第十九章微生物檢驗的質量控制

質量控制是指人們根據客觀條件的許可所制定的，實際可以達到的統一的質量標準。微生物檢驗的質量控制，包括室內質量控制和室間質量評價室內質量控制是由實驗室內部制定并實施的，是質量保證的核心和基礎。室間質量評價是由實驗室外部的組織或機構對實驗室進行的質量評價。

第一節室內質量控制

（一）人員與組織管理

具備扎實的微生物學、基礎醫學、臨床醫學等理論知識專業化的實驗技能培訓配有一名經嚴格訓練并長期從事于微生物檢驗的技術員，全面負責實驗室的工作定期進行新理論、新技術、新方法的業務學習，經常組織疑難細菌鑒定討論會，提高業務水平（二）操作手冊包括：①實驗室的規章制度各級人員的職責和權限；②實驗室安全措施；③標本采集和處理指南；④本室開展的檢驗項目及最低鑒定要求；⑤培養基、試劑和染色劑的配制與保存；⑥質量控制方案；⑦常用參考數據；⑧其他制度。（三）儀器設備的功能檢測

1．高壓滅菌器最好在滅菌器裝上溫度記錄裝置，以保證整個滅菌過程中保持合適的溫度。為了保證滅菌的徹底，可用生物指示劑嗜熱脂肪芽胞桿菌ATCC7953監視滅菌效果。2．培養箱、冰箱、水浴箱應在每日工作開始和結束時記錄溫度。3．二氧化碳培養箱每天檢查CO2含量。4．厭氧罐或厭氧箱美籃為指示劑，無氧時應無色。5．生物安全柜更換濾網由專門技術人員進行。6．細菌培養儀對每批培養瓶進行生長試驗。保證在有效期內使用。7．微生物鑒定儀應及時更新系統操作軟件，使之能識別最新認識的微生物。（四）培養基的質量控制培養基是分離培養微生物的必需品。培養基質量的好壞，直接關系到分離培養的成敗。目前大多數實驗室都使用干粉培養基配制或使用成品培養基。對來自著名的微生物培養基生產公司的培養基，質量比較穩定。只要按照說明書的要求貯存，在有效期內使用可獲得滿意效果。常用培養基質控標準培養基質控菌株判定標準營養瓊脂金黃色葡萄球菌ATCC25923生長血瓊脂肺炎鏈球菌ATCC6305化膿性鏈球菌ATCC19615生長，α溶血生長，β溶血巧克力瓊脂淋病奈瑟菌ATCC

43069腦膜炎奈瑟菌ATCC13090流感嗜血桿菌ATCC10211生長生長生長中國藍瓊脂大腸埃希菌ATCC25922鼠傷寒沙門菌ATCC14028生長，藍色菌落生長，無色菌落麥康凱瓊脂大腸埃希菌ATCC25922奇異變形桿菌ATCC12453生長，紅色菌落無遷徙生長，無色菌落SS瓊脂大腸埃希菌ATCC25922鼠傷寒沙門菌ATCC14028不生長生長，中心黑色菌落（五）試劑、染色液及診斷血清質量控制1．試劑及染色液注明配制日期，有效日期及貯存條件。測試同時進行陽性和陰性對照試驗。2．抗血清的質量控制來源可靠，根據使用說明使用與保存。凍干制品還應注明配成水溶液的日期；抗血清應澄清；第一次使用時，應用已知菌效價和特異性進行測定，合格者方可使用。

（六）藥敏試驗的質量控制

抗菌藥物敏感試驗是臨床進行抗菌治療的指導性實驗，其結果的正確性直接關系到抗菌治療的成敗。常用有紙片法和稀釋法，保證結果的準確性極為重要。

舉例：紙片法質量控制①質控菌株有：金黃色葡萄球菌ATCC25923；大腸埃希菌ATCC25922；銅綠假單胞菌ATCC27853⑥抑菌環的質控范圍：標準菌株的抑菌圈直徑在連續20個試驗結果中只能有1個結果超出所列的范圍。⑦質控測定次數：每批新的MH瓊脂和含藥紙片必須用質控菌株進行檢測30日，30個抑菌環直徑只有少于3個結果超出范圍。達到要求后，每周檢測一次。

（七）質控標準菌株1．標準菌株的來源標準菌株是指具有典型的、穩定的生理生化特征，并被國際社會所認可的菌株。來源于專門的菌種保存供應機構，如衛生部生物制品鑒定所菌種保藏中心（CMCC）。2．標準菌株的保存（1）一般保存法將菌種于半固體培養基中，35℃培養18h時后封蓋無菌石蠟油，置4℃冰箱保存。此法是最簡單的保存菌種方法，最長可保存一年。（2）快速冷凍保存法將細菌在液體培養基中增菌取數環對數生長期的細菌加入含有小牛血清或無菌脫纖維羊血的培養基中再放入無菌玻璃珠數枚速凍后置-30℃以下低溫冰箱保存。此法可長期保存菌種。（3）真空冷凍干燥法

是最可靠的菌種保藏方法，它具有不改變菌種性狀和保存時間長等優點，但需有專門的冷凍干燥設備。菌種保藏中心多用此法。

第二節室間質量評價室間質量評價：

是通過國內負責室間質量控制的機構檢查各實驗室的工作質量，并接受國際檢驗質量控制機構的質量檢查。同時制訂符合本國國情且與國際標準相統一的質量檢驗標準。

（一）室間質量評價機構

我國負責此項工作的部門是衛生部臨床檢驗中心及各省、市、自治區的臨床檢驗中心定期或不定期的向下一級實驗室發放模擬臨床未知標本，評價各實驗室在病原體的分離鑒定和藥敏試驗等方面的質量，對各實驗室進行橫向比較發現問題并進行指導和糾正。（一）室間質量評價機構我國負責此項工作的部門是衛生部臨床檢驗中心及各省、市、自治區的臨床檢驗中心。定期或不定期的向下一級實驗室發放模擬臨床未知標本，評價各實驗室在病原體的分離鑒定和藥敏試驗等方面的質量，對各實驗室進行橫向比較發現問題并進行指導和糾正。（二）室間質量評價方法日常臨床標本檢驗結果

評價指標為細菌分離率和細菌耐藥率

定期評估

熟練程度的考核由質控管理機構發放模擬標本到受試實驗室，實驗室知道菌株的來源、檢驗的內容和時間。實驗室完成鑒定后在規定時間內將結果反饋至質控管理機構，進行評價。但受試實驗室通常對這些菌株特別重視，采用超過常規操作標準的方法進行鑒定，使上報結果不能準確反映實驗室的真實水平。盲點試驗由質控管理機構將模擬標本混入臨床普通標本，送入實驗室進行常規測定。實驗室主管及實驗操作者不知道哪一個標本是來自質控機構