發(fā)生改變。例如白喉棒狀桿菌產(chǎn)生白喉毒素的

機(jī)理。

第五章細(xì)菌的遺傳與變異

?遺傳(hegdity)：使微生物的性狀保持相對(duì)穩(wěn)定，子代與親代生物學(xué)的性狀基本相同，且代代相傳。

?變異(variation)；在一定條件下，子代與親代之間以及子代與子代之間的生物學(xué)性狀出現(xiàn)的差異，有利于物種的進(jìn)化。

?基因型(genotype)：細(xì)菌的遺傳物質(zhì)。

?表型(phenotype)：基因表現(xiàn)出的各種性狀。

?遺傳性變異：是細(xì)菌的基因結(jié)構(gòu)發(fā)生了改變，故又稱(chēng)基因型變異。常發(fā)生于個(gè)別的細(xì)菌，不受環(huán)境因素的影響，變異發(fā)生

后是不可逆的，產(chǎn)生的新性狀可穩(wěn)定地遺傳給后代。

?非遺傳性變異：細(xì)菌在一定的環(huán)境條件影響下產(chǎn)生的變異，其基因結(jié)構(gòu)未改變，稱(chēng)為表型變異。易受到環(huán)境因素的影響，

凡在此環(huán)境因素作用下的所有細(xì)菌都出現(xiàn)變異，而且當(dāng)環(huán)境中的影響因素去除后，變異的性狀又可復(fù)原，表型變異不能遺傳。

第一節(jié)細(xì)菌的遺傳物質(zhì)

?DNA的結(jié)構(gòu)與功能：

結(jié)構(gòu)——兩條互相平行而方向相反的多核甘酸鏈

功能——儲(chǔ)存、復(fù)制和傳遞遺傳信息

復(fù)制——半保留復(fù)制

特點(diǎn)——復(fù)制中易發(fā)生錯(cuò)誤一基因突變

蛋白合成——分子生物學(xué)中心法則(DNA-RNA-蛋白質(zhì))

■基因與基因的轉(zhuǎn)錄

結(jié)構(gòu)基因——編碼結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)基因結(jié)構(gòu)

非結(jié)構(gòu)基因——編碼功能蛋白質(zhì)基因轉(zhuǎn)錄

?遺傳信息的翻譯

第二節(jié)細(xì)菌的遺傳與變異

一、染色體(chromosome)

①一條環(huán)狀雙螺旋DNA長(zhǎng)鏈，按一定構(gòu)型反復(fù)回旋形成松散的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)；

②缺乏組蛋白，無(wú)核膜包裹；

③約含有5000個(gè)基因；

二、質(zhì)粒——是細(xì)菌染色體以外的遺傳物質(zhì)，是閉合環(huán)狀的雙鏈DNA。

1、質(zhì)粒的特征：

①質(zhì)粒具有自我復(fù)制的能力。

②質(zhì)粒DNA所編碼的基因產(chǎn)物賦予細(xì)菌某些性狀特征。

③質(zhì)粒可自行丟失與消除。

④質(zhì)粒的轉(zhuǎn)移性。

⑤質(zhì)粒可分為相容性與不相容性?xún)煞N。

2、質(zhì)粒的分類(lèi)

（1）根據(jù)質(zhì)粒能否通過(guò)細(xì)菌的接合作用進(jìn)行傳遞

①接合性質(zhì)粒

②非接合性質(zhì)粒

（2）根據(jù)質(zhì)粒在細(xì)菌內(nèi)拷貝數(shù)多少

①?lài)?yán)緊型質(zhì)粒

②松弛型質(zhì)粒

（3）根據(jù)相容性

①相容性——幾種質(zhì)粒同時(shí)共存于同一菌體內(nèi)

②不相容性——不能同時(shí)共存

*可借此對(duì)質(zhì)粒進(jìn)行分組、分群。

（4）根據(jù)所編碼的生物學(xué)性狀

質(zhì)粒基因可編碼多種重要的生物學(xué)性狀：

致育質(zhì)粒（fertilityplasmid、F質(zhì)粒）編碼性菌毛，介導(dǎo)細(xì)菌之間的接合傳遞；

■耐藥性質(zhì)粒（resistanceplasmid、R質(zhì)粒）編碼細(xì)菌對(duì)抗菌藥物或重金屬鹽類(lèi)的耐藥性。分兩類(lèi)，?是接合性耐藥質(zhì)粒（R

質(zhì)粒），另一是非接合耐藥性質(zhì)粒（r康）；

?毒力質(zhì)粒（Vi質(zhì)粒）編碼與該菌致病性有關(guān)的毒力因子；

■細(xì)菌素質(zhì)粒：編碼細(xì)菌產(chǎn)生細(xì)菌素；

■代謝質(zhì)粒：編碼產(chǎn)生相關(guān)的代謝酶。

三、轉(zhuǎn)位因子

?轉(zhuǎn)位因子（transposableelement）：是一類(lèi)在細(xì)菌染色體、質(zhì)粒或噬菌體之間可自行移動(dòng)的一-段特異的具有轉(zhuǎn)位特性的核苜

酸序列片段，又稱(chēng)移動(dòng)基因。

?轉(zhuǎn)座子有二類(lèi)：

①插入序列（insertionsequence,IS）：最小，不超過(guò)2kb,只攜帶與轉(zhuǎn)座功能有關(guān)的基因。

②轉(zhuǎn)座子（transposon,Tn）：長(zhǎng)度?般超過(guò)2kb,除攜帶與轉(zhuǎn)位有關(guān)的基因外還攜帶其他基因（如耐藥性、毒素基因等）。

