細菌感染的檢測方法與防治原則第13章1、掌握細菌學診斷標本的采集與運送2、熟悉細菌感染的防治原則3、熟悉人工自動免疫、人工被動免疫的區別4、熟悉死疫苗和活疫苗的區別5、了解抗菌藥物的作用和耐藥機制，細菌耐藥性的防治原則6、了解細菌學診斷標本的基本檢驗過程，常用細菌學檢查的方法學習要求細菌感染檢查目的明確病因指導臨床治療為預防和監測感染性疾病提供依據細菌檢查方法根據患者臨床癥狀采集適宜標本→對標本中病原菌進行分離培養→對可疑菌落進行細菌學形態學、生化試驗（代謝產物物質）、血清學檢查一、細菌標本的采集和運送正確取材根據細菌感染部位及病程采集適宜的標本采集病變明顯的部位無菌操作在用抗菌藥物之前采集盡快送驗2H內病原菌的檢查程序藥物敏感試驗標本直接涂片鏡檢分離培養形態特征生化試驗血清學試驗動物試驗明確診斷

初步鑒定分子生物學技術（核酸雜交、聚合酶鏈反應（PCR）其他檢測技術形態學檢驗凡是形態和染色性具有明顯特征的細菌，可以直接涂片鏡檢，作出初步鑒定不染色觀察：直接觀察適用于具有形態和染色性上具有特征的病原菌，如腦膜炎奈瑟菌G-腎形雙球菌、抗酸染色陽性的結核桿菌直接涂片鏡檢結核桿菌染色觀察革蘭染色法：1884年丹麥科學家Gram創建抗酸染色法:1882年由埃利希首創用復紅初染色，用乙醇脫色，再用美藍復染色，分枝桿菌仍然為紅色，而其他細菌及背景中的物質為蘭色。分枝桿菌為紅色革蘭染色意義鑒別細菌：分成G+菌和G－菌選擇藥物：G+菌和G－菌對抗菌藥物敏感性不一樣。與致病性有關：G+菌產生外毒素，G－菌產生內毒素分離培養大多數細菌的形態與染色性并無顯著特征，因此需要分離培養后獲得純種菌。如腸道桿菌均為G-桿菌，菌落形態亦相同細菌的分離培養分離培養是利用培養基進行培養，使細菌能分散生長出成單個菌落。各種培養基分離培養分離培養出菌落，還需要用以下方法作進一步的細菌鑒定，才能檢測細菌種的特性、對藥物的敏感性等。觀察菌落特征：化膿性鏈球菌—小而透明、溶血環觀察細菌染色特征做細菌生化試驗做細菌血清學試驗動物試驗藥物敏感試驗（AST）血清學試驗原理用已知抗原或抗體檢測患者體液中未知的抗原或抗體。血清學鑒定用已知特異性抗體檢測患者體液中未知的細菌抗原（O抗原、H抗體等）血清學診斷用已知的細菌抗原檢測患者血清中的抗體及其效價的動態變化，可作為某些傳染病的輔助診斷血清學試驗種類凝集試驗、中和試驗、免疫熒光法、酶聯免疫吸附試驗等標本雙份血清標本，恢復期血清抗體效價比急性期升高≥4倍者才有意義。單份血清效價超過一定標準才有診斷意義第2節細菌感染的防治原則特異性防治人工主動免疫人工被動免疫非特異性防治應用抗菌素治療等人工主動免疫將疫苗或類毒素接種于人體，使機體獲得免疫力的一種防治細菌感染的方法主要疫苗有死疫苗選用免疫原性強的細菌，經人工培養后，用理化方法殺死而成。如傷寒、霍亂、狂犬病疫苗活疫苗用減毒或無毒力的活菌制成。