ICS65160

X85.

備案號29841—2010

:

中華人民共和國煙草行業標準

YC/T365—2010

煙草病毒的測定

逆轉錄-聚合酶鏈反應法

Tobaccovirusdetection—Reversetranscription-polymerasechainreaction

2010-10-11發布2010-10-15實施

國家煙草專賣局發布

YC/T365—2010

前言

本標準按照給出的規則起草

GB/T1.1—2009。

請注意本文件的某些內容可能涉及專利本文件的發布機構不承擔識別這些專利的責任

。。

本標準由國家煙草專賣局提出

。

本標準由全國煙草標準化技術委員會農業分技術委員會歸口

(SAC/TC144/SC2)。

本標準起草單位中國煙草總公司黑龍江省公司牡丹江煙草科學研究所

:。

本標準主要起草人顏培強武常青閆新甫萬秀清喬嬋孫劍萍郭兆奎李麗杰邱恩建

:、、、、、、、、、

王春軍元野劉德育陳榮平黃磊

、、、、。

Ⅰ

YC/T365—2010

煙草病毒的測定

逆轉錄-聚合酶鏈反應法

1范圍

本標準規定了用逆轉錄聚合酶鏈反應法測定煙草種子幼苗及鮮煙葉樣品中的煙草花葉病毒

-、

馬鈴薯病毒黃瓜花葉病毒和煙草蝕紋病毒

(TMV)、Y(PVY)、(CMV)(TEV)。

本標準適用于煙草種子幼苗和鮮煙葉樣品中煙草花葉病毒馬鈴薯病毒黃瓜

、(TMV)、Y(PVY)、

花葉病毒和煙草蝕紋病毒的測定

(CMV)(TEV)。

2規范性引用文件

下列文件對于本文件的應用是必不可少的凡是注日期的引用文件僅所注日期的版本適用于本

。,

文件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于本文件

。,()。

煙草及煙草制品轉基因檢測方法

GB/T24310—2009

3術語和定義

界定的以及下列術語和定義適用于本文件為了便于使用以下重復列出了

GB/T24310—2009。,

中的一些術語和定義

GB/T24310—2009。

31

.

聚合酶鏈式反應擴增polymerasechainreactionamplification

模板序列在含有種脫氧核糖核酸引物聚合酶等的反應體系中在儀器中

DNA4(dNTPs)、、DNA,

通過多次高溫變性退火和延伸的循環過程最終使目標片段以幾何倍數擴增

、,DNA。

定義

[GB/T24310—2009,3.6]

32

.

逆轉錄-聚合酶鏈反應reversetranscription-polymerasechainreaction

提取組織或細胞中的總以其中的作為模板采用或隨機引物

RNA,mRNA,Oligo(dT18)(5.1)

利用逆轉錄酶反轉錄成再以為模板進行擴增而獲得目的基因或檢測

(5.2)cDNA,cDNAPCR,

基因表達

。

33

.

陽性對照positivecontrol

經鑒定為含有檢測目標成分的對照煙草樣品

。

定義

[GB/T24310—2009,3.11]

34

.

陰性對照negativecontrol

經鑒定為不含有檢測目標成分