第一次實驗

細菌的形態和結構觀察介紹實驗室有關的內容實驗內容實驗小結

228963372/1/20231學習要求1、初步了解病原生物學和免疫學實驗技術的概念和內容；2、熟悉病原生物學實驗室的注意事項；3、掌握顯微鏡的使用和保護方法；4、掌握細菌的基本形態和特殊結構；5、掌握細菌的革蘭染色法；6、了解細菌的運動特點。2/1/20232介紹實驗室有關的內容

1、總論微生物實驗寄生蟲實驗免疫學技術

2、實驗室注意事項評分標準清潔衛生操作規程顯微鏡管理等2/1/20233實驗內容1、顯微鏡使用和保護（錄像）2、細菌的鏡下形態觀察（學生操作）3、細菌的特殊結構（學生操作）4、革蘭染色（學生操作）5、細菌的動力觀察錄像（教師示教）

2/1/202342/1/20235實驗小結1、顯微鏡油鏡的使用和保護2、細菌的基本形態①球菌②桿菌③螺形菌

3、細菌的特殊結構①莢膜②鞭毛③芽胞④菌毛4、細菌的革蘭染色法5、注意事項：評分、衛生、操作、管理。2/1/20236end2/1/20237細菌的基本形態觀察(發片)1、球菌鏡下形態：①葡萄球菌②鏈球菌③肺炎鏈球菌④腦炎奈瑟菌2、桿菌鏡下形態：①大腸埃希菌②破傷風梭菌③產氣莢膜梭菌④變形桿菌3、螺形菌革蘭染色片：

霍亂弧菌或水弧菌

2/1/20238細菌的特殊結構(示教片)1．肺炎球菌莢膜染色示教片（示莢膜）2．變形桿菌鞭毛染色示教片（示鞭毛）3．破傷風梭菌芽胞染色或革蘭染色示教片（示芽胞）2/1/20239

細菌的革蘭染色革蘭染色法是細菌檢驗中最常用的一種染色法。利用革蘭染色法，可將細菌分為兩大類，有助于鑒別細菌和選擇用藥等。

1、革蘭染色法原理

2、革蘭染色法操作步驟

3、革蘭染色結果通過革蘭染色可以觀察到什么？細菌的形態、排列、莢膜、芽胞2/1/202310革蘭陰性菌因其細胞壁中肽聚糖含量少，結構疏松，脂類物質含量高而被酒精脫色，經復染呈紅色。革蘭染色原理：革蘭陽性菌因細胞壁中含有大量的肽聚糖和磷壁酸，且結構致密，可保留結晶紫與碘的復合物，并不被酒精脫色而顯示為紫藍色。2/1/202311

革蘭染色方法(錄像）

涂片自然干燥火焰固定染色染色過程：

已固定的涂片加結晶紫

1分鐘，水沖洗滴加碘液1分鐘，水沖洗95%酒精

20~30秒稀釋石炭酸復紅1分鐘，水沖洗待干鏡檢初染媒染脫色復染一般用室溫干燥，注意必須完全干燥后方可固定。涂片在酒精燈火焰上快速通過3～4次以固定細菌，并使其不易從玻片上脫落。注意不要將涂片直接放在火焰上烤，以免破壞細菌結構。

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用滅菌的接種環取無菌生理鹽水1-2環，置于玻片中。接種環滅菌，待接種環冷卻后，挑取適量培養物混合于鹽水中，涂抹均勻使成一層薄膜（若檢材是液體則不必加生理鹽水）薄膜涂抹的面積約1.5×2.0cm

。按上法制備大腸桿菌涂膜。2/1/2023132/1/202314葡萄球菌（革蘭染色）2/1/202315葡萄球菌（革蘭染色）2/1/202316葡萄球菌電鏡照片2/1/202317鏈球菌（革蘭染色）2/1/202318鏈球菌（革蘭染色）2/1/202319鏈球菌電鏡照片2/1/202320奈瑟菌（革蘭染色）2/1/202321雙球菌（革蘭染色）2/1/202322雙球菌電鏡照片2/1/202323大腸埃希菌（革蘭染色）2/1/202324大腸埃希菌（革蘭染色）2/1/202325大腸埃希菌電鏡照片2/1/202326霍亂弧菌（革蘭染色）霍亂弧菌電鏡照片2/1/202327莢膜莢膜2/1/202328莢膜2/1/202329莢膜2/1/202330變形桿菌鞭毛染色（示鞭毛）

2/1/202331變形桿菌鞭毛電鏡照片（示鞭毛）

2/1/202332破傷風梭菌（示芽胞）革蘭染色和芽胞染色2/1/202333破傷風梭菌芽胞染色（示芽胞）

2/1/202334破傷風梭菌革蘭染色（示芽胞）

2/1/202335破傷風梭菌芽胞電鏡照片（示芽胞）

2/1/202336產氣莢膜梭菌革蘭染色（示莢膜）2/1/2023372/1/2023382/1/2023392/1/2023402/1/202341霍亂弧菌（革蘭染色）霍亂弧菌電鏡照片2/1/2023422/1/2023432/1/2023442/1/2023451、實驗時不遲到、不早退。2、實驗時要保持實驗室內的整潔、安靜。3、正確使用顯微鏡，觀察完畢應把鏡頭和載玻片上的鏡油擦凈。

4、各實驗小組的實驗用品、由各組保管使用，不得隨意與他組調換或挪用。如需補發或增添，應說明原因。5、每次實驗后應清點實驗器材、用品數量，如有遺失或損壞應按規定賠償。動物及標本要按規定處理，不可擅自拿走。6、實驗結束后，各組應自覺清理實驗器材，值日生做好全室清潔工作，關好門窗、水電，經指導教師檢查合格后方可離開實驗室。

1、要按時完成實驗報告。2、實驗報告要保證準確、工整、美觀。3、實驗課結束要將實驗報告交病原生物學實驗室評分存檔。

1、操作考核。2、大體標本考核。3、鏡下標本考核。

病原