如天花、脊髓灰質炎減毒活疫苗區別點死疫苗活疫苗制劑特點死，強毒株活,減毒株接種劑量與特點量較大，2~3次量較小，1次保存及有效期易保存，約1年不易保存，4℃數周免疫效果較低，維持數月~2年較高，維持3~5年甚至更長人工主動免疫類毒素利用某些細菌的外毒素用甲醛等處理后，使其失去毒性但仍保留抗原性的生物制品，如白、百、破三聯疫苗，可同時預防三種疾病人工被動免疫采用人工方式向機體注射含有他人或動物產生的免疫血清或免疫球蛋白抗體等免疫制劑，使機體立刻獲得免疫力主要生物制品抗毒素主要用于治療或緊急預防細菌外毒素引起的疾病，如破傷風抗毒素等抗菌血清現已少用胎盤球蛋白和丙種球蛋白內含多價抗體，可抗多種病原體及其毒素，可作為麻疹、甲肝等病的治療或緊急預防區別要點人工主動免疫人工被動免疫免疫物質抗原抗體或細胞因子等免疫出現時間慢，2~4周快，立即免疫維持時間長，數年~數月短，2~3周主要用途預防治療或緊急預防人工主動免疫與人工被動免疫比較細菌感染的抗菌藥物治療抗菌藥物一般是指具有殺菌或抑菌活性的藥物可由細菌、放線菌、真菌等微生物經培養而得到，或用化學半合成法制造的相同或類似的物質，也可化學全合成細菌感染的抗菌藥物治療（一）抗菌藥物的種類?-內酰胺類：青霉素、頭胞菌素大環內酯類：紅霉素、阿奇霉素、羅紅霉素氨基糖苷類：鏈、慶大、卡那霉素四環類：四環素氯霉素人工合成：喹諾酮類、磺胺類其他抗生素：糖肽類包括萬古霉素和替考拉寧（二）抗菌藥物的作用機制影響細菌細胞壁的合成：青霉素損傷細胞膜的結構：多黏菌素、兩性霉素B影響蛋白質的合成鏈、新、卡那、慶大（作用于30S亞基）氯、林可、紅（作用于50S亞基）抑制核酸的合成：喹諾酮類、磺胺類（三）選擇抗菌藥物治療的基本原則1、確定用藥指征（細菌培養）2、根據藥代動力學選擇藥物（抑菌濃度、避免毒副作用）3、根據個體因素選擇藥物（免疫狀態、感染情況、過敏史、遺傳、年齡等）（四）細菌的耐藥性指細菌對藥物所具有的相對抵抗性。耐藥性的程度：該藥對細菌的最小抑菌濃度（MIC）表示。如果此種藥物的治療濃度大于MIC為敏感，反之為耐藥。耐藥性的逐漸增加是影響療效的嚴重問題！超級病菌加拿大醫學會雜志上公布了一份研究報告。一種普通的腸道細菌——難辨梭狀芽孢桿菌歷經兩年變異，已成為致命的“超級病菌”，可引起６５歲以上老年人和服用抗生素的病人產生嚴重痢疾，并最終致死。從２００３年年初至今，已使這家醫院的１００名病人死亡。超級病菌截至上世紀末，全世界每年死于細菌性感染的人數已達到２０００萬，這是４０年前的３倍。造成病死率升高的主要原因是耐藥菌，由于抗菌藥無法控制耐藥菌引起的感染，最終導致病人死亡。（四）細菌的耐藥機制1、天然固有的耐藥性2、染色體突變獲得耐藥性3、質粒介導的耐藥性（五）防止細菌產生耐藥性的基本措施1、選用抗菌作用強，窄譜抗菌藥物2、足劑量、足療程，減少耐藥變異菌株的

產生3、聯合用藥4、慎重進行預防性用藥5、對已知耐藥菌感染患者采取隔離措施6、加強抗菌藥物規范化管理（六）抗菌藥物敏感試驗（AST）在體外測定抗菌藥物抑制或殺死細菌能力的試驗。用途1、指導臨床合理用藥：旨在了解病原微生物對各種抗生素的敏感（或耐受）程度，以指導臨床合理選用抗生素藥物2、監測細菌耐藥性變異情況，控制耐藥性的發生和發展（六）抗菌藥物敏感試驗（AST）方法其大致方法是：從病人的感染部位采取含致病菌的標本，接種在適當的培養基上，于一定條件下培養；同時將分別沾有一定量各種抗生素的紙片貼在培養基表面，培養一定時間后觀察結果。由于致病菌對各種抗生素的敏感程度不同，在藥物紙片周圍便出現不同