關于高職院校藥物分析中常用儀器分析技術第1頁，共60頁，2023年，2月20日，星期日第一節折光率與比旋光度第2頁，共60頁，2023年，2月20日，星期日折光率第3頁，共60頁，2023年，2月20日，星期日折射率折射率又叫折光率，它是有機化合物的重要物理常數之一，折光率的數值可以作為液體純度的標志。第4頁，共60頁，2023年，2月20日，星期日基本原理當光線自一種透明介質進入另一種透明介質時，由于兩種介質的密度不同，光的進行速度發生變化，從而使傳播方向發生改變，這種現象叫做折射現象，它遵從折射定律。第5頁，共60頁，2023年，2月20日，星期日折射定律折射率是指光線在空氣中（嚴格的講應在真空中）傳播的速度與在其他介質中傳播速度的比值。第6頁，共60頁，2023年，2月20日，星期日折光率(ntλ)《中國藥典》規定采用鈉光D線測定供試品相對于空氣的折光率，除另有規定外，供試品的溫度應為20℃，由此測得的折光率記為n20D

。第7頁，共60頁，2023年，2月20日，星期日測定儀器折光率一般使用阿貝折光儀測定。阿貝折光儀使用日光作為光源，鏡筒中安裝的消色棱鏡可使不同波長的折射光均集中于鈉光D線的位置而達到目鏡。折光儀在使用前應用校正用棱鏡或水進行校正。第8頁，共60頁，2023年，2月20日，星期日第9頁，共60頁，2023年，2月20日，星期日比旋光度第10頁，共60頁，2023年，2月20日，星期日旋光性當有機化合物分子中含有不對稱碳原子時，就表現出具有旋光性第11頁，共60頁，2023年，2月20日，星期日基本原理平面偏振光通過某些光學活性物質的液體或者溶液時，偏振光的振動平面向左或向右旋轉，這種現象叫旋光現象。偏振光旋轉的角度稱為旋光度。第12頁，共60頁，2023年，2月20日，星期日第13頁，共60頁，2023年，2月20日，星期日比旋度偏振光透過長1dm且每1ml含旋光物質1g的溶液，在一定的波長和溫度下測得的旋光度稱為比旋度。溫度為20℃，使用鈉光的D線作光源條件下測定的比旋度記為[α]20D

。第14頁，共60頁，2023年，2月20日，星期日比旋度計算方法液體供試品：[α]20D=100α/(ld)

[α]20D—比旋度D—黃色鈉光α—測得的旋光度l—測定管長度（dm）

c—供試品溶液的濃度（g/100ml）

第15頁，共60頁，2023年，2月20日，星期日結果表示比旋度為“+”表示右旋（即順時針方向旋轉），用“R”表示比旋度為“—”表示左旋（即逆時針方向旋轉），用“L”表示第16頁，共60頁，2023年，2月20日，星期日旋光度的測定方法將測定管用供試液體或固體物質的溶液沖洗數次，緩緩注入供試液體或溶液適量，置于旋光計內檢測讀數，既得供試溶液的旋光度。用同法讀取旋光度3次，取3次的平均數，既得測定的旋光度值。第17頁，共60頁，2023年，2月20日，星期日第二節紫外-可見分光光度法第18頁，共60頁，2023年，2月20日，星期日相關定義光是電磁波，不同波長的光具有不同的能量。物質吸收紫外和可見光區的電磁波而產生的吸收光譜稱為紫外-可見吸收光譜。利用紫外-可見吸收光譜進行定性和定量分析的方法稱為紫外-可見分光光度法。第19頁，共60頁，2023年，2月20日，星期日基本原理分子的價電子吸收了光的能量，由低能量的基態轉變為高能量的激發態的過程稱為躍遷。產生躍遷的必要條件是光子所提供的能量正好與躍遷所需的能量相當，紫外光和可見光所具有的能量，恰好能滿足電子在不同電子能級之間的躍遷。第20頁，共60頁，2023年，2月20日，星期日利用紫外-可見吸收光譜定性分析不同結構的物質分子能級差不同，可以產生不同的紫外-可見吸收光譜，據此可以對物質進行定性分析。第21頁，共60頁，2023年，2月20日，星期日利用紫外-可見吸收光譜定量分析郎伯-比爾定律：A=-lgT=-lgI/I0=EClA—吸收度T—透光率E—吸收系數C—被測物質溶液的濃度l—光路長度第22頁，共60頁，2023年，2月20日，星期日E與C的關系C（mol/L）—E（摩爾吸收系數，ε）C（g/100ml）—E（百分吸收系數，E1%1cm）第23頁，共60頁，2023年，2月20日，星期日紫外分光光度計第24頁，共60頁，2023年，2月20日，星期日紫外-可見分光光譜的應用紫外吸收：200—400nm可見吸收：400—780nm目視比色法第25頁，共60頁，2023年，2月20日，星期日紫外-可見分光光譜的應用1、在鑒別中的應用