四、整合子

定位：細(xì)菌染色體、質(zhì)粒或轉(zhuǎn)座子上。

基本結(jié)構(gòu)：兩端為保守末端（，“〃，59-be）,中間為可變區(qū)（orfl）,含一個(gè)或多個(gè)基因盒。

功能元件：重組位點(diǎn)（attl,59-be）；整合酶基因（inti）；啟動(dòng)子（Pc）。

功能：通過(guò)轉(zhuǎn)座子或接合性質(zhì)粒，使多種耐藥基因在細(xì)菌中進(jìn)行水平傳播。

第三節(jié)基因的轉(zhuǎn)移與重組

?基因轉(zhuǎn)移（genetransfer）：外源性的遺傳物質(zhì)由供體菌進(jìn)入某受體菌細(xì)胞內(nèi)的過(guò)程。

?基因重組（re8mbination）：轉(zhuǎn)移的基因與受體菌DNA整合在一起，使受體菌獲得供體菌某些特性。

?細(xì)菌的基因轉(zhuǎn)移和重組方式：轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)、接合、溶原性轉(zhuǎn)換、原生質(zhì)體融合。

1、轉(zhuǎn)化(transformation)：受體菌直接攝取供體菌游離的DNA片段獲得新的遺傳性狀的過(guò)程稱(chēng)為轉(zhuǎn)化。

2、接合(conjugation)：是細(xì)菌通過(guò)性菌毛相互連接溝通，將遺傳物質(zhì)(主要是質(zhì)粒DNA)從供體菌轉(zhuǎn)移給受體菌。能通

過(guò)結(jié)合方式轉(zhuǎn)移的質(zhì)粒稱(chēng)為接合性質(zhì)粒，不能通過(guò)性菌毛在細(xì)菌間轉(zhuǎn)移的質(zhì)粒為非接合性質(zhì)粒。

F質(zhì)粒的接合

■F+——即F質(zhì)粒，編碼性菌毛，稱(chēng)雄性菌

■Hfr—F質(zhì)粒整合到細(xì)菌染色體上，使細(xì)菌能高效地轉(zhuǎn)移染色體上的基因，故稱(chēng)高頻重組菌

■F——Hfr菌中的F質(zhì)粒可從染色體上脫離下來(lái)，并帶染色體上幾個(gè)鄰近的基因，故稱(chēng)F

三者均有性菌毛，均可發(fā)生接合

R質(zhì)粒的接合

■細(xì)菌的耐藥性與耐藥性的基因突變及R質(zhì)粒的接合轉(zhuǎn)移等有關(guān)。

■R質(zhì)粒有耐藥傳遞因子和耐藥決定因子兩部分組成。耐藥傳遞因子的功能與F質(zhì)粒相似，可編碼性菌毛的產(chǎn)生和通過(guò)接合

轉(zhuǎn)移；R決定子能編碼對(duì)抗菌藥物的耐藥性。

3、轉(zhuǎn)導(dǎo)(transduction)：是以溫和噬菌體為載體，將供體菌的一段DNA轉(zhuǎn)移到受體菌內(nèi)，使受體菌獲得新的性狀。

■根據(jù)轉(zhuǎn)導(dǎo)基因片段的范圍，可將轉(zhuǎn)導(dǎo)分為兩類(lèi)：普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)(轉(zhuǎn)導(dǎo)的DNA可是供菌染色體上的任何部分)、局限性轉(zhuǎn)導(dǎo)(轉(zhuǎn)

導(dǎo)的DNA只限供菌染色體上的特定基因

4,溶原性轉(zhuǎn)換(lysogenicconversion)：溶原性細(xì)菌因染色體上整合有前噬菌體而獲得新的遺傳性狀稱(chēng)為溶原性轉(zhuǎn)換。

5、原生質(zhì)體融合(protoplastfusion)：G+菌形成原生質(zhì)體后，在聚乙二醇(PEG)作用下，可使兩種不同的細(xì)菌細(xì)胞發(fā)生

融合的過(guò)程。

■融合后形成雙倍體細(xì)胞，可短期生存，染色體重組，獲得多種不同表型的重組融合體。

人為實(shí)驗(yàn)基因轉(zhuǎn)移與重組。

第四節(jié)基因突變

一、基因突變規(guī)律：

1、自發(fā)突變與誘發(fā)突變

①突變可以自然發(fā)生為：自發(fā)突變，具自發(fā)性，隨機(jī)性。

?彷徨試驗(yàn)(fluctuationtest,波動(dòng)試驗(yàn))：隨機(jī)的、非定向的突變是在接觸噬菌體之前就已發(fā)生，噬菌體對(duì)突變僅起篩選而

