標準解讀

《GB/T 36871-2018 豬傳染性胃腸炎病毒、豬流行性腹瀉病毒和豬輪狀病毒多重RT-PCR檢測方法》是一項國家標準,旨在提供一種能夠同時檢測三種對養豬業構成威脅的病毒的方法:豬傳染性胃腸炎病毒(TGEV)、豬流行性腹瀉病毒(PEDV)以及豬輪狀病毒(PoRV)。該標準適用于疑似感染這些病原體的豬只樣本中相關病毒核酸的定性檢測。

標準詳細描述了從樣品采集到結果分析的整個流程,包括但不限于:

  • 樣品類型及保存條件;
  • RNA提取的具體步驟與所需試劑;
  • RT-PCR反應體系構建,如引物設計原則、濃度選擇等;
  • PCR擴增程序設置;
  • 結果判定依據。

通過采用特異性引物對目標區域進行擴增,并利用凝膠電泳技術來觀察特定大小片段的存在與否,從而實現對上述三種病毒的同時篩查。此外,《GB/T 36871-2018》還提供了實驗室內質量控制措施建議,確保檢測過程中的準確性和可靠性。

此標準為獸醫實驗室工作人員提供了標準化的操作指南,有助于提高診斷效率,及時采取防控措施以減少經濟損失。


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....

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  • 現行
  • 正在執行有效
  • 2018-09-17 頒布
  • 2019-04-01 實施
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GB/T 36871-2018豬傳染性胃腸炎病毒、豬流行性腹瀉病毒和豬輪狀病毒多重RT-PCR檢測方法-免費下載試讀頁

文檔簡介

ICS11220

B41.

中華人民共和國國家標準

GB/T36871—2018

豬傳染性胃腸炎病毒豬流行性腹瀉病毒和

、

豬輪狀病毒多重RT-PCR檢測方法

MultilexRT-PCRtodetectorcinetransmissibleastroenteritisvirus

ppg,

porcineepidemicdiarrheavirusandporcinerotavirus

2018-09-17發布2019-04-01實施

國家市場監督管理總局發布

中國國家標準化管理委員會

GB/T36871—2018

前言

本標準按照給出的規則起草

GB/T1.1—2009。

本標準由中華人民共和國農業農村部提出

。

本標準由全國動物衛生標準化技術委員會歸口

(SAC/TC181)。

本標準起草單位華中農業大學中國動物衛生與流行病學中心

:、。

本標準主要起草人何啟蓋庫旭鋼張坤陳芳洲范盛先孟憲榮陳品姜雯陳煥春

:、、、、、、、、。

GB/T36871—2018

豬傳染性胃腸炎病毒豬流行性腹瀉病毒和

、

豬輪狀病毒多重RT-PCR檢測方法

1范圍

本標準規定了豬傳染性胃腸炎病毒豬流行

(porcinetransmissiblegastroenteritisvirus,TGEV)、

性腹瀉病毒和豬輪狀病毒的多重

(porcineepidemicdiarrheavirus,PEDV)(porcinerotavirus,PoRV)

檢測方法

RT-PCR。

本標準適用于豬傳染性胃腸炎病毒豬流行性腹瀉病毒和豬輪狀病毒的核酸檢測

、。

2縮略語

下列縮略語適用于本文件

。

豬傳染性胃腸炎病毒

TGEV:(porcinetransmissiblegastroenteritisvirus)

豬流行性腹瀉病毒

PEDV:(porcineepidemicdiarrheavirus)

豬輪狀病毒

PoRV:(porcinerotavirus)

逆轉錄聚合酶鏈式反應

RT-PCR:-(reversetranscription-polymerasechainreaction)

磷酸鹽緩沖液

PBS:(phosphatebuffersaline)

電泳緩沖液

TAE:(tris-acetate-ethylenediaminetetraaceticacidbuffer)

半數細胞感染量

TCID50:(mediantissuecultureinfectivedose)

核糖核酸

RNA:(ribonucleicacid)

焦碳酸二乙酯

DEPC:(diethylpyrocarbonate)

3試劑和儀器設備

除另有規定外所用試劑均為分析純提取所用試劑應使用無酶的容器分裝

,。RNARNA。

31儀器

.

311生物安全柜

..。

312高速冷凍離心機

..。

313組織勻漿器或研缽

..。

314儀

..PCR。

315水平電泳槽

..。

316凝膠成像系統

..。

317紫外透射儀

..。

318冰箱

..2℃~8℃。

319冰箱

..-20℃。

3110單道微量移液器等規格

..(0.5μL~10μL、10μL~50μL、20μL~200

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