關于原生動物的系列實驗第一頁，共十四頁，編輯于2023年，星期日一、實驗目的1、學習原生動物的采集、分離和培養的方法，學習在顯微鏡下對運動活潑的微型動物的觀察方法，學習觀察單細胞動物的行為、應激性等生命現象和規律的方法，并學會分析實驗現象。2、通過對原生動物形態結構的觀察，掌握原生動物的基本特征，進一步理解原生動物的單個細胞是一個完整的能獨立生活的有機體。3、通過部分基礎生理實驗，認識原生質的應激性，了解草履蟲的科學研究價值。4、通過學生自行查閱文獻、選擇實驗項目、設計實驗方案和合理安排實驗程序，利用原生動物完成多個實驗項目，初步培養學生獨立設計實驗、合理充分利用實驗材料及采用多種實驗技能進行綜合的能力。第二頁，共十四頁，編輯于2023年，星期日二、實驗原理原生動物是動物界最低等、最簡單、最原始的單細胞動物，但原生動物的單細胞是一個完整的能獨立生活的有機體，能完成像高等動物一樣各種各樣的生命活動，對外界環境有非常敏感的應激性和適應性。草履蟲是原生動物的代表動物，形態結構和生命活動充分展現了單細胞原生動物作為一個完整的、獨立的動物有機體所具有的各種特征，而且草履蟲對各種刺激的反應也說明應激性是其普遍特性，因此是生命科學基礎理論研究的理想材料，在細胞生物學、細胞遺傳學研究中尤其具有科學價值。將形態結構觀察和生理實驗組合進行，既能充分利用實驗材料，有效地訓練學生綜合實驗的能力，又能理論聯系實際地培養和提高學生綜合分析問題的能力，并加深對基礎知識和基本原理的理解和掌握。第三頁，共十四頁，編輯于2023年，星期日三、實驗方案（一）原生動物的采集和分離培養1、原生動物的采集選擇不同地點進行原生動物的采集，實驗室顯微鏡下進行初步分類鑒定。2、草履蟲的分離和培養每個小組選用一種方法進行草履蟲分離（每個小組不同），并選擇一種培養基（每個小組不同），自主設計合理的草履蟲分離培養方案（學生自主選擇設計）。根據每個小組的結果，比較草履蟲在不同培養基中的生長和增殖狀況，篩選最合適的培養方案，并對結果現象進行分析討論，寫出實驗報告。第四頁，共十四頁，編輯于2023年，星期日（二）草履蟲活體觀察1、草履蟲臨時裝片的制備取限制草履蟲迅速游動的棉花纖維、發絲、鏡頭紙或蛋白甘油粘貼劑等（學生自主選擇）適量放于載玻片上，用滴管吸取草履蟲培養液滴一滴在障礙物中，蓋上蓋玻片，低倍鏡下觀察。2、草履蟲的外部形態與運動體形，前后區分，纖毛觀察，口溝。觀察蟲體周身纖毛的擺動和蟲體如何旋轉前進，以及遇到障礙時如何反應。3、草履蟲內部構造的觀察選擇一個清晰活動緩慢的草履蟲轉高倍鏡觀察內部構造。表膜，外質，內質，刺絲泡，胞口，胞咽，食物泡，伸縮泡，收集管，細胞核（用次甲基藍染色）表膜的觀察：制作臨時裝片，晾干觀察。第五頁，共十四頁，編輯于2023年，星期日（三）食物泡的形成與變化用牙簽蘸取少量洋紅粉末摻入草履蟲滴液中，混勻，做臨時裝片觀察食物泡的形成、大小的變化及在蟲體內環流的過程。第六頁，共十四頁，編輯于2023年，星期日（四）草履蟲的應激性實驗1、刺絲泡的發射制作草履蟲臨時裝片，蓋玻片一側滴一滴用蒸餾水稀釋20倍的藍黑墨水。高倍鏡下觀察射出的刺絲在草履蟲體周圍呈亂絲狀。2、草履蟲對酸刺激的反應用草履蟲培養液濾液配置系列濃度的乙酸溶液（每小組一種濃度）。制作臨時裝片，滴加不同濃度的乙酸（用毛細滴管吸取，將尖端的醋酸液滴與玻片上草履蟲液面輕輕接觸，使酸緩緩地進入草履蟲液層中央，以避免酸液的迅速擴散），觀察草履蟲動態。檢測加入不同濃度乙酸后液層中草履蟲聚集處和避開處的PH。