不是誘導(dǎo)作用。

②人工誘導(dǎo)產(chǎn)生的突變?yōu)檎T發(fā)突變，可提高突變率。

2、突變率：是指細(xì)菌生長(zhǎng)時(shí)發(fā)生突變的頻率。

3、突變與選擇

?影印試驗(yàn)(replicaplating)：耐藥突變株在接觸藥物之前出現(xiàn)，藥物的作用是選擇耐藥株，淘汰敏感株。

4、回復(fù)突變與抑制突變

?野生型(wildtype)：未發(fā)生突變的菌株。

?突變型(mutanttype)：相對(duì)于野生型，某一性狀發(fā)生改變的菌株。

?回復(fù)突變(inversemutation)：有時(shí)突變株經(jīng)過(guò)又一次突變可恢復(fù)為野生型的性狀。

第五節(jié)細(xì)菌遺傳變異在醫(yī)學(xué)上的實(shí)際意義

1,影響細(xì)菌學(xué)診斷

2、預(yù)防耐藥菌株的擴(kuò)散

3、制備疫苗

4、檢測(cè)致癌物

5、基因工程方面的應(yīng)用

第七章細(xì)菌的感染與免疫

第一節(jié)正常菌落與機(jī)會(huì)致病菌

1、正常菌群：當(dāng)人體免疫功能正常時(shí)，對(duì)宿主無(wú)害的，某些還對(duì)人有利，是為正常微生物群。

■正常菌群對(duì)宿主的生理學(xué)作用:（問(wèn)答）

⑴生物拮抗，其作用機(jī)制為：①受體競(jìng)爭(zhēng)；②產(chǎn)生有害代謝產(chǎn)物；③營(yíng)養(yǎng)競(jìng)爭(zhēng)；④合成細(xì)菌素。

⑵營(yíng)養(yǎng)作用：參與宿主的物質(zhì)代謝、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)轉(zhuǎn)化和合成。

⑶免疫作用

⑷抗衰老作用

⑸抗腫瘤作用：①降解致癌物質(zhì)；②激活巨噬細(xì)胞——抑制腫瘤細(xì)胞。

2、機(jī)會(huì)致病菌（致病條件）--填空

⑴正常菌群的寄生部位改變

⑵宿主免疫功能低下

⑶菌群失調(diào)：在應(yīng)用抗生素治療感染性疾病的過(guò)程中，宿主某部位正常菌群中各菌種間的比例發(fā)生較大幅度的變化而產(chǎn)生的

疾病。常可引起二重感染或重疊感染，即在抗菌藥物治療感染性疾病的過(guò)程中，發(fā)生了另一種新致病菌引起的感染。

第二節(jié)細(xì)菌的致病作用（問(wèn)答）

1、遵力：表示細(xì)菌致病性的強(qiáng)弱。

半數(shù)致死量：在?定條件下能引起50%的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物死亡的細(xì)菌數(shù)量或毒素劑量。

半數(shù)感染量：在一定條件下能引起50%的組織培養(yǎng)細(xì)胞的細(xì)菌數(shù)量或毒素劑量。

2,細(xì)菌的致病作用取決于：細(xì)菌的毒力、細(xì)菌侵入的數(shù)量、細(xì)菌侵入的途徑

-、細(xì)菌的毒力

㈠侵襲力：致病菌能突破宿主皮膚、粘膜生理屏障，進(jìn)入機(jī)體并在體內(nèi)定植、繁殖擴(kuò)散的能力。

1、黏附素

2、莢膜

3、侵襲性物質(zhì)：侵襲素、侵襲性酶

4、細(xì)菌生物被膜

㈡毒素

■外毒素和內(nèi)毒素的主要區(qū)別（簡(jiǎn)述）

外毒素內(nèi)毒素

來(lái)源G+菌和部分G-菌G-菌

存在部分從活菌分泌出，少數(shù)菌崩解后釋出細(xì)胞壁組分，菌裂解后釋出

化學(xué)成分蛋白質(zhì)脂多糖

穩(wěn)定性60-80℃,30分鐘160℃,2~4小時(shí)

毒性作用強(qiáng)，對(duì)組織器官有選擇性毒害效應(yīng)，引起特殊臨床表較弱，各菌的毒性作用大致相同，引起發(fā)熱、白細(xì)胞

現(xiàn)增多、微循環(huán)障礙、休克、DIC等全身反應(yīng)

抗原性強(qiáng)，刺激機(jī)體產(chǎn)生抗毒素；甲醛液處理脫毒形成類(lèi)毒弱，刺激機(jī)體產(chǎn)生的中和抗體作用弱；甲醛液處理不

素產(chǎn)生類(lèi)毒素

特點(diǎn)1、大多數(shù)的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)1、產(chǎn)生于G-菌細(xì)胞壁

2、毒性作用強(qiáng)，對(duì)組織器官有高度選擇性2、化學(xué)性質(zhì)是LPS

3、絕大多數(shù)不耐熱3、對(duì)理化因素穩(wěn)定

4、抗原性強(qiáng)4、毒素作用相對(duì)較弱

5、可用人工化學(xué)方法脫去毒性（A亞基活性），保留5、不能用甲醛液脫毒而成為類(lèi)毒素

其抗原性（B亞基結(jié)構(gòu)）

分類(lèi)1、神經(jīng)毒素：破傷風(fēng)梭菌、肉毒梭菌

2、細(xì)胞毒素：能直接損失宿主細(xì)胞（成孔毒素、磷

脂酶類(lèi)）

3、腸毒素：霍亂弧菌

主要生物學(xué)1、發(fā)熱反應(yīng)

作用2、白細(xì)胞反應(yīng)

3、內(nèi)毒素血癥和內(nèi)毒素休克

第三節(jié)宿主的免疫防御機(jī)制

r皮膚與粘膜

V1”〃出J血腦屏障

v屏障結(jié)構(gòu)

胎盤(pán)屏障

非特異性免疫（天然吞噬細(xì)胞

廠(chǎng)疫）'一，補(bǔ)體

1體液因素<溶菌酶

]r體液免疫防御素

特異性免疫（獲得性免、

疫）

7[細(xì)胞免疫

一、非特異性免疫機(jī)制

（-）屏障結(jié)構(gòu)

