七白膏對中波紫外線誘導豚鼠色素沉著模型的影響研究任金平;王平;王媚;倪亞杰【摘要】ObjectiveToobserveinfluenceofsevenwhitecreamonguineapigspigmentationmodelsinducedbyultravioletB(UVB).MethodsNB-UVBinducedpigmentationanimalmodels.Afterestablishingmodels,theareasofpigmentationweredividedintofourgroups:traditionalChineseherbsevenwhitecreamgroup,2%hydroquinonegroup,largeheadatractylodesrhizomegroupandsinglematrixgroup,andthencoatedthemoncorrespondinglesions.Aftertreamtmentforfourweeks,theefficacyofthetesteddrugwasevaluatedcomprehensivelybysuchmeasuresasmelaninindex,melanocyte,melaninaswellasthehistopathologyofskin.ResultsItshowedthatthetesteddrugcouldgreatlydecreasethelevelofmelaninindex,restraintheactivityofmelanocyte,reducethegenerationofmelanin,andrelievepigmentationcausedbyUVB.ConclusionSevenwhitecreamhasobvioustreatmentfunctiontoNB-UVB-inducedpigmentation,anditpossiblemechanismsareinhibitingtheproliferationofmelanocytesanddecreasingmelaningeneration.(ultravioletB,UVB)誘導的色素沉著豚鼠模型的影響.方法紫外線光療儀誘導建立色素沉著豚鼠模型.建模成功后,將豚鼠背部色素沉著區域分為七白膏組、2％氫醌乳膏組、白術單體組和單基質乳44膚進行黑色素指數、黑素顆粒、黑素細胞以及皮膚組織病理學檢查觀察藥物的療效和安全性.結果外用七白膏可顯著降低皮膚黑色素指數水平,抑制黑素細胞活性,減UVBUVB誘導的豚鼠皮【期刊名稱】《中國中西醫結合皮膚性病學雜志》【年(卷),期】2013(012)001【總頁數】4頁(P9-12)【關鍵詞】七白膏;中波紫外線;色素沉著;豚鼠【作者】任金平;王平;王媚;倪?杰【作者單位】浙江中醫藥大學,杭州310053【正文語種】中文【中圖分類】R758.5+4皮膚色素沉著臨床十分普遍，嚴重者損容，給患者帶來很大的心理負擔，影響患者生活質量。日光中的中波紫外線被認為是引起皮膚色素沉著的主要原因。由于色素沉著的發病機制至今仍未完全闡明，盡管臨床上治療方法層出不群，但一直缺乏起效較快、有效率高、不良反應小、復發率低的治療方法。近年來中藥對皮膚色素沉著的改善作用引起廣泛關注，臨床上外用中藥美白制劑治療黃褐斑等皮膚色素沉著有效，七白膏就是其中具有代表性的的一個。本研究選擇七白膏，應用于中波紫外來客觀評價藥物的治療作用及可能的作用機制。材料與方法材料動物采用普通級健康雄性棕黃色豚鼠1010240～260g，4藥物中藥七白膏由白術、白芷、白芨、白蘞、白附子、白茯苓、細辛外加雞子白組成[1]，各味中藥均購自江蘇江陰天江藥業有限公司，委托專業藥師進行質量鑒定，經杭州市第三人民醫院制劑室制成乳膏制劑；2%氫醌乳膏購自廣東人H2004008820110503；白術單體乳膏和單基質乳膏由杭州市第三人民醫院制劑室制作。儀器SS-04B（上海希格瑪高技術有限公司）；MPA9CK）；皮膚共聚焦激光掃描顯微鏡(confocallaserscanningmicroscopy，CLSMVIVASCOPE1500nm16.0mW；黑素染色試劑盒（MST-8015）購自福州邁新生物技術開發有限公司。方法色素沉著模型制作使用SS-04B療儀正對豚鼠皮膚距皮膚15cm左右，根據文獻[2]每次照射能量為500mJ/cm2，隔日1次，共3次。每次照射后豚鼠皮膚可出現輕度發紅，但無腫脹，無水皰、血皰。4予七白膏藥膏、2%氫醌乳膏、白術單體和單基質乳膏外涂，2/d431黑色素指數測定應用MPA94周后分別測定豚鼠背部各區域皮膚黑色素指數變化?；铙w下黑色素及黑素細胞觀察應用CLSM4組織病理觀察豚鼠皮膚常規石蠟切片，FeSO45統計學方法數據用均數±標準差（±s）表示，各組間采用tP<0.05SPSS17.0結果皮膚顏色變化SS-04B（1500mJ/cm2）豚鼠背1d，3d5～7d1驗組用藥過程中未見明顯紅斑、脫屑等不良刺激，用藥 4周后色素沉著顯著減退2%氫醌組，用藥4～6d皮膚出現發紅、脫屑，4周后色素沉著明顯減退；白術單體組用藥過程中未見發紅、脫屑，用藥4周后色素減退不明顯；單基質組4周后未見明顯色素減退。