實驗目的與要求強調無菌操作概念，掌握無菌操作技術掌握微生物移植、純化的基本方法了解不同微生物在同一培養基上的培養特征，及同一微生物在不同培養基上的培養特征掌握幾種常用的鑒別、選擇培養基的使用了解顯微測微尺的構造；掌握應用顯微測微尺測量微生物細胞大小的方法與技術現在是1頁\一共有24頁\編輯于星期三微生物培養Culture：在一定的條件下培養、繁殖得到的微生物群體混合培養物：含有多種微生物的培養物；純培養物：只有一種微生物的培養物；Pureculture通常情況下只有純培養物才能提供可以重復的結果純培養技術是進行微生物學研究的基礎！現在是2頁\一共有24頁\編輯于星期三一、用固體培養基分離純培養培養基：液體培養基；固體培養基；1.5%-2.5%半固體培養基；0.2%-0.75%瓊脂現在是3頁\一共有24頁\編輯于星期三一、用固體培養基分離純培養菌落（colony）：

單個（或聚集在一起的一團）微生物在適宜的固體培養基表面或內部生長、繁殖到一定程度可以形成肉眼可見的、有一定形態結構的子細胞生長群體眾多菌落連成一片菌苔（lawn）現在是4頁\一共有24頁\編輯于星期三無菌操作：火焰附近（酒精燈、煤氣燈）進行現在是5頁\一共有24頁\編輯于星期三

不同微生物在特定培養基上生長形成的菌落或菌苔一般都具有穩定的特征（形狀、顏色等），可以成為對該微生物進行分類、鑒定的重要依據現在是6頁\一共有24頁\編輯于星期三菌落的描述：形態、表面和邊緣特征現在是7頁\一共有24頁\編輯于星期三現在是8頁\一共有24頁\編輯于星期三同一細菌在不同的培養平板上形成不同的特征菌落現在是9頁\一共有24頁\編輯于星期三一、用固體培養基分離純培養使微生物在固體培養基平板上形成單個菌落的基本方法：1、稀釋倒平板法2、涂布平板法3、平板劃線法4、厭氧微生物的分離現在是10頁\一共有24頁\編輯于星期三現在是11頁\一共有24頁\編輯于星期三一、用固體培養基分離純培養1、稀釋倒平板法2、涂布平板法操作較麻煩，對好氧菌、熱敏感菌效果不好！使用較多的常規方法，但有時涂布不均勻！現在是12頁\一共有24頁\編輯于星期三利用L棒進行涂布現在是13頁\一共有24頁\編輯于星期三3、平板劃線法現在是14頁\一共有24頁\編輯于星期三3、平板劃線法現在是15頁\一共有24頁\編輯于星期三二、選擇培養分離

抑制大多數其它微生物的生長；

使待分離的微生物生長更快；對微生物群落中數量占少數的微生物的分離純化沒有一種培養基或一種培養條件能夠滿足自然界中一切生物生長的要求，在一定程度上所有的培養基都是選擇性的。現在是16頁\一共有24頁\編輯于星期三三、選擇培養分離1.利用選擇平板進行直接分離待分離的微生物生長，其它微生物的生長被抑制

高溫下培養：分離嗜熱細菌；

培養基中不含N：分離固氮菌；

培養基加抗生素：分離抗性菌；現在是17頁\一共有24頁\編輯于星期三1.利用選擇平板進行直接分離

顏色反應：分離特定的菌株；

牛奶平板：分離蛋白酶產生菌；待分離的微生物的生長特征明顯不同于其它微生物現在是18頁\一共有24頁\編輯于星期三常用的選擇培養基沙門菌常用的培養基：亞硫酸鉍瓊脂平板(BS):含有煌綠、檸檬酸鉍銨、亞硫酸鈉、硫酸亞鐵，具有強選擇性，分離沙門氏菌HE（Heetoen)：檸檬酸鐵銨、去氧膽酸鹽、硫代硫酸鈉、麝香草酚藍和復紅，分離腸道致病菌現在是19頁\一共有24頁\編輯于星期三麥康凱培養基乳糖、膽鹽，弱選擇性，中性紅,分離腸道致病菌中性紅指示劑pH感應范圍6.8（紅色）到8.0（黃色）分解乳糖產酸，菌落顏色呈紅色沙門氏菌、志賀氏菌不分解乳糖，菌落顏色與培養基相同膽鹽有助于沙門氏菌的生長，抑制其他細菌大腸桿菌？沙門氏菌？常用的選擇培養基現在是20頁\一共有24頁\編輯于星期三克氏雙糖鐵蛋白胨；牛肉膏；酵母膏；乳糖；葡萄糖；氯化鈉；檸檬酸鐵銨；硫代硫酸鈉；瓊脂；酚紅為指示劑，黃色為產酸，紅色為產堿觀察克氏雙糖接種后斜面、底層產酸、產氣、產H2S的情況，大腸桿菌斜面？沙門氏菌斜面？現在是21頁\一共有24頁\編輯于星期三接種劃線菌種：大腸桿菌、沙門菌、青霉采用無菌操作進行移植學會分區劃線所有平皿和試管必須有標記18－24小時（真菌下周觀察）觀察試驗結果，描述固體培養和液體培養的細菌培養特征現在是22頁\一共有24頁\編輯于星期三步驟兩個人為一組，一個接種大腸桿菌，一個接種沙門菌LB液體移植普通瓊脂：分區劃線麥康凱：分區劃線LB半固體培養基：穿刺接種克氏雙糖：先穿刺后接種斜面真菌（青霉）接種沙保勞氏培養基現在是23頁\一共有24頁\編輯于星期三微生物大小測量原理微生物細胞的大小是其形態特征之一，也是鑒定的依據之一。在研究工作中有時要測定顯微鏡下微生物細胞的大小，使用工具為顯微測微尺。顯微測微尺有鏡臺測微尺和目鏡測微尺。目鏡測微尺是一塊可放在目鏡內的園形玻片。在玻片中央把5mm長度，刻成100等分的小格，其目鏡測微尺經過鏡筒光學系統后，其每格尺寸隨鏡筒長度變化而變化，也隨放大倍數而變化，因此必須選定顯微鏡及放大倍數。然后用已知長度的鏡