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文檔簡介
植物水分狀況的測定水是原生質的主要組成成分,占原生質總量的70%-90%。植物水分狀況對植物生理活動具有重要影響。植物含水量、水勢、滲透勢是植物水分狀況的重要指標,對于植物水分生理的科學研究以及農業生產實踐具有重要指導意義。1植物含水量的測定實驗原理:利用水遇熱蒸發的原理,加熱使植物體內的水分蒸發,從而測定植物的含水量。
實驗步驟:將待測的植物材料剪成小塊,放在稱量紙上迅速稱鮮重(FW)。將植物材料放入稱量瓶或大信封中,放入烘箱中,在105℃下殺青10分鐘,然后將溫度調到80℃烘至恒重,不同植物材料所需要的時間不同,時間從10~24小時不等。稱取植物材料的干重(DW)。實驗結果:含水量(WC)=(FW-DW)/FW×100%2水勢的測定水勢的概念自由能:一個體系中可以用于做功的能量?;瘜W勢:偏摩爾自由能。化學反應能否進行、或物體能否從一體系轉移到另一體系,要看反應前后或兩全體系的自由能或化學勢的變化。水勢是一物理化學概念在植物生理學中的應用,是指偏摩爾體積水的化學勢。單位是壓強單位。水勢的意義水勢決定了水分移動的方向,水分總是從水勢高的區域向水勢低的區域自發遷移。成熟植物細胞水勢的組成:
Ψ=Ψs+ΨpΨs溶質勢/滲透勢由于溶液中溶質顆粒的存在而使水勢降低的值。純水的溶質勢為0,溶液的滲透勢可根據
Van‘tHoffEquation計算:Ψs=-CiRT
2.ψp壓力勢壓力勢是指外界(如細胞壁)對細胞的壓力而使水勢增大的值。一般情況下細胞處于膨脹狀態,原生質體壓迫細胞壁產生膨壓,而細胞壁反過來反作用于原生質體使產生壓力勢。Ψg重力勢由于高度的存在而使水勢增加的值。Ψg=ρgh,一般不考慮。小液流法測水勢
實驗原理
水勢是指偏摩爾體積水的化學勢,規定純水的水勢為零,水分總是從水勢高處流向水勢低處,根據這一原理,可以用小液流法、露點微伏壓計法等測定植物組織的水勢。將植物材料切成小塊,浸泡在不同濃度的蔗糖溶液中,由于植物材料與蔗糖溶液間水勢梯度的存在,導致蔗糖溶液從植物材料中吸水、失水或保持動態平衡,從而使蔗糖溶液變稀、變濃或保持濃度不變;由此可以找到與植物材料水勢相當的蔗糖溶液濃度。算出植物組織的水勢。若組織水勢大于蔗糖水勢→組織失水→蔗糖溶液變稀→小液流上升實驗材料與試劑中試管;青霉素小瓶;彎頭毛細吸管;單面刀片;打孔器;解剖針;移液管;鑷子;蔗糖;甲基蘭實驗步驟配制一系列不同濃度的蔗糖溶液,濃度分別為0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6M。取6只中試管編號,分別加入10ml不同濃度的蔗糖溶液;同時取6個青霉素小瓶,編號后分別加入1ml不同濃度的蔗糖溶液。取植物材料,用打孔器打成直徑0.7cm左右的小條,用單面刀片切成2~3mm厚的小圓周片,分別加入裝有不同濃度蔗糖溶液的青霉素小瓶中,每個小瓶中放5片(依植物材料的不同可做不同處理),加塞,放置30min,其間搖動數次以加速溶液與植物組織間的水分交換。打開瓶塞,用解剖針向每個小瓶中挑入少許甲基蘭,搖勻,使溶液呈藍色。用毛細吸管依次從青霉素小瓶中吸取少量溶液,小心插入裝有相同濃度蔗糖的中試管的中部,輕輕擠出吸管中的藍色液體,觀察記錄小液流的方向。實驗結果蔗糖濃度(M)0.10.20.30.40.50.6小液流方向小液流上升,說明組織水勢大于溶液水勢結果分析
如果小液流上升,說明組織水勢高于蔗糖溶液水勢,組織排水,蔗糖濃度變低;如果小液流下降,說明組織水勢低于蔗糖溶液水勢,組織吸水,蔗糖濃度變大;如果小液流不動,說明組織水勢與蔗糖溶液水勢相同,二者間無水分量的交換。
表:蔗糖溶液濃度與其滲透勢
蔗糖溶液濃度(mol/L)滲透勢(大氣壓)0.1-2.640.15-3.960.2-5.290.25-6.700.3-8.130.35-9.580.4-11.110.45-12.690.5-14.310.55-15.990.6-17.770.65-19.610.7-21.49注意1.