（1）對比吸收光譜特征參數；

（2）比較吸收度比值的一致性；

（3）對比吸收光譜的一致性。2、在雜質檢查中的應用3、在含量測定中的應用

（1）對照品比較法；

（2）吸收系數法；

（3）計算分光光度法。第26頁，共60頁，2023年，2月20日，星期日第三節紅外吸收光譜法第27頁，共60頁，2023年，2月20日，星期日相關定義物質分子吸收波數位于4000~400cm-1范圍的紅外光而產生的吸收光譜稱為紅外吸收光譜。利用紅外吸收光譜對物質進行分析的方法稱為紅外分光光度法（縮寫為IR）。第28頁，共60頁，2023年，2月20日，星期日基本原理紅外光譜是由分子的振動、轉動能級引起的光譜。振動過程中，若分子的偶極矩發生變化，則相應的振動稱為紅外活性振動，紅外活性振動產生吸收峰。沒有偶極矩變化的振動稱為紅外非活性振動，紅外非活性振動不產生吸收峰。第29頁，共60頁，2023年，2月20日，星期日紅外吸收光譜連續改變輻射紅外光的波數，記錄紅外光的透光率，就得到了物質的紅外吸收光譜；紅外吸收光譜又稱分子的振-轉光譜。不同分子具有不同的振動、轉動形式和能級，因而具有不同的紅外吸收光譜，據此可進行物質的定性分析。第30頁，共60頁，2023年，2月20日，星期日紅外光譜圖一張紅外光譜圖按其特征大致分為特征區和指紋區。特征區的吸收峰由一些常見的基團或化學鍵的振動產生，具有峰位恒定、峰相對稀疏、易于辨認和歸屬的特點。指紋區內的峰，來源多，既有化學鍵的伸縮振動吸收、彎曲振動吸收，又有泛頻峰等弱吸收，這些峰峰位集中，強度變化大，不易歸屬，但對特定化合物，該區域具有人指紋一樣的特征性。第31頁，共60頁，2023年，2月20日，星期日第32頁，共60頁，2023年，2月20日，星期日紅外光譜儀第33頁，共60頁，2023年，2月20日，星期日紅外光譜應用1、在鑒別中的應用2、在檢查中的應用第34頁，共60頁，2023年，2月20日，星期日第四節氣相色譜分析法第35頁，共60頁，2023年，2月20日，星期日相關定義色譜法是一種物理或物理化學分離分析方法。它先將混合物中各組分分離，而后逐個分析，因此是分析混合物最有力的手段。色譜法具有高靈敏度、高選擇性、高效能、分析速度快及應用廣泛等優點。第36頁，共60頁，2023年，2月20日，星期日色譜法分類1、按流動相與固定相的分子聚集狀態分類：

