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實驗二植物染色體核型分析一、實驗?zāi)康模毫私馐裁词呛诵头治?;知道核型分析的方法;了解染色體的形態(tài)結(jié)構(gòu);學(xué)習(xí)染色體組分析的工藝,掌握染色體組分析的方法。熟悉染色體組型分析中的各項指標(biāo)。實驗二植物染色體核型分析1二、實驗原理:各物種染色體的形態(tài)、數(shù)目和結(jié)構(gòu)是相對穩(wěn)定的。核型分析就是研究一個物種細(xì)胞核內(nèi)染色體的數(shù)目及各染色體的形態(tài)特征,如:對染色體的長度、著絲點位置、臂比和隨體有無進(jìn)行觀察,從而描述和闡明該生物的染色體組成,為細(xì)胞遺傳學(xué)、分類學(xué)和進(jìn)化遺傳學(xué)等研究提供實驗依據(jù)。細(xì)胞有絲分裂中期的染色體具有較典型的特征且易于計數(shù),因而核型分析大多以這一時期進(jìn)行觀察二、實驗原理:2二、實驗原理:染色體組通常是指生物體細(xì)胞染色體所有可測定的表型特征的總稱,包括染色體的總數(shù),染色體組的數(shù)目,組內(nèi)染色體基數(shù)、每條染色體大小、形態(tài)等。它是物種特有的染色體信息之一,具有很高的穩(wěn)定性和再現(xiàn)性。染色組型分析是對染色體進(jìn)行分組,對核型的各種特征進(jìn)行定量和定性的描述,如對染色體長度、著絲點位置、臂比和隨體有無等。為細(xì)胞遺傳學(xué)、分類學(xué)和進(jìn)化遺傳學(xué)等研究提供實驗依據(jù)。二、實驗原理:3三、實驗材料:蠶豆、洋蔥、蛙、小白鼠等有絲分裂中期標(biāo)本和顯微攝影所得放大照片。要求染色體分散良好,無重疊或重疊很少,著絲粒、隨體等形態(tài)清晰可辨。三、實驗材料:4四、實驗用具藥品1.儀器用具:顯微鏡(附攝影裝置)、冰箱、恒溫水浴鍋、135膠卷、載玻片、蓋玻片、剪刀、漿糊、鑷子、白紙、解剖針、刀片及毫米尺。2.藥品試劑:無水酒精、70%酒精、冰乙酸、堿性品紅、苯酚、甲醛、山梨醇、對二氯苯、1N鹽酸、0.05%秋水仙堿。四、實驗用具藥品5五、實驗步驟:(以大麥2n=14為例)種子萌發(fā)和取材:大麥種子置于培養(yǎng)皿內(nèi)濕濾紙上,25℃恒溫箱中,根長2—3cm切取。預(yù)處理:a、幼根放在蒸餾水中,置0—4℃冰箱中處理20小時;b、幼根用0.05%秋水仙溶液處理7小時;固定:新配的材料用卡諾氏固定液固定24小時后,放入70%乙醇中置于冰箱中備用。解離:蒸餾水清洗后,放于1N鹽酸中,60℃恒溫水浴10分鐘。染色和壓片:鏡檢:五、實驗步驟:6五、實驗步驟:染色體照片的測量和對比:測量:依次測量染色體相對長度,長臂和短臂的長度和臂比(長臂/短臂)配對:剪下染色體,根據(jù)隨體有無及大小、臂比是否相等、染色體長度是否相等來配對;排列:染色體長的在前,帶隨體的染色體排在最后(大隨體在前,小隨體在后)五、實驗步驟:7五、實驗步驟:染色體照片的測量和對比:剪貼:將上述染色體按順序粘貼在實驗報告上,粘貼時,應(yīng)使著絲點處于同一水平線上,一律短臂在上,長臂在下,構(gòu)成核型圖。要求:染色體從大到小,短臂向上,長臂向下,各染色體著絲粒排在同一直線上。有特殊標(biāo)記的染色體(如含有隨體的)及性染色體可單獨排列。五、實驗步驟:8編號123456……絕對長度(μm)相對長度短臂(μm)長臂(μm)臂比著絲粒指數(shù)隨體有無染色體類型Totallength:μmP217染色體類型由臂比值確定。編號絕對長度相對長度短臂(μm)長臂(μm)臂比著絲粒指數(shù)隨9Totallength:μmP217染色體類型由臂比值確定。臂比(長臂/短臂)形態(tài)特征1-1.7m中著絲粒染色體1.71-3.0sm近中著絲粒染色體3.01-7.0st近端著絲粒染色體>7.01t端著絲粒染色體Totallength:μmP217染色體類型由臂比值10植物染色體常規(guī)壓片技術(shù)及核型分析課件11核型分析之染色體自動核型分析系統(tǒng)核型分析之染色體自動核型分析系統(tǒng)12核型分析之染色體自動核型分析系統(tǒng)核型分析之染色體自動核型分析系統(tǒng)13核型分析之染色體自動核型分析系統(tǒng)核型分析之染色體自動核型分析系統(tǒng)14核型分析之染色體自動核型分析系統(tǒng)核型分析之染色體自動核型分析系統(tǒng)15核型分析之染色體自動核型分析系統(tǒng)核型分析之染色體自動核型分析系統(tǒng)16核型分析之染色體自動核型分析系統(tǒng)核型分析之染色體自動核型分析系統(tǒng)17核型分析之教師用圖片1-132-93-74-145-68-1110-12核型分析之教師用圖片1-1318核型分析之學(xué)生用圖片1234567891410111213核型分析之學(xué)生用圖片123456789141011121319核型分析之學(xué)生用圖片核型分析之學(xué)生用圖片20植物染色體常規(guī)壓片技術(shù)及核型分析課件21實驗二植物染色體核型分析一、實驗?zāi)康模毫私馐裁词呛诵头治觯恢篮诵头治龅姆椒?;了解染色體的形態(tài)結(jié)構(gòu);學(xué)習(xí)染色體組分析的工藝,掌握染色體組分析的方法。熟悉染色體組型分析中的各項指標(biāo)。實驗二植物染色體核型分析22二、實驗原理:各物種染色體的形態(tài)、數(shù)目和結(jié)構(gòu)是相對穩(wěn)定的。核型分析就是研究一個物種細(xì)胞核內(nèi)染色體的數(shù)目及各染色體的形態(tài)特征,如:對染色體的長度、著絲點位置、臂比和隨體有無進(jìn)行觀察,從而描述和闡明該生物的染色體組成,為細(xì)胞遺傳學(xué)、分類學(xué)和進(jìn)化遺傳學(xué)等研究提供實驗依據(jù)。細(xì)胞有絲分裂中期的染色體具有較典型的特征且易于計數(shù),因而核型分析大多以這一時期進(jìn)行觀察二、實驗原理:23二、實驗原理:染色體組通常是指生物體細(xì)胞染色體所有可測定的表型特征的總稱,包括染色體的總數(shù),染色體組的數(shù)目,組內(nèi)染色體基數(shù)、每條染色體大小、形態(tài)等。它是物種特有的染色體信息之一,具有很高的穩(wěn)定性和再現(xiàn)性。染色組型分析是對染色體進(jìn)行分組,對核型的各種特征進(jìn)行定量和定性的描述,如對染色體長度、著絲點位置、臂比和隨體有無等。為細(xì)胞遺傳學(xué)、分類學(xué)和進(jìn)化遺傳學(xué)等研究提供實驗依據(jù)。二、實驗原理:24三、實驗材料:蠶豆、洋