*皮膚與黏膜屏障：機(jī)械阻擋、纖毛運(yùn)動(dòng)；分泌殺菌物質(zhì)；菌群拮抗作用

*血腦屏障：軟腦膜+脈絡(luò)膜+腦毛細(xì)血管+星狀膠質(zhì)細(xì)胞

*胎盤(pán)屏障：母體子宮內(nèi)膜的基蛻膜+胎兒絨毛膜

（二）吞噬作用

吞噬細(xì)胞分為：

■大吞噬細(xì)胞：血液中單核細(xì)胞和組織中巨噬細(xì)胞

■小吞噬細(xì)胞：血液中中性粒細(xì)胞

1、吞噬殺傷過(guò)程：趨化一接觸一吞入一殺滅與消化一殘?jiān)懦?/p>

2、殺傷機(jī)制：

依氧殺菌機(jī)制

①呼吸爆發(fā)（需分子氧參加）

（活性氧中介物（ROD：H2O2>O2\OH\O2等

分子氧被還原為

多種

【活性氮中介物（RNI）：NO、NO2\NO3噂

對(duì)細(xì)菌均有直接毒性作用

（破壞細(xì)菌的DNA、蛋白質(zhì)和膜脂類(lèi)）

②髓過(guò)氧化物酶（MPO）：存在于溶酶體中，與H25及氯化物的共同參與，對(duì)細(xì)菌、真菌等具有強(qiáng)大殺傷活性。

非依氧殺菌機(jī)制

■酸性作用：糖分解產(chǎn)酸而導(dǎo)致pH下降，抑制細(xì)菌生長(zhǎng)而殺菌。

■溶酶體酶及殺菌蛋白：溶酶體、乳鐵蛋白、蛋白水解酶、核酸酶、酯酶等，對(duì)細(xì)菌有殺傷、消化、分解作用。

3、吞噬作用的后果

■完全吞噬：病原體在吞噬溶酶體內(nèi)被殺滅、消化、排除殘?jiān)倪^(guò)程。（5-10分鐘死亡，30-60分鐘破壞）

?不完全吞噬：只被吞噬，卻不被殺死。

■組織損傷：吞噬過(guò)程中，溶酶體酶（水解酶）也能破壞鄰近的正常組織，造成組織損傷和炎癥反應(yīng)。

（三）體液因素

■補(bǔ)體：調(diào)理，溶菌。

?溶菌酶：存在于血清，唾液，淚液，乳汁，主要作用于G+菌。

■防御素：多肽，破壞胞外菌細(xì)胞膜。

二、特異性免疫

（一）體液免疫——抗體的作用

1、抑制病原體黏附

2、調(diào)理吞噬作用

3、中和細(xì)菌外毒素

4、溶菌作用

5、抗體依賴(lài)性細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用（ADCC）

（二）細(xì)胞免疫

細(xì)胞毒T細(xì)胞（CTL）直接殺傷靶細(xì)胞

效應(yīng)T細(xì)胞（Thl）產(chǎn)生細(xì)胞因子發(fā)揮作用

（三）黏膜免疫（mucosalimmunesystem.MIS）

三、抗細(xì)菌感染免疫的特點(diǎn)

（一）抗胞外菌感染的免疫

■胞外菌：指寄生在宿主細(xì)胞外的組織間隙和血液、淋巴液和組織液中的細(xì)胞。如葡萄球菌。

■靠非特異免疫；但主要是體液免疫發(fā)揮作用

?吞噬作用（非特異）

?抗體和補(bǔ)體的作用：①阻止細(xì)菌定植（黏附）；②調(diào)理吞噬；③激活補(bǔ)體溶菌；④中和細(xì)菌外毒素。

?細(xì)胞免疫（Th2）：輔助B細(xì)胞產(chǎn)生抗體；產(chǎn)生細(xì)胞因子，促進(jìn)吞噬。

（二）抗胞內(nèi)菌感染的免疫

■胞內(nèi)菌：寄生在細(xì)胞內(nèi)的細(xì)菌，分專(zhuān)性胞內(nèi)菌（立克次體，衣原體）、兼性胞內(nèi)菌（結(jié)核分枝桿菌，麻風(fēng)分枝桿菌，傷寒

沙門(mén)菌，布氏桿菌，肺炎軍團(tuán)菌，李斯特菌）。

■特點(diǎn)：胞內(nèi)寄生、毒性低、呈慢性感染、免疫病理?yè)p傷，主要靠細(xì)胞免疫功能。

■吞噬作用：起一定作用

■細(xì)胞免疫（CTL）：主要作用

■局部黏膜免疫：細(xì)菌未進(jìn)細(xì)胞前由slgA阻止其黏附，使其不能侵入細(xì)胞內(nèi)。

第四節(jié)感染的發(fā)生與發(fā)展

感染的來(lái)源與傳播

■內(nèi)源性感染：來(lái)自宿主自身的細(xì)菌感染，主要指曾經(jīng)感染過(guò)而潛伏下來(lái)的微生物重新感染。比如結(jié)核分支桿菌。也常見(jiàn)于

機(jī)體免疫力下降時(shí)。

■外源性感染：引起感染的細(xì)菌來(lái)源于宿主體外，主要有病人及帶菌者、患病及帶菌動(dòng)

