犐犆犛６５．１２０

犅４６

中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)

犌犅／犜１８６３４—２００９

代替ＧＢ／Ｔ１８６３４—２００２

飼用植酸酶活性的測定

分光光度法

犇犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳犳犲犲犱狆犺狔狋犪狊犲犪犮狋犻狏犻狋狔—

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２００９０５２６發(fā)布２００９１００１實(shí)施

中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局

發(fā)布

中國國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)

書

犌犅／犜１８６３４—２００９

前言

本標(biāo)準(zhǔn)代替ＧＢ／Ｔ１８６３４—２００２《飼用植酸酶活性的測定分光光度法》。

本標(biāo)準(zhǔn)與ＧＢ／Ｔ１８６３４—２００２相比主要變化如下：

———縮小了方法的適用范圍；

———改變了方法的最低定量限；

———改變了緩沖溶液的配制方法；

———細(xì)化了測定過程中的操作步驟；

———?jiǎng)h除了相對法；

———擴(kuò)大了添加植酸酶的配合飼料樣品兩次試驗(yàn)的允許差，相對偏差≤１５％。

本標(biāo)準(zhǔn)附錄Ａ為資料性附錄。

本標(biāo)準(zhǔn)由全國飼料工業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)提出并歸口。

本標(biāo)準(zhǔn)負(fù)責(zé)起草單位：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與檢測技術(shù)研究所［國家飼料質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中

心（北京）］，廣東溢多利生物科技股份有限公司，武漢新華揚(yáng)生物有限公司。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：馬東霞、詹志春、史寶軍、蘇曉鷗、詹連生、梁雪霞、張?zhí)K。

本標(biāo)準(zhǔn)所代替標(biāo)準(zhǔn)的歷次版本發(fā)布情況為：

———ＧＢ／Ｔ１８６３４—２００２。

Ⅰ

書

犌犅／犜１８６３４—２００９

飼用植酸酶活性的測定

分光光度法

１范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了以分光光度法測定飼用植酸酶的活性。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于作為飼料添加劑使用的植酸酶產(chǎn)品，也適用于添加有植酸酶的配合飼料。方法最低

定量限為１３０Ｕ／ｋｇ。

２規(guī)范性引用文件

下列文件中的條款通過本標(biāo)準(zhǔn)的引用而成為本標(biāo)準(zhǔn)的條款。凡是注日期的引用文件，其隨后所有

的修改單（不包括勘誤的內(nèi)容）或修訂版均不適用于本標(biāo)準(zhǔn)，然而，鼓勵(lì)根據(jù)本標(biāo)準(zhǔn)達(dá)成協(xié)議的各方研究

是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)。

ＧＢ／Ｔ１４６９９．１飼料采樣

３術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本標(biāo)準(zhǔn)。

３．１

植酸酶活性狆犺狔狋犪狊犲犪犮狋犻狏犻狋狔

在溫度３７℃、ｐＨ５．５０條件下，每分鐘從濃度為５．０ｍｍｏｌ／Ｌ植酸鈉溶液中釋放１μｍｏｌ無機(jī)磷，

即為一個(gè)植酸酶活性單位，以Ｕ表示。

４原理

植酸酶在一定溫度和ｐＨ條件下，將底物植酸鈉水解，生成正磷酸和肌醇衍生物。在酸性溶液中，

能與釩鉬酸銨生成黃色的復(fù)合物，可于波長４１５ｎｍ下進(jìn)行比色測定。

５試劑和材料

除非另有說明，在分析中僅使用確認(rèn)為分析純的試劑和蒸餾水或去離子水或相當(dāng)純度的水。清洗

試驗(yàn)用器皿不要用含磷清洗劑。

５．１磷酸二氫鉀（ＫＨ２ＰＯ４）：基準(zhǔn)物。

５．２乙酸緩沖液（１），犮（ＣＨ３ＣＯＯＮａ）＝０．２５ｍｏｌ／Ｌ：稱取２０．５２ｇ無水乙酸鈉于１０００ｍＬ燒杯中，加

入９００ｍＬ水?dāng)嚢枞芙猓帽宜嵴{(diào)節(jié)ｐＨ至５．５０±０．０１，再轉(zhuǎn)移至１０００ｍＬ容量瓶中，并用蒸餾水定

容至刻度。室溫下存放２個(gè)月內(nèi)有效。

５．３乙酸緩沖液（２），犮（ＣＨ３ＣＯＯＮａ）＝０．２５ｍｏｌ／Ｌ：稱取２０．５２ｇ無水乙酸鈉，０．５ｇ曲拉通Ｘ１００

（ＴｒｉｔｏｎＸ１００），０．５ｇ牛血清白蛋白（ＢＳＡ）于１０００ｍＬ燒杯中，加入９００ｍＬ水?dāng)嚢枞芙猓帽宜嵴{(diào)

節(jié)ｐＨ至５．５０±０．０１，再轉(zhuǎn)移至１０００ｍＬ容量瓶中，并用蒸餾水定容至刻度。室溫下存放２個(gè)月內(nèi)

有效。

５．４底物溶液，犮（Ｃ６Ｈ６Ｏ２４Ｐ６Ｎａ１２）＝７．５ｍｍｏｌ／Ｌ：稱取０．６９ｇ植酸鈉（Ｃ６Ｈ６Ｏ２４Ｐ６Ｎａ１２，相對分子質(zhì)量

為９２