蔗糖溶液用前一定要搖勻,時間放久了的蔗糖溶液會分層,影響結果。2.
彎頭毛細吸管要各個濃度專用3質壁分離法測定植物細胞滲透勢實驗目的滲透勢是水勢的組分之一,是指由于細胞內溶質顆粒的存在而使水勢下降的數值,純水的滲透勢為零,溶液的滲透勢為負值。植物細胞的滲透勢是植物的一個重要生理指標,對于植物的水分代謝、生長及抗性都具有重要的意義。常用于測定植物細胞與組織水勢的方法有質壁分離法、冰點降低法、蒸汽壓降低法等。成熟植物細胞水勢的組成:
Ψ=Ψs+Ψp當發生質壁分離時,ψp=0,這時Ψ=Ψs實驗原理
生活細胞的原生質膜是一種選擇透性膜,可以看作是半透膜,它對于水是全透性的,而對于一些溶質如蔗糖的透性較低。因此當把植物組織放在一定濃度的外液中,組織內外的水分便可通過原生質膜根據水勢梯度的方向而發生水分的遷移,當外液濃度較高時(高滲溶液),細胞內的水分便向外滲出,引起質壁分離;而在外液濃度低時(低滲溶液),外液中的水則進入細胞內。當細胞在一定濃度的外液中剛剛發生質壁分離時(初始質壁分離,質壁分離僅在細胞角隅處發生),細胞的壓力勢等于零,細胞的滲透勢等于細胞的水勢,也就等于外液的滲透勢。該溶液即稱為細胞或組織的等滲溶液,其濃度稱為等滲濃度。
高滲溶液質壁分離現象——水分的滲透作用實驗設備與材料
顯微鏡;鑷子;載玻片;蓋玻片;刀片;培養皿;移液管;蔗糖;洋蔥
實驗步驟1.
配制一系列不同濃度的蔗糖溶液,濃度分別為0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6M。2.
取6個培養皿,編號,分別吸取上述濃度的蔗糖溶液各10ml放于培養皿內。3.
用鑷子撕取洋蔥的外表皮投入各濃度的蔗糖溶液中,使其完全浸沒。投入時先從高濃度開始,每隔5min向下一濃度放2~3片洋蔥表皮。4.
在洋蔥表皮在各濃度的蔗糖溶液中平衡30min后,從高濃度開始依次取出放入顯微鏡下觀察質壁分離的情況(低倍鏡即可),記錄觀察結果。實驗結果蔗糖濃度(M)0.10.20.30.40.50.6質壁分離情況結果分析
注意尋找在兩個相鄰濃度的蔗糖溶液中,其中一個大約有50%的細胞發生初始質壁質壁分離,而在其后一個濃度的蔗糖溶液中不發生質壁分離,以這兩個濃度的平均濃度作為等滲濃度,其對應的滲透勢即為細胞的滲透勢。
未發生質壁分離箭頭所示角隅處發生初始質壁分離已在很大程度上發生質壁分離箭頭所示細胞在撕表皮時被撕破,細胞內容物流失表:蔗糖溶液濃度與其滲透勢
蔗糖溶液濃度(mol/L)滲透勢(大氣壓)0.1-2.640.15-3.960.2-5.290.25-6.700.3-8.130.35-9.580.4
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