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文檔簡介

磷鎢酸-鎂沉淀法測定血清高密度脂蛋白膽固醇含量【目的】作方法。.了解測定血清高密度脂蛋白膽固醇含量的臨床意義。【原理】成的難易程度與脂蛋白分子中蛋白質/脂類的比例有關,比值愈小、脂類含量CM、VLDLLDLHDL顯色法與同樣處理過膽固醇標準液進行比色后,求得血清中HDL-ch的含量。【器材】.722型分光光度計.離心機和離心管.中號試管.刻度吸量管.微量移液器【試劑】.磷鎢酸鈉-鎂溶液4g溶于50ml1mol/LNaOH16ml100ml,調至pH為7.6。取此液40ml2mol/LMgCl210ml100ml。.鄰苯二甲醛溶液(1)(0.1g/dl稱取鄰苯二甲醛100mg溶于100ml置棕色瓶內保存。(2)(5mg/dl取儲存液50ml20ml1000ml。置棕色瓶內。.濃硫酸(A·R).生理鹽水.膽固醇標準液(40mg/dl)稱取膽固醇40mg溶于100ml冰乙酸中。【操作】.HDL的分離1支(9×70mm),加入0.2ml0.05ml磷鎢酸鈉-鎂溶102500r/min離心10CMLDLVLDLHDL。.HDL-ch含量的測定取試管3支,標明空白管、標準管及測定管,按下表操作。試劑(ml)空白管標準管測定管含HDL的上清液--0.05膽固醇標準液-0.05-生理鹽水0.05--鄰苯二甲醛溶液2.52.52.5濃硫酸1.51.51.5將各管液混勻后,于550nm波長處,以空白管調0,進行比色,分別讀取并記錄各管吸光度值。【計算】血清HDL-ch(mg/dl)=血清HDL-ch(mmol/L)=正常值:45~90mg/dl或1.17~2.33mmol/L【注意事項】.加濃硫酸時需將試管斜置,沿管壁加入,注意安全。145~90mg/dl或1.17~2.33mmol/L。【思考題】1.磷鎢酸-

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