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實(shí)驗(yàn)八石蠟切片法一第1頁/共10頁實(shí)驗(yàn)八

石蠟切片法

第2頁/共10頁一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶W(xué)習(xí)石蠟切片法了解組織染色原理第3頁/共10頁二、實(shí)驗(yàn)原理用石蠟滲透固化組織;用堿性染料如蘇木精、堿性品紅等,使細(xì)胞核著色;用酸性染料如伊紅、酸性品紅等,使細(xì)胞中的嗜酸性成分著色,如蛋白質(zhì)。第4頁/共10頁三、實(shí)驗(yàn)用品1、器材:切片機(jī)、水浴鍋、染色缸、玻片、顯微鏡、試劑瓶、剪刀、鑷子、烘箱、離心管或青霉素瓶子。2、試劑蘇木色精、伊紅、二甲苯、中性樹膠、酒精、石蠟、氨水、鹽酸、蛋清、甘油。3、材料各類你感興趣的固定標(biāo)本。第5頁/共10頁四、實(shí)驗(yàn)步驟1、取材2、固定3、漂洗4、脫水5、透明6、透蠟7、包埋8、修塊9、切片10、染色第6頁/共10頁取材到切片取材——固定(Cannoy’s),材料厚度2mm。100%酒精——100%酒精——二甲苯:酒精(1:1)——二甲苯——二甲苯——二甲苯:石蠟(65℃1:1)——石蠟(65℃)——石蠟(65℃),以上處理各10-30min,視材料大小而定,最后一步石蠟20min。包埋——修塊——切片——貼片第7頁/共10頁脫蠟與復(fù)水二甲苯——二甲苯——二甲苯/無水乙醇(1/1)——無水乙醇——無水乙醇——95%乙醇——80%乙醇——70%乙醇——50%乙醇——蒸餾水。以上處理各2-3min。第8頁/共10頁染色與觀察1%蘇木色精(5min)——水洗——0.5%鹽酸分色(數(shù)秒)——水洗——0.4%氨水藍(lán)化——水洗(5min)——70%酒精——80%酒精——1%伊紅(95%酒精溶解)——95%酒精——95%酒精——100%酒精——100%酒精——酒精/二甲苯——二甲苯——二甲苯——中性樹膠封片。未注明時(shí)間的一律處

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