2023/3/211實(shí)訓(xùn)九菌種移接2023/3/212一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖煜じ鞣N接種工具的使用；掌握菌種移接的基本方法；熟練掌握無菌操作技術(shù)。二、實(shí)驗(yàn)原理無菌技術(shù)：指在微生物實(shí)驗(yàn)工作中，控制或防止各類微生物的污染及其干擾的一系列操作方法和有關(guān)措施。接種：將微生物接到適于它生長繁殖的人工培養(yǎng)基上或活的生物體內(nèi)的過程。2023/3/213三、實(shí)訓(xùn)材料和用具

超凈工作臺(tái)、接種工具、斜面培養(yǎng)基、酒精燈、酒精棉球、菌種、火柴、肥皂、標(biāo)簽紙等2023/3/214四、操作步驟：（一）常用接種工具的介紹1.接種針2.接種鉤3.接種耙4.接種環(huán)5.接種圈6.玻璃涂棒正面觀7.玻璃涂棒側(cè)面觀注意：不同菌種的移接和不同的培養(yǎng)目的，需選用不同的接種工具。

2023/3/215（二）接種前的準(zhǔn)備工作1.微生物的無菌接種技術(shù)要點(diǎn)：防止污染，嚴(yán)格的無菌操作。實(shí)驗(yàn)室：在超凈工作臺(tái)上進(jìn)行。必須進(jìn)行嚴(yán)格的消毒處理。用酒精棉球擦凈超凈工作臺(tái)臺(tái)面將接種管、酒精燈、接種工具等用品放在臺(tái)面于接種之前打開超凈工作臺(tái)紫外燈消毒30min，同時(shí)打開風(fēng)機(jī)接種時(shí)必須關(guān)閉紫外燈2023/3/2162.將接種管貼上標(biāo)簽，注明菌種名稱、接種日期、接種人姓名等，標(biāo)簽應(yīng)貼在接種管斜面的背面。3.操作者用肥皂洗手，晾干后用酒精棉球?qū)⑹帧⒕N管擦拭消毒。2023/3/217主要講述斜面接種

※斜面接種：

從已生長好的菌種斜面上挑取少量菌種移植至另一新鮮斜面培養(yǎng)基上的接種方法。

流程：

點(diǎn)燃酒精燈→手持試管→環(huán)滅菌→拔棉塞→灼燒接種環(huán)→環(huán)冷卻→取菌→接種→塞棉塞→環(huán)滅菌→培養(yǎng)

注意：除“培養(yǎng)”外此所有步驟均在超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行。（三）菌種移接的基本方法2023/3/2181、點(diǎn)燃酒精燈。2、手持試管取一菌種管和接種管，置左手食指、中指、無名指間，拇指壓住兩管底部上側(cè)面，使菌種管位于外側(cè)，培養(yǎng)基管位于內(nèi)側(cè)。將斜面向上，盡量放平。3、接種環(huán)灼燒滅菌右手持接種環(huán)，先垂直后水平將環(huán)部燒至紅熱，其余部分再在火焰上慢慢來回通過2～3次。手持試管和接種環(huán)灼燒滅菌2023/3/2194、拔管塞：以右手小指與手掌，小指與無名指分別夾取棉塞（先外管后內(nèi)管），將兩管口迅速通過火焰1～2次(切勿燒得過燙)。5、環(huán)滅菌：再灼燒接種環(huán)。2023/3/21106、取菌:接種環(huán)冷卻，輕沾取少量菌體或孢子，然后將接種環(huán)移出菌種管，注意不要使接種環(huán)碰到管壁，取出后帶菌接種環(huán)不可通過火焰。

2023/3/21117、接種:在火焰旁迅速將沾有菌種的接種環(huán)伸入待接斜面管。從斜面培養(yǎng)基底部向上作“Z”形來回密集劃線，勿劃破培養(yǎng)基。有時(shí)也可用接種針僅在斜面培養(yǎng)基的中央拉一條直線作斜面接種，直線接種可觀察不同菌種的生長特點(diǎn)。2023/3/21128、塞管塞：取出接種環(huán)，灼燒試管口，并在火焰旁將管塞旋上。不要用試管去迎棉塞，以免試管在移動(dòng)時(shí)納入不潔空氣。9、將接種環(huán)灼燒滅菌。放下接種環(huán)，再將棉花塞旋緊。10、培養(yǎng)：斜面朝下置培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。2023/3/2113溫馨提示1．接種人員在接種過程中盡量少說話，少走動(dòng)。2．每接完一支菌種后接種工具都要灼燒。3．接種工具灼燒后要充分冷卻，防止?fàn)C傷菌體。4．接種要在酒精燈火焰無菌區(qū)進(jìn)行。5．操作過程中雙手不要超出超凈工作臺(tái)邊緣，頭部不要探入工作臺(tái)內(nèi)。

2023/3/2114斜面接種時(shí)的無菌操作

(1)

環(huán)滅菌

(2)開啟棉塞

(3)管口滅菌

(4)沾取菌苔

(5)接種

(6)塞好棉塞

演示202