動物細胞培養和核移植技術上課主要技術植物細胞工程技術動物細胞工程技術植物組織培養植物體細胞雜交動物細胞培養動物細胞融合胚胎移植單克隆抗體技術核移植基礎

資料：燒傷病人的治療通常是取燒傷病人的健康皮膚進行自體移植，但對于大面積燒傷病人來講，健康皮膚很有限，請同學們想一想如何來治療該病人？取該患者的皮膚進行細胞培養,獲得足量的細胞后再移植。一、動物細胞培養（一）動物細胞培養的過程結合圖2-16，閱讀P44最后一段至P46第一段結束。1、找出關鍵詞并理解它們的含義。2、敘述動物細胞培養的過程。細胞貼壁細胞的接觸抑制原代培養傳代培養細胞懸液3、動物細胞培養能否像綠色植物組織培養那樣最終培養成新個體？不能。動物細胞培養的結果：使細胞數目增多。通常取動物胚胎或幼齡動物的組織、器官因為其分化程度低、增殖能力強，更容易培養。說明細胞與細胞間的主要物質是蛋白質1.動物細胞培養對培養的材料有要求嗎？3.用胰蛋白酶處理，組織就會分散成單個細胞，說明了什么？2.為什么在培養前要將組織分散成單個細胞？成塊的組織不利于培養，分散了做成細胞懸浮液利于培養。4.胰蛋白酶真的不會把細胞消化掉嗎？為什么？胰蛋白酶除了可以消化細胞間的蛋白外，長時間的作用也會消化細胞膜蛋白，因此必須控制好胰蛋白酶的處理時間。5.人類一般保存的是哪類細胞呢？為什么？保存10代以內的細胞。因為10－50代部分細胞的細胞核型可能發生變化，有少部分還發生突變向癌細胞方向發展。細胞懸浮液10代細胞50代細胞無限傳代原代培養傳代培養細胞株細胞系如何界定原代培養和傳代培養；細胞株和細胞系？遺傳物質改變遺傳物質未改變（二）動物細胞培養的概念（P44）就是從動物機體中取出相關的組織,將它分散成單個細胞，然后，放在適宜的培養基中,讓這些細胞生長和增殖。原理：細胞增殖想一想：動物細胞培養的基本原理是什么？（三）動物細胞培養條件能否用胃蛋白酶代替胰蛋白酶？1、無菌、無毒的環境對培養液和培養用具進行無菌處理；在培養液中添加一定量的抗生素;定期更換培養液；2、營養葡萄糖、氨基酸、無機鹽、促生長因子、微量元素等動物血清、血漿3、溫度和pH溫度36.5±0.5度，pH7.2～7.44、氣體環境O2和CO2（95%空氣和5%CO2）O2是細胞代謝所必需的。CO2維持培養液的pH。（四）動物細胞培養技術的應用1、生產生物制品

病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體等；3、用于檢測有毒物質及毒性；2、動物基因工程離不開動物細胞的培養；4、培養正?；蚋鞣N病變的細胞，用于生理、病理、藥理等方面的研究。閱讀P46-47獲得細胞或細胞產物細胞的全能性細胞數目增多一般為植物體培養結果快速繁殖、培育脫毒作物等培養目的葡萄糖、動物血清促生長因子蔗糖、植物激素培養基特有成分液體培養基固體培養基培養基性質細胞增殖原理動物細胞培養植物組織培養比較項目植物細胞和動物細胞培養的比較復習：2、敘述動物細胞培養的過程。5、動物細胞培養的條件。1、動物細胞工程常用的技術手段有哪些？3、為什么選用動物胚胎或幼齡個體的器官或組織做動物細胞培養材料？4、為什么培養前要將組織細胞分散成單個細胞？二、動物體細胞核移植技術和克隆動物克隆就是無性繁殖，具體地說，是指一個共同的祖先，通過無性繁殖的方法產生出來的一群遺傳特性相同的DNA分子、細胞或個體。a.分子水平上：b.細胞水平上：c.個體水平上：1.什么是克?。恳话阒窪NA克隆。指一個單一的細胞分裂所形成的細胞群體。指基因型完全相同的兩個或一個群體。2、克隆動物能否用類似植物組織培養的方法獲得？為什么？目前不能。因為動物細胞的全能性隨著分化程度的提高逐漸受到限制。目前，用動物體細胞克隆的動物，實際上是通過核移植來實現的。

動物體細胞核移植技術1.回憶克隆羊“多莉”的培育過程Ａ母綿羊Ｂ母綿羊乳腺細胞卵細胞早期胚胎卵裂C母綿羊子宮胚胎移植多莉羊分娩妊娠核移植融合后的卵細胞（MⅡ卵母細胞）減數第二次分裂中期2.結合P48圖2-21，敘述克隆高產奶牛的培育過程。將供體細胞注入去核卵母細胞核移植胚胎移植供體細胞培養1、對比多莉羊和課本高產奶牛的克隆過程，找出操作過程的不同點？2、討論分析上述哪一種措施更科學？并說明理由？MⅡ卵母細胞細胞質中含有的物質更易支持胚胎的全程發育，用它作受體更容易成功。將供體細胞注入受體細胞，使克隆動物更像供體動物，操作也方便。思考與討論：（1）多莉克隆過程中受體細胞是去核卵細胞，高產奶?？寺∵^程中受體細胞是去核卵母細胞。（2）多莉克隆過程是將供體細胞核注入受體細胞，而高產奶牛的克隆過程是將供體細胞注入受體細胞。１、在體細胞的細胞核移植到受體卵母細胞之前，為什么必須先去掉受體卵母細胞的核？為使核移植動物的核遺傳物質全部來自有利用價值的動物提供的細胞。２、用于核移植的供體細胞一般都選用傳代10代以內的細胞，為什么？10代以內的細胞一般保持正常二倍體的核型，未發生突變。討論：3、體細胞核移植方法生產的克隆動物是對體細胞供體動物進行了100%的復制嗎？為什么？克隆動物絕大部分DNA來自供體細胞核，但核外還有少部分DNA（如線粒體DNA）來自受體卵母細胞。不是動物核移植是將動物的一個細胞的細胞核，移入一個已經去掉細胞核的卵母細胞中，使其重組并發育成為一個新的胚胎，這個新的胚胎最終發育為動物個體。（克隆動物）動物核移植胚胎細胞核移植體細胞核移植（三）體細胞核移植技術的應用前景閱讀P49-501、畜牧業方面：2、醫藥衛生方