根據本組和其它組的實驗結果進行分析，說明草履蟲對不同PH的趨性，找出草履蟲最喜酸度。第七頁，共十四頁，編輯于2023年，星期日3、草履蟲對鹽度變化的反應配置系列濃度的氯化鈉溶液（每個小組一種濃度自主選擇），分別置于試管內，做好標記，不得混用。用不同濃度氯化鈉溶液刺激草履蟲。做一個蒸餾水空白對照裝片，其它加入不同濃度的氯化鈉溶液。用毛細滴管（用毛細滴管只滴加極少量密集草履蟲培養液于各玻片上的鹽溶液中，以免稀釋了氯化鈉溶液）吸取密集草履蟲培養液，分別滴入各載玻片溶液中。混勻，加纖維和蓋玻片，五分鐘后顯微鏡下觀察。低倍鏡轉高倍鏡觀察伸縮泡的伸縮。用秒表記錄（記錄伸縮泡收縮周期時，注意跟蹤觀察）伸縮泡的伸縮周期，重復3次計數取平均值，并推算每分鐘伸縮泡的伸縮頻率。觀察記錄，比較草履蟲在蒸餾水和不同濃度氯化鈉溶液中伸縮泡的收縮頻率，分析伸縮泡的調節水分平衡的機制。第八頁，共十四頁，編輯于2023年，星期日（五）草履蟲生殖裝片的觀察取草履蟲分裂生殖和接合生殖裝片，于低倍鏡下觀察。1、草履蟲的分裂生殖裝片觀察草履蟲的無性生殖是橫裂還是縱裂。2、草履蟲的接合生殖裝片觀察兩蟲體在何處接合，分析接合生殖的生物學意義。第九頁，共十四頁，編輯于2023年，星期日四、主要儀器及試劑1、材料：原生動物、草履蟲生殖裝片、原生動物類群示范裝片。2、器具：顯微鏡、體視顯微鏡、解剖器具、載玻片、蓋玻片、棉花纖維、擦鏡紙、毛細滴管、試管、試管架、小燒杯、大燒杯、滴管、培養箱、培養皿、小濾紙片、秒表、鑷子、漏斗架、玻棒、漏斗、精密PH試紙、吸水紙、橡皮吸球

3、試劑：藍黑墨水、冰醋酸、0.1%次甲基藍、洋紅粉末、1%氯化鈉溶液、甘油、蒸餾水。第十頁，共十四頁，編輯于2023年，星期日五、實驗要求本實驗要求同學們在實驗前明確實驗的目的，提前查閱資料，采集、分離培養實驗動物，準備好各種試劑和器材，自行選擇和合理安排實驗項目。實驗操作流程可參考黃詩箋主編的《動物生物學實驗指導》，從圖書館和網上查閱本實驗相關論文，并對查閱的知識進行歸納總結，制定具體的實驗方案，編制科學合理的工作日程安排。第十一頁，共十四頁，編輯于2023年，星期日1、由學生自主設計表1-草履蟲的培養條件和培養基進行草履蟲的分離培養，將實驗現象和數據記錄填入表中，并分析實驗結果。2、由學生自主設計表2-草履蟲對酸度的反應，根據實驗觀察，列表并說明實驗結果，找出最適酸堿度，分析實驗現象。3、由學生自主設計表3-草履蟲對鹽度的反應，觀察記錄，比較草履蟲在蒸餾水和不同濃度氯化鈉溶液中伸縮泡的收縮頻率，分析伸縮泡的調節水分平衡的機制。4、通過實驗總結說明為什么說原生動物的單個細胞是一個完整的能獨立生活的動物個體。5、每位學生繪制一張草履蟲的內部結構，并注明各部分名稱。

六、思考題第十二頁，共十四頁，編輯于2023年，星期日七、實驗報告實驗報告格式按照實驗論文的格式方式書寫，內容應該包括實驗的目的原理、材料用具、實驗的設計思路、具體操作步驟、實驗結果的處理及分析、以及實驗的結論和進一步討論等。同時在實驗報告中要對實驗中出現的特殊