（1）氣相色譜法、液相色譜法

（2）氣-固色譜法、氣-液色譜法

液-固色譜法、液-液色譜法2、按操作形式分類：

柱色譜法、平面色譜法、電泳法等3、按分離機制分類：

分配色譜法、吸附色譜法、離子交換色譜法

空間排阻色譜法及親和色譜法第37頁，共60頁，2023年，2月20日，星期日氣相色譜法以氣體為流動相的色譜法稱為氣相色譜法（簡稱GC）。氣相色譜法具有分離效能高、靈敏度高、樣品用量少、分析速度快等優點，但受樣品蒸汽壓限制，不適用于難揮發和熱穩定性差的物質的分析。第38頁，共60頁，2023年，2月20日，星期日氣相色譜法基本原理樣品中各組分在固定相與載氣間分配，由于各組分的分配系數不等，它們將按分配系數大小的順序依次被載氣帶出色譜柱。分配系數小的組分先流出，分配系數大的后流出。第39頁，共60頁，2023年，2月20日，星期日氣相色譜法相關概念和術語1、基線：當沒有組分進入檢測器是，色譜流出曲線是一條只反映儀器噪聲隨時間變化的曲線，稱為基線。2、色譜圖和色譜峰：色譜響應信號隨時間的變化曲線稱為色譜圖。流出曲線上的突起部分稱為色譜峰。3、保留值：是用來描述各組分色譜峰在色譜圖中的位置。第40頁，共60頁，2023年，2月20日，星期日色譜峰正常色譜峰：對稱型正態分布曲線。不正常色譜峰：前伸峰、拖尾峰、分叉峰和饅頭峰。第41頁，共60頁，2023年，2月20日，星期日色譜峰相關參數峰高（h）：指峰頂到基線的距離。峰面積（A）：指每個組分的流出曲線與基線間所包圍的面積。峰寬：指色譜峰兩側拐點處所作的切線與峰底相交兩點之間的距離。在峰高1/2處的峰寬稱為半峰寬（W1/2）。第42頁，共60頁，2023年，2月20日，星期日第43頁，共60頁，2023年，2月20日，星期日定性參數（1）死時間（tM）：從進樣開始到惰性組分從柱中流出，呈現濃度極大值所需要的時間。（2）保留時間（tR）：從進樣開始到某個組分色譜峰頂點的時間間隔稱為該組分的保留時間。（3）調整保留時間（t’R）：扣除死時間后的保留時間。（4）死體積（VM）：色譜柱在填充后柱管內固定相顆粒間所剩余的空間、色譜儀中管路和連接頭間的空間以及檢測器的空間的總和。（5）保留體積（VR）：流動相攜帶樣品進入色譜柱，從進樣開始到柱后某個樣品組分出現濃度極大值時，所通過流動相的體積。（6）調整保留體積（V’R）：指扣除死體積后的保留體積。（7）保留指數（I）：用以表示化合物在一定溫度下在某種固定液上的相對保留值。第44頁，共60頁，2023年，2月20日，星期日柱效參數標準偏差（σ）半峰寬（W1/2）峰寬（W）W1/2=2.355σW=4σ=1.699W1/2理論塔板數和理論塔板高度

n=5.54（tR/W1/2）2

H=L/n第45頁，共60頁，2023年，2月20日，星期日分離參數R>1.5作為相鄰兩峰已完全分開的標志第46頁，共60頁，2023年，2月20日，星期日相平衡參數分配系數：在一定的溫度、壓力下，組分在固定相和流動相中平衡濃度的比值K=Cs/Cm

容量因子：在相平衡狀態下組分在固定相與流動相中的質量比k=ms/mm=CsVs/(CmVm)=KVs/Vm第47頁，共60頁，2023年，2月20日，星期日氣相色譜儀氣源進樣及汽化系統色譜柱和柱溫箱檢測器第48頁，共60頁，2023年，2月20日，星期日氣相色譜儀檢測器檢測器類型：1、熱導檢測器（TCD）2、電子捕獲檢測器（ECD）3、氫焰離子化檢測器（FID）檢測器性能的要求：1、靈敏度高；2、穩定性好，噪音低；3、線性范圍寬；4、死體積小，響應快。第49頁，共60頁，2023年，2月20日，星期日氣相色譜的應用操作條件的選擇載氣及其流速的選擇色譜柱的選擇柱溫的選擇汽化室溫度的選擇進樣量與進樣技術第50頁，共60頁，2023年，2月20日，星期日氣相色譜定性分析利用保留值定性已知物對照法利用相對保留值定性利用保留指數定性（查閱文獻保留值）聯機定性氣相色譜的應用第51頁，共60頁，2023年，2月20日，星期日氣相色譜定量分析歸一化法標準曲線法內標法標準加入法氣相色譜的應用第52頁，共60頁，2023年，2月20日，星期日氣相色譜與質譜聯用技術簡介第53頁，共60頁，2023年，2月20日，星期日第五節高效液相色譜法第54頁，共60頁，2023年，2月20日，星期日高效液相色譜法分類液