外源性感染內(nèi)源性感染

傳染源病人、帶菌者、病畜及帶菌動(dòng)物致病菌主要來(lái)自體內(nèi)正常菌群，少數(shù)是以潛伏狀態(tài)存

在于體內(nèi)的致病菌

傳播途徑呼吸道、消化道、皮膚創(chuàng)傷、經(jīng)節(jié)肢動(dòng)物媒介、性傳

播

感染的類(lèi)型

（-）隱性感染：當(dāng)機(jī)體抗感染免疫力較強(qiáng)或入侵的細(xì)菌數(shù)量不多、毒力較弱，感染后損害較輕，使機(jī)體不出現(xiàn)或出現(xiàn)不明

顯的臨床癥狀者。一般在一次傳染病流行中，大多數(shù)人為隱性感染，如結(jié)核。

（-）顯性感染：當(dāng)病原菌毒力強(qiáng)，數(shù)量多且宿主機(jī)體抗感染免疫力相對(duì)較弱，機(jī)體受到嚴(yán)重?fù)p害，出現(xiàn)明顯臨床癥狀者。

■按病情緩急不同分：

1、急性感染：發(fā)作突然，病情突然，一般為數(shù)日至數(shù)周。病愈后，致病菌消失。

2、慢性感染：病程緩慢，一般為數(shù)月至數(shù)年。胞內(nèi)菌往往引起慢性感染。

■按感染部位不同分：

1,局部感染

2、全身感染：

①毒血癥：致病菌侵入體內(nèi)后，只在機(jī)體局部生長(zhǎng)繁殖，病菌不進(jìn)入血循環(huán)，但其產(chǎn)生的外毒素入血。（白喉）

②內(nèi)毒素血癥：G-菌侵入血液，并在其中大量繁殖、崩解后釋放大量?jī)?nèi)毒素；也可由病灶內(nèi)G-菌死亡釋放內(nèi)毒素入血。

③菌血癥：致病菌由局部侵入血流，但未在血流中生長(zhǎng)繁殖，只是短暫的一過(guò)性通過(guò)血循環(huán)到達(dá)體內(nèi)適宜部位后再進(jìn)行繁殖

而致病。（傷寒早期）

④敗血癥：致病菌侵入血后在其中大量繁殖并產(chǎn)生毒性物質(zhì)，引起全身性中毒癥狀。（高熱、皮膚和粘膜瘀斑、肝脾腫大）

⑤膿毒血癥：化膿性菌侵入血后在其中大量繁殖，并通過(guò)血流擴(kuò)散至宿主體內(nèi)的其他組織或器官，產(chǎn)生新的化膿性病灶。

（三）帶菌狀態(tài)：致病菌在顯性或隱性感染后并未消失，在體內(nèi)繼續(xù)留存一段時(shí)間，與機(jī)體免疫力處于相對(duì)平衡狀態(tài)。

第五節(jié)醫(yī)院感染

一、醫(yī)院感染（hospitalacquiredinfection）：患者在住院期間發(fā)生的感染或醫(yī)院內(nèi)獲得而出院后發(fā)生的感染，或與前次住院

有關(guān)的感染（不包括入院前已處于潛伏期的感染）。

二、醫(yī)院感染的分類(lèi)

1、按微生物來(lái)源：

■內(nèi)源性醫(yī)院感染：由自身正常菌群轉(zhuǎn)變成機(jī)會(huì)性致病菌所致

特定條件：①寄居部位改變；②免疫功能下降；③菌群失調(diào)

■外源性醫(yī)院感染（交叉感染）：患者遭受醫(yī)院內(nèi)非自身存在的病原體侵襲而發(fā)生的感染。病人之間、醫(yī)患之間、污染醫(yī)護(hù)

用品或診治設(shè)備、環(huán)境空氣等，也稱(chēng)醫(yī)院內(nèi)感染。

■醫(yī)源性感染。

2、按感染部位分類(lèi)——全身各部位均可發(fā)生

三、醫(yī)院感染的微生物特征

*主要是機(jī)會(huì)性致病菌（常為內(nèi)源性感染）

*常為耐藥菌

*新的病原菌不斷出現(xiàn)，種類(lèi)變遷

*主要是細(xì)菌，其次為病毒和真菌

四、醫(yī)院感染的危險(xiǎn)因素

■易感對(duì)象：年齡因素（老人、嬰幼兒）：基礎(chǔ)疾病（抗感染能力下降）

■診療技術(shù)及侵入性檢查與治療因素：器官移植；血液透析和腹膜透析；介入檢查和治療

■損傷免疫系統(tǒng)的因素：放射治療；化學(xué)治療；激素治療

■其他因素：抗生素使用不當(dāng)；外科手術(shù)及各種引流；住院時(shí)間過(guò)長(zhǎng)

五、醫(yī)院感染的預(yù)防和控制

*消毒滅菌

*隔離預(yù)防

*合理使用抗生素

第九章球菌

G+球菌：葡萄球菌、鏈球菌、腸球菌

G-球菌：奈瑟菌

第一節(jié)葡萄球菌屬

金黃色葡萄球菌

（一）生物性狀

1、顏色和染色：無(wú)芽胞，無(wú)鞭毛

2、培養(yǎng)特性：需氧或兼性厭氧。培養(yǎng)營(yíng)養(yǎng)要求不高。屬內(nèi)不同菌種可產(chǎn)生金黃色、白色、檸檬色等脂溶性色素并使菌落著

