ICS65020

B61.

中華人民共和國林業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)

LY/T2756—2016

白蠟品種分子鑒定方法—

SRAP分子標(biāo)記法

MolecularidentificationmethodforfraxinusvarietieswithSRAP

seuence-relatedamlifiedolmorhismmolecularmarkers

(qppyp)

2016-10-19發(fā)布2017-01-01實(shí)施

國家林業(yè)局發(fā)布

中華人民共和國林業(yè)

行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)

白蠟品種分子鑒定方法—

SRAP分子標(biāo)記法

LY/T2756—2016

*

中國標(biāo)準(zhǔn)出版社出版發(fā)行

北京市朝陽區(qū)和平里西街甲號

2(100029)

北京市西城區(qū)三里河北街號

16(100045)

網(wǎng)址

:

服務(wù)熱線

:400-168-0010

年月第一版

20192

*

書號

:155066·2-33049

版權(quán)專有侵權(quán)必究

LY/T2756—2016

前言

本標(biāo)準(zhǔn)按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本標(biāo)準(zhǔn)由遼寧省林業(yè)廳提出

。

本標(biāo)準(zhǔn)由國家林業(yè)局歸口

。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位遼寧省林業(yè)科學(xué)研究院沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)錦州市林業(yè)科學(xué)研究所

:、、。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人陳罡范俊崗魏忠平葉景豐馬冬菁郭志富劉平劉怡菲孟凡金潘文利

:、、、、、、、、、、

佟麗馮健劉紅民王騫春高英旭楊鶴田永霞王琴劉薇伊宏峰金山趙麗輝

、、、、、、、、、、、。

Ⅰ

LY/T2756—2016

白蠟品種分子鑒定方法—

SRAP分子標(biāo)記法

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了白蠟品種分子鑒定方法分子標(biāo)記法的操作程序和分析方法

—SRAP。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于利用相關(guān)序列擴(kuò)增多態(tài)性法對白蠟品種種鑒定的實(shí)驗(yàn)過程

(SRAP)()。

2原理

通過設(shè)計(jì)一對引物對白蠟基因組進(jìn)行擴(kuò)增正向引物含有個(gè)堿基對外顯子

DNA。(F-primer)17,

進(jìn)行特異擴(kuò)增反向引物含有個(gè)堿基對內(nèi)含子區(qū)域啟動子區(qū)域進(jìn)行擴(kuò)增因個(gè)體不同

;(R-primer)18,、。

以及物種的內(nèi)含子啟動子與間隔區(qū)長度不同而產(chǎn)生多態(tài)性最終通過非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳將

、。

這些特異的多態(tài)性片段分離開來通過比較待測樣品和對照品種指紋譜帶數(shù)據(jù)的差異來判斷待

,DNA,

測樣品與對照品種是否為相同品種

。

3術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本文件

。

31

.

相關(guān)序列多態(tài)性sequence-relatedamplifiedpolymorphismSRAP

;

利用一對引物對開放閱讀框進(jìn)行擴(kuò)增一對引物包括正向引物和反

ORFs(openreadingframes,),

向引物因個(gè)體不同以及物種的內(nèi)含子啟動子與間隔序列長度不等而產(chǎn)生多態(tài)性

,、。

4儀器和設(shè)備

41擴(kuò)增儀

.PCR。

42瓊脂糖凝膠電泳系統(tǒng)

.。

43非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳系統(tǒng)

.。

44凝膠成像系統(tǒng)和照相系統(tǒng)

.。

45超純水系統(tǒng)

.。

46低溫高速冷凍離心機(jī)

.。

47超微量紫外可見分光光度計(jì)

./。

48高壓滅菌鍋

.。

49液氮罐

.。

410超低溫冰箱

.。

4