中醫(yī)藥大學(xué)教案課程名稱分子生物學(xué)教學(xué)對(duì)象中西醫(yī)結(jié)合、針推專業(yè)教材《分子生物學(xué)》、唐炳華鄭曉珂、中國中醫(yī)藥出版社、第3版授課內(nèi)容DNA的生物合成課時(shí)3教學(xué)目的與要求掌握：半保留復(fù)制的概念、特點(diǎn)，參加復(fù)制的物質(zhì)，各種酶在復(fù)制中的作用。岡崎片段、Klenow片段、端粒、端粒酶、突變、逆轉(zhuǎn)錄、cDNA的的概念。熟悉：突變的分子類型及DNA損傷修復(fù)的主要方式，真核生物DNA聚合酶。重點(diǎn)、難點(diǎn)重點(diǎn)：參與DNA復(fù)制的酶或蛋白質(zhì)，以及這些酶或蛋白質(zhì)作用特點(diǎn)和在復(fù)制過程中的順序及功能；DNA復(fù)制的四大規(guī)律，以及半保留復(fù)制、半不連續(xù)復(fù)制、前導(dǎo)鏈、隨從鏈和岡崎片段等的概念難點(diǎn)：DNA復(fù)制中的酶學(xué)問題。課型新授課教學(xué)方法講授法、互動(dòng)法、演示法、討論法教學(xué)過程設(shè)計(jì)第一節(jié)DNA的復(fù)制(DNAReplication)

一、DNA復(fù)制的基本特性

1.半保留性(Semi-Conservative)

2.雙向復(fù)制(一般)復(fù)制起始點(diǎn)(origin)+兩側(cè)復(fù)制叉=復(fù)制單位(復(fù)制子,Replicon)

3.半不連續(xù)性(Semi-discontinuous)

前導(dǎo)鏈(leadingstrand)-連續(xù)合成，隨從鏈(LaggingStrand)-不連續(xù),由崗崎片段(okazakifragment)連接而成.

二、DNA復(fù)制必需的成份(真核生物)

1.染色體DNA復(fù)制必需三種核苷酸序列①復(fù)制起點(diǎn)②著絲粒③端粒.

2．RNA引物(RNAPrimer)一般8-14nt.帶游離3'-OH末端.

3.參加DNA復(fù)制的主要酶和蛋白質(zhì)

①DNA聚合酶(DNAPolymerase)真核DNA復(fù)制的主要酶DNAPola/δ.功能:從5'-3'方向延伸與模板互補(bǔ)的子代鏈.

②引發(fā)酶(Primase)與其他多種蛋白組成多蛋白復(fù)合體-引發(fā)體(Primosome).催化RNA引物合成和復(fù)制起始.

③DNA連接酶(DNALigase)催化一個(gè)雙鏈DNA的5'磷酸與另一雙鏈DNA的3'-OH形成磷酸二酯鍵.

④DNA解鏈酶(DNAHelicase),打開DNA雙鏈.

⑤增殖細(xì)胞核抗原(Proliferatingcellnuclearantigen.PCNA)輔助催化前導(dǎo)鏈合成.⑥端粒酶(Telomerase)

末端復(fù)制問題。

端粒酶負(fù)責(zé)染色體末端(端粒)復(fù)制,是由RNA和蛋白質(zhì)組成的核糖核蛋白.其中的RNA成分是端粒復(fù)制的模板.(因此端粒是逆轉(zhuǎn)錄酶)

作用:維持端粒長度.

端粒酶活性可用基于PCR的“TRAP”（Telomeraserepeatamplificationprotocol）法測(cè)定端粒與細(xì)胞壽命。教學(xué)過程設(shè)計(jì)

端粒、端粒酶與腫瘤的關(guān)系：絕大多數(shù)惡性腫瘤具有端粒酶活性但端粒縮短，但也有約5%的腫瘤無端粒酶活性且端粒較長。

端粒酶作為新的腫瘤標(biāo)志和腫瘤治療靶點(diǎn).

復(fù)習(xí)思考題原核生物DNA復(fù)制的酶學(xué)的特點(diǎn)？什么是半保留復(fù)制？原核生物DNA復(fù)制的基本過程是怎樣的？參考文獻(xiàn)1.唐炳華、王繼峰主編的《醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)》（規(guī)劃教材第九版，中國中醫(yī)藥出版社，2016年2.查錫良主編.醫(yī)學(xué)分子生物學(xué).第1版.出版地：人民衛(wèi)生出版社，20053.藥立波主編.醫(yī)學(xué)分子生物學(xué).第3版.出版地：人民衛(wèi)生出版社，2008BuiDT,LiJJ.DNARe-replicationIsSusceptibletoNucleotideLevelMutagenesis.Genetics.2019Apr26.pii:genetics.302194.GoffartS,HangasA,Pohjoism?kiJLO.TwistandTurn-TopoisomeraseFunctions