色。

■致病性葡萄球菌菌落呈金黃色，于血瓊脂平板上生長(zhǎng)后在菌落周?chē)€可見(jiàn)完全透明溶血環(huán)（B溶血）。

3、生化反應(yīng)：

①多數(shù)能分解葡萄糖、麥芽糧、蔗糖，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。

②致病性菌株能分解甘露醇，產(chǎn)酸。

③觸酶（過(guò)氧化氫酶）陽(yáng)性，可與鏈球菌相區(qū)分。

4、抗原：

⑴葡萄球菌A蛋白（SPA）：存在于細(xì)胞壁上的表面抗原，可與IgG的Fc段結(jié)合，可進(jìn)行協(xié)同凝集，并具有抗吞噬等生物學(xué)

活性。

⑵莢膜多糖：有利于黏附和抗吞噬。

⑶多糖抗原：具有群特異性，存在于細(xì)胞壁。

5、分類(lèi):

⑴按DNA相關(guān)性分：金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌。

⑵按有無(wú)凝固酶（血漿凝固酶）分：凝固酶陽(yáng)性菌、凝固酶陰性菌。

6、抵抗力：

①葡萄球菌對(duì)外界抵抗力強(qiáng)。

②對(duì)堿性染料-（龍膽紫）較敏感。

③對(duì)青霉素、金霉素、紅霉素、慶大霉素高度敏感，對(duì)鏈霉素中度敏感，對(duì)磺胺、氯霉素敏感性較差。

④易產(chǎn)生耐藥性，尤其對(duì)青霉素。

（二）致病性

葡萄球菌中毒性最強(qiáng)的是金黃色葡萄球菌。

1、致病物質(zhì)（填空）

⑴酶

■血漿凝固酶:鑒定致病性葡萄球菌的重要指標(biāo)，包括游離凝血酶和結(jié)合凝血酶。

其致病機(jī)理：①阻礙吞噬細(xì)胞的吞噬和細(xì)胞內(nèi)消化作用。

②保護(hù)病菌不受血清中殺菌物質(zhì)的破壞。

③引起周?chē)w維蛋白沉積和凝固使感染易于周限化和形成血栓。

■耐熱核酸酶:由致病性葡萄球菌產(chǎn)生，耐熱，能較強(qiáng)的降解DNA和RNA。耐熱核酸酶是測(cè)定葡萄球菌有無(wú)致病性的重要

指標(biāo)之一。

■纖維蛋白溶酶（葡激酶）:激活纖維蛋白酶原使之成為纖維蛋白酶，導(dǎo)致血漿纖維蛋白的溶解，有利于病菌的擴(kuò)散。

■透明質(zhì)酸（擴(kuò)散因子）:降解結(jié)締組織的透明質(zhì)酸。

■脂酶:分解脂肪。

■觸酶:分解過(guò)氧化氫。

⑵毒素

■葡萄球菌溶素:破壞膜的完整性導(dǎo)致細(xì)胞溶解，對(duì)人類(lèi)有致病作用的主要為a溶素。

■殺白細(xì)胞素（PV）：分快（F）慢（S）兩種組分，兩者必須協(xié)同才能有作用。攻擊中性粒白細(xì)胞和巨噬細(xì)胞，增強(qiáng)侵襲力。

■腸毒素:一組熱穩(wěn)定的可溶性蛋白質(zhì)，可抵抗胃液中的蛋白酶的水解作用。刺激嘔吐中樞導(dǎo)致以嘔吐為主要癥狀的急性胃

腸炎，即食物中毒。葡萄球菌腸毒素屬于超抗原，即不經(jīng)過(guò)抗原遞呈細(xì)胞的處理能非特異性刺激T細(xì)胞增值并釋放過(guò)量細(xì)胞

因子致病。

■表皮剝脫毒素（表皮溶解毒素）:有兩個(gè)血清型，A型耐熱，B型不耐熱。引起表皮脫落性皮炎。

?毒素休克綜合癥毒素-1：引起多器官。多系統(tǒng)的功能紊亂，超抗原作用。

⑶細(xì)胞表面結(jié)構(gòu)蛋白：莢膜、肽聚糖、磷酸壁、蛋白A

2、所致疾病

⑴侵襲性疾病：以膿腫形式為主的化膿性炎癥。①皮膚化膿性炎癥：濃汁金黃而粘稠，病灶界限清楚，多為局限性。

⑵毒素性疾病：由外毒素引起的中毒性疾病。①食物中毒；②燙傷樣皮膚綜合癥；③毒性休克綜合癥（TSS）。

|（三）免疫性卜人類(lèi)對(duì)葡萄球菌有一定的天然免疫力。

微生物檢查法

致病注葡萄球菌的鑒定依據(jù)：①能產(chǎn)生金黃色色素；②有溶血性；③凝固酶實(shí)驗(yàn)陽(yáng)性；④耐熱核酸酶試驗(yàn)陽(yáng)性；⑤能分解甘

露醇產(chǎn)酸。

二、凝固酶陰性葡萄球菌CNS

㈠生物學(xué)性狀

CNS為G+菌，最常見(jiàn)的是表葡萄球菌和腐生葡萄球菌。

㈡致病性

①泌尿系統(tǒng)感染：

②細(xì)菌性?xún)?nèi)膜炎：

③敗血癥：

④術(shù)后及植入醫(yī)用器械引起的感染：

第二節(jié)鏈球菌屬

鏈球菌屬對(duì)人類(lèi)致病的主要是A群鏈球菌和肺炎鏈球菌。

1、分類(lèi)

按溶血現(xiàn)象

溶血現(xiàn)象性質(zhì)

甲型溶血性鏈球菌（草綠色鏈球菌落周?chē)?~2mm寬的草綠色溶血環(huán)多為機(jī)會(huì)致病菌

菌）

乙型溶血性鏈球菌（溶血性鏈球菌落周?chē)?~4mm寬的界限分明、完全透明的無(wú)色致病力強(qiáng)

