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文檔簡介
具有兩個或兩個以上肽鍵的化合物在堿性條件下與Cu2+反應生成絡合物含醛基的可溶性還原糖將Cu(OH)2還原為Cu2O沉淀反應原理0.01g/mLCuSO4溶液0.1g/mL
NaOH溶液0.05g/mLCuSO4溶液0.1g/mL
NaOH溶液B液A液乙液甲液成分雙縮脲試劑斐林試劑比較項目都含有NaOH、CuSO4兩種成分,且所用NaOH溶液濃度都是0.1g/mL相同點樣液變紫色樣液淺藍色→棕色→磚紅色反應現象不需加熱50~65℃水浴加熱反應條件先加入A液2mL搖勻,再加3~4滴B液搖勻甲、乙兩液等量混勻后立即使用添加順序選項取樣時間檢測試劑檢測結果A第10d斐林試劑不顯色B第20d雙縮脲試劑不顯色C第30d蘇丹Ⅲ染液橘黃色D第40d碘液藍色
第10d有可溶性糖,不排除有還原糖的可能,故加入斐林試劑,水浴加熱后可能出現磚紅色沉淀;種子中一定有蛋白質,加入雙縮脲試劑后會出現紫色反應;第30d種子中有脂肪,與蘇丹Ⅲ染液發生反應,呈現橘黃色;第40d種子中無淀粉,加入碘液后不會呈現藍色。發芽的小麥種子勻漿中含有淀粉酶,淀粉酶能使小麥種子中的淀粉水解產生麥芽糖等還原糖。
1~4號試管中加入斐林試劑后,因1、3號試管中是蒸餾水而無還原糖,故顯示斐林試劑本身的藍色,2號試管中雖含還原糖,但未水浴加熱,故仍呈藍色,4號試管進行水浴加熱后出現磚紅色沉淀。
用于鑒定還原糖的斐林試劑甲液和乙液,必須混合均勻后再使用,而鑒定蛋白質時需先加A液,再加B液,且兩者CuSO4溶液濃度也不同;用雙縮脲試劑鑒定蛋白質時,不需要加熱。
溶液雙縮脲試劑碘液斐林試劑甲+--乙-++-甲、乙混合+++根據溶液甲中的顏色變化可知其含有蛋白質;根據乙溶液中的顏色變化可知其含有淀粉;甲、乙混合后,兩溶液中的物質發生反應產生了還原糖,由此可知,甲溶液中含有淀粉酶,乙溶液中含有淀粉。20℃和30℃培養條件下相比較,30℃時淀粉酶的活性相對較高,淀粉酶催淀粉水解成麥芽糖的速率更快,相同條件下產生的麥芽糖更多。麥芽糖屬于還原糖,與斐林試劑反應生成磚紅色沉淀,麥芽糖越多顯色越明顯,斐林試劑本身為藍色,可得出甲試管呈淺磚紅色,乙試管呈磚紅色,丙試管呈藍色。試劑種類碘液蘇丹
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