標準解讀

《GB/T 23874-2009 飼料添加劑木聚糖酶活力的測定 分光光度法》是一項國家標準，旨在提供一種基于分光光度計測量飼料添加劑中木聚糖酶活性的方法。該標準適用于以木聚糖為底物，在特定條件下通過測定還原糖生成量來間接反映木聚糖酶活力大小。

根據標準內容，實驗過程主要包括以下幾個步驟：

  1. 樣品處理：首先需要準備待測樣品溶液，通常要求將樣品溶解于適宜緩沖液中。
  2. 反應條件設定：定義了酶促反應的具體條件，包括pH值、溫度以及反應時間等參數。
  3. 酶解反應：在上述確定條件下，讓樣品中的木聚糖酶與底物（通常是某種形式的木聚糖）進行充分接觸并發生酶解作用。
  4. 產物檢測：采用分光光度法測量反應后產生的還原糖含量。此過程中可能需要用到DNS（二硝基水楊酸）試劑或其他能夠與還原糖發生顏色反應的物質作為顯色劑。
  5. 計算酶活力：依據標準曲線或直接從吸光度讀數換算出單位體積內樣品所含有的木聚糖酶活性單位數。

整個測定過程中需要注意控制好各種變量，確保實驗結果準確可靠。此外，還需按照標準規定正確使用儀器設備，并嚴格遵守安全操作規程。


如需獲取更多詳盡信息，請直接參考下方經官方授權發布的權威標準文檔。

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  • 現行
  • 正在執行有效
  • 2009-05-26 頒布
  • 2009-10-01 實施
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文檔簡介

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犅４６

中華人民共和國國家標準

犌犅／犜２３８７４—２００９

飼料添加劑木聚糖酶活力的測定

分光光度法

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２００９０５２６發布２００９１００１實施

中華人民共和國國家質量監督檢驗檢疫總局

發布

中國國家標準化管理委員會

書

犌犅／犜２３８７４—２００９

前言

本標準的附錄Ａ為資料性附錄。

本標準由全國飼料工業標準化技術委員會提出并歸口。

本標準由中國農業大學農業部飼料工業中心、武漢新華揚生物有限公司、廣東溢多利生物技術股份

有限公司負責起草。

本標準主要起草人：陸文清、曹云鶴、劉興海、詹志春、劉亞力、陳清華。

Ⅰ

書

犌犅／犜２３８７４—２００９

飼料添加劑木聚糖酶活力的測定

分光光度法

１范圍

本標準規定了用分光光度法測定飼料添加劑中木聚糖酶的活力。

本標準適用于飼料添加劑木聚糖酶產品，最低檢出量為１０．０Ｕ／ｇ。

２規范性引用文件

下列文件中的條款通過本標準的引用而成為本標準的條款。凡是注日期的引用文件，其隨后所有

的修改單（不包括勘誤的內容）或修訂版均不適用于本標準，然而，鼓勵根據本標準達成協議的各方研究

是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本適用于本標準。

ＧＢ／Ｔ６６８２分析實驗室用水規格和試驗方法

３原理

木聚糖酶能將木聚糖降解成寡糖和單糖。還原性寡糖和單糖在沸水浴條件下可以與３，５二硝基

水楊酸（ＤＮＳ）試劑發生顯色反應。反應液顏色的深度與酶解產生的還原糖量成正比，而還原糖的生成

量又與反應液中木聚糖酶的活力成正比。因此，通過分光比色測定反應液顏色的強度，可以計算反應液

中木聚糖酶的活力。

在３７℃、ｐＨ為５．５０的條件下，每分鐘從濃度為５ｍｇ／ｍＬ的木聚糖溶液中降解釋放１μｍｏｌ還原

糖所需要的酶量為一個酶活力單位Ｕ。

４試劑與溶液

除特殊說明外，所用的試劑均為分析純，水均為符合ＧＢ／Ｔ６６８２中規定的二級水。

４．１氫氧化鈉溶液，濃度為２００犵／犔

稱取氫氧化鈉２０．０ｇ。加水溶解，定容至１００ｍＬ。

４．２乙酸溶液，濃度為０．１犿狅犾／犔

吸取冰乙酸０．６０ｍＬ。加水溶解，定容至１００ｍＬ。

４．３乙酸鈉溶液，濃度為０．１犿狅犾／犔

稱取三水乙酸鈉１．３６ｇ。加水溶解，定容至１００ｍＬ。

４．４乙酸乙酸鈉緩沖溶液，濃度為０．１犿狅犾／犔，狆犎為５．５０

稱取三水乙酸鈉２３．１４ｇ，加入冰乙酸１．７０ｍＬ。再加水溶解，定容至２０００ｍＬ。測定溶液的ｐＨ。

如果ｐＨ偏離５．５０，再用乙酸溶液（４．２）或乙酸鈉溶液（４．３）調節至５．５０。

４．５木糖溶液（犆５犎１０犗５），濃度為１０．０犿犵／犿犔

稱取無水木糖１．０００ｇ，加乙酸乙酸鈉緩沖溶液（４．４）溶解，定容至１００ｍＬ。

４．６木聚糖溶液，濃度為１００犿犵／犿犔

稱取木聚糖（ＳｉｇｍａＸ０６２７１））１．００ｇ，加入０．３２ｇ氫氧化鈉，再加入９０ｍＬ

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