黑色素指數比較31數較照射前顯著升高（P<0.01），1。1照光前后豚鼠皮膚黑色素指數比較（±s）注：與照光前比較，*P<0.01組別n黑色素指數照光前40170.00±60.36照光后40352.50±91.35*4前無明顯變化（P>0.05）；44（P<0.01），七白膏組連用4周后，黑色素指數較用藥前顯著下降（P<0.01）。白術單體組與單基質乳膏組相比黑色素指數差異無統計學意義（P>0.05）；2%氫醌組與單基質乳膏組相比黑色素指數明顯下降（P<0.01），較白術單體組明顯下降（P<0.01）；七白膏組與單基質乳膏組相比黑色素指數顯著下降（P<0.01），與白術單體組相比明顯下降（P<0.01）但與2%氫醌組比較，差異無統計學意義（P>0.05）。見表2。表2藥物干預前后各組皮膚黑色素指數比較（±s）注：*P<0.01；△P>0.05。組別n藥物干預前藥物干預后單基質乳膏組10白術單體乳膏組10353.30±101.62322.60±85.63△344.0086.97323.20±85.06△2%氫醌乳膏組1010354.7087.41208.90±66.54*358.00±101.34203.20±63.43*CLSM42%氫醌組與七白膏組樹枝狀黑素細胞數量及色1。1CLSM③2%氫醌：黑色素顆粒明顯減少，殘留少量樹枝狀黑素細胞；④七白膏：黑色素顆粒顯著減少，局部可見數量不定樹枝狀黑素細胞；⑤白術單體乳膏：見較多折光明亮的黑素顆粒和黑素細胞；⑥單基質乳膏：可見大量折光明亮的黑色素顆粒和黑素細胞。444少；七白膏組外用4周后黑素顆粒較單基質乳膏組明顯減少。見圖2。組織切片中黑素顆粒計數結果見表4。圖2照光后及用藥4周后各組皮損組織病理像（FeSO4染色×100）①照光前豚鼠表皮基底層幾乎看不到黑素顆粒；②照光后：基底層可見大量黑素顆呈粒帶狀分布,棘層黑素顆粒帽狀分布；③單基質乳膏組：基底層可見較多黑素顆粒；④白術單體組：基底層仍可見較多的黑素顆粒；⑤2%氫醌組：基底層黑素顆粒明顯減少；⑥七白膏組：基底層黑素顆粒顯著減少。表4組織切片中黑素顆粒計數分析注：與照光前比較△P<0.01；與照光后比較*P>0.05，**P<0.01。組別n黑素顆粒計數（個）照光前51.42±0.5253.82±1.49△單純基質組53.76±1.42*白術單體組53.71±1.35*2%氫醌組52.18±0.85**七白膏組52.07±0.79**討論皮膚色素沉著是皮膚科常見的一類疾病，易診難治，嚴重影響患者生活質量和心理健康。日光中的中波紫外線輻射越來越受到關注。近年來UVB照射豚鼠構建色素沉著實驗動物模型已被成功應用[3]。根據文獻資料[2]，豚鼠UVB的最小紅斑量為200～300mJ/cm2，采用局部雙倍最小紅斑量的紫外線劑量（500mJ/cm2）分次間歇照射棕黃色豚鼠的方法,既減少紅斑水皰的發生,又可形成穩定均勻的色素沉著,便于實驗中觀察和數據記錄。本研究選擇單次500mJ/cm2，總劑量1500mJ/cm2的方法所形成的色素沉著均勻、穩定。皮膚色素沉著的治療一直是困擾醫生和患者的一個難題，盡管治療方法很多，但缺外用可引起局部皮膚紅斑、脫屑瘙癢和刺痛等不良刺激，刺激性與濃度及接觸時間有關[4]。研究表明黑素細胞過度增殖和黑素合成進行性增多是導致色素沉著發生或加重的重要因素[5]，抑制黑素細胞增殖和黑素合成可減少皮膚色素沉著的發生和發展。理想的皮膚脫色劑是能直接或間接抑制黑素細胞增殖和黑素合成，脫色迅速且無明顯不良刺激、不易復發的制劑。近年來隨著祖國醫藥的現代化開發應用，一大批經方顯現出其獨特的優勢，七白膏就是其中具有代表性的一個方劑，中藥七[1細辛外加雞子白組成，張建華等[6]1010氫醌的紅斑、脫屑等不良刺激。得深入研究并推廣應用于臨床。【相關文獻】［1］王懷隱.太平圣惠方[M].北京：人民衛生出版社,1982:1200-1235.［2］TobiishiM,HaratakeA,KaminagaH,etal.PigmentationinintrinsicallyagedskinofA1guineapigs[J].PigmentCellRes,2004,17:651-658.［3］MaedaK,NaganumaM.Topicaltrans-4-aminomethylcyclohexanecarboxylicacidpreventultravioletradiation-inducedpigmentation[J].JPhotochemPhotobiolB,1998,47:136-141.［4］MauricioT,KarmonY,KhaiatA.Arandomizedandplacebocontrolledstudytocomparetheskin-lighteningefficacyandsafetyofligninperoxidasecreamvs.2%hydroquinonecream[J].JCosmet