菌）溶血環(huán)

丙型溶血性鏈球菌（不溶血性鏈球不產(chǎn)生溶血素，菌落周?chē)鸁o(wú)溶血環(huán)一般不致病

菌）

2、對(duì)人致病的鏈球菌90%左右屬A群，且對(duì)人致病的A群鏈球菌多呈現(xiàn)乙型溶血。

3、需氧、兼性厭氧鏈球菌對(duì)人有致病性。

一、A群鏈球菌

A群鏈球菌主要有化膿性鏈球菌或8-溶血性鏈球菌,是人類(lèi)常見(jiàn)的感染細(xì)菌，也是鏈球菌中對(duì)人類(lèi)致病作用最強(qiáng)的細(xì)菌。

㈠生物學(xué)性狀

1、培養(yǎng)特性：多數(shù)菌株兼性厭氧。營(yíng)養(yǎng)要求較高，多數(shù)菌株周?chē)仔纬奢^寬的透明溶血環(huán)。

2、生化反應(yīng)：①分解葡萄糖，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。②鏈球菌一般不分解菊糖，不被膽汁溶解，可用來(lái)鑒別甲型溶血性鏈球菌和肺

炎鏈球菌。鏈球菌不產(chǎn)生觸酶。

3、抗原：①多糖抗原（C抗原）：②表面抗原（蛋白質(zhì)抗原）；③核蛋白抗原（P抗原）

4、抵抗力：一般鏈球菌均可在60℃被殺死，對(duì)常用消毒劑敏感。

㈡致病性

1、致病物質(zhì)

⑴細(xì)胞壁成分：

①黏附素：包括脂磷壁酸和F蛋白

②M蛋白：A群鏈球菌主要的致病因子。含M蛋白的鏈球菌具有抗吞噬和抵抗吞噬細(xì)胞內(nèi)殺菌作用的能力。

③肽聚糖：A群鏈球菌的肽聚糖具有致熱、溶解血小板、提高血管通透性、誘發(fā)實(shí)驗(yàn)性關(guān)節(jié)炎等作用。

⑵外毒素：

①致熱外毒素（紅疹毒素、猩紅熱毒素）：由攜帶溶原性噬菌體的A群鏈球菌產(chǎn)生，具有超抗原作用。

②鏈球菌溶素：有溶解紅細(xì)胞、破壞白細(xì)胞和血小板的作用

⑶侵襲性酶類(lèi)：

①透明質(zhì)酸酶：分解細(xì)胞間質(zhì)，促進(jìn)細(xì)菌擴(kuò)：

②鏈激酶（溶纖維蛋白酶）：溶解血塊、阻止血漿凝固，促細(xì)菌擴(kuò)散；

③鏈道酶（DNA酶）：溶解膿汁中DNA,降低其粘稠度，促細(xì)菌擴(kuò)散，主要有A,C,G群鏈球菌產(chǎn)生。

2、所致疾病：

⑴化膿性感染：如局部皮膚及皮下組織感染（丹毒、淋巴管炎、蜂窩組織炎、癰、膿皰瘡等）和其它系統(tǒng)感染（化膿性扁桃

體炎、咽炎、鼻竇炎、中耳炎及產(chǎn)褥熱等）。

⑵中毒性感染：如猩紅熱、鏈球菌毒性休克綜合征。

⑶變態(tài)反應(yīng)性疾病：如風(fēng)濕熱、急性腎小球腎炎等。

㈢免疫性：鏈球菌型別多，各型間無(wú)交叉免疫力，故常可反復(fù)感染。

二、肺炎鏈球菌（肺炎球菌）

肺炎鏈球菌常寄居于正常人的鼻腔中，多數(shù)不致病或致病力弱，僅有少數(shù)致病力。是細(xì)菌性大葉肺炎、腦膜炎、支氣管炎的

主要病原菌。

㈠生物學(xué)性狀

①屬G+球菌，營(yíng)養(yǎng)要求較高，兼性厭氧。在血平板上的菌落細(xì)小、形成草綠色a溶血環(huán)。

②分解葡萄糖、麥芽糖、乳糖、蔗糖，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。

③可靠的鑒別法是膽汁溶菌實(shí)驗(yàn)。

④對(duì)理化因素抵抗力較弱，對(duì)一般消毒劑敏感。

㈡致病性

1、致病物質(zhì)

莢膜、脂磷壁酸、肺炎鏈球菌溶素0、神經(jīng)氟酸酶

2、所致疾病

人類(lèi)大葉性肺炎、支氣管炎

㈢免疫性：感染紅藕可建立較牢固的特異性免疫

（四）微生物檢查法

血瓊脂平板上的肺炎鏈球菌菌落周?chē)胁菥G色a溶血環(huán)。肺炎鏈球菌主要應(yīng)與甲型溶血性鏈球菌鑒別，方法：膽汁容菌試驗(yàn)、

菊糖發(fā)酵試驗(yàn)、莢膜腫脹試驗(yàn)。

三、其他醫(yī)學(xué)相關(guān)鏈球菌

?B群鏈球菌（GBS）——無(wú)乳鏈球菌

?GBS正常寄居陰道與直腸，帶菌率30%

?新生兒感染（經(jīng)產(chǎn)道或呼吸道）敗血癥及腦膜炎死亡率高。

?D群鏈球菌——腸球菌

條件致病菌，為醫(yī)院感染的重要致病菌，常見(jiàn)尿路感染。

?甲型溶血性鏈球菌

?是口腔和上呼吸道部位的正常菌群

-條件致病菌，可引起亞急性細(xì)菌性心內(nèi)膜炎

-變異鏈球菌與踽齒發(fā)病有關(guān).

第四節(jié)奈瑟菌屬

奈瑟菌屬是G-菌，專(zhuān)性需氧，能產(chǎn)生氧化酶和觸酶，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。

人類(lèi)是奈瑟菌屬的天然宿主，對(duì)人類(lèi)致病的只有腦膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌。

一、腦膜炎奈瑟菌

㈠生物學(xué)性狀

1、形態(tài)染色：腎形或豆形雙球菌，在患者腦脊液中，多位于中性粒細(xì)胞中，形態(tài)典型。

2、培養(yǎng)特性：營(yíng)養(yǎng)要求較高，專(zhuān)性需氧，在5%二氧化碳下生長(zhǎng)更佳，培養(yǎng)基色似巧克力，故名巧克力培養(yǎng)基。

3、生化反應(yīng)：大多數(shù)分解葡萄糖、麥芽糖，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。

4、抗原結(jié)構(gòu)和分類(lèi)：

⑴莢膜多糖群特異性抗原：以C群致病力最強(qiáng)

⑵外膜蛋白型特異性抗原：根據(jù)細(xì)胞外膜蛋白組分的不同劃分，A群外膜蛋白均相同

⑶脂寡糖抗原：腦膜炎奈瑟菌的主要致病物質(zhì)

5、抵抗力：對(duì)理化因素抵抗力弱，對(duì)干燥、熱力、消毒劑等敏感，

㈡致病性

1、致病物質(zhì)：⑴莢膜：抗吞噬作用

⑵菌毛：

（3）IgAl蛋白酶：

（4）L0S：主要致病物質(zhì)

2、所致疾病：腦膜炎奈瑟菌是流腦的病原菌，人類(lèi)是唯一易感宿主，傳染源是病人和帶菌者。病菌主要通過(guò)飛沫傳播方式

侵入人體鼻咽部。

㈢免疫性：以體液免疫為主。成人抵抗力較強(qiáng)。6個(gè)月大的嬰兒可通過(guò)母體獲得抗體，產(chǎn)生自然被動(dòng)免疫。

（四）微生物檢查法

采集病人的腦脊液、血液或刺破出血斑取出的滲出物，直接涂片染色后鏡檢，如發(fā)現(xiàn)中性粒細(xì)胞內(nèi)、外有G-陰性雙球菌,

可做出初步診斷。

二、淋病奈瑟菌（淋球菌）

引起人類(lèi)泌尿生殖系統(tǒng)粘膜化膿性感染的病原菌,也是我國(guó)目前流行的發(fā)病率最高的性傳播疾病，人體是其唯一宿主。

㈠生物學(xué)性狀

1、形態(tài)染色：常呈雙排列，濃汁標(biāo)本中大多位于中性粒細(xì)胞內(nèi)。

2、培養(yǎng)特性：專(zhuān)性需氧，營(yíng)養(yǎng)要求高，在巧克力血瓊脂平板上適宜。分解葡萄糖，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。

3、抗原結(jié)構(gòu)與分類(lèi)：⑴菌毛蛋白抗原：

⑵脂寡糖抗原：

⑶外膜蛋白抗原：

㈡致病性

1、致病物質(zhì)

⑴菌毛：有菌毛的細(xì)菌可粘附在人體尿道粘膜上，抗吞噬作用明顯。

⑵外膜蛋白：

⑶脂寡糖：

（4）IgAl蛋白酶：

2、所致疾病

人類(lèi)是淋病奈瑟菌的唯一宿主。

㈢免疫性：人類(lèi)無(wú)天然抵抗力，且免疫不持久。

（四）微生物檢查法

微生物學(xué)檢查與防治：分泌物涂片鏡檢，分離培養(yǎng)。在中性粒細(xì)胞內(nèi)發(fā)現(xiàn)革蘭氏陰性雙球菌，有診斷價(jià)值。青霉素，頭銜三

嗪治療有效。

第十章腸桿菌科

腸桿菌科細(xì)菌的共同生物學(xué)特點(diǎn)：

1、形態(tài)結(jié)構(gòu)：中等大小的G-菌，大多有菌毛、鞭毛，少數(shù)有莢膜，沒(méi)有芽胞。

2、培養(yǎng)：兼性厭氧或無(wú)氧，營(yíng)養(yǎng)要求不高

3、生化反應(yīng)：乳糖發(fā)酵試驗(yàn)可初步鑒別志賀菌、沙門(mén)菌等致病菌和大部分非致病腸道桿菌，前二者不發(fā)酵乳糖。

4、抗原結(jié)構(gòu)：

⑴0抗原：存在于細(xì)胞壁脂多糖（LPS）最外層，具有屬特異性。

⑵H抗原：菌體失去鞭毛后發(fā)生H-0變異。

⑶莢膜抗原：具有型特異性。

5、抵抗力：對(duì)理化因素抵抗力不強(qiáng)

6、變異：最常見(jiàn)耐藥性變異。

第一節(jié)埃希菌屬

?埃希菌屬供6種，臨床上最常見(jiàn)、最重要的是大腸埃希菌。其主要表現(xiàn)在：

①大腸埃希菌是腸道中重要的正常菌群，并能為宿主提供一些具有營(yíng)養(yǎng)作用的合成代謝物。

②宿主免疫力下降或細(xì)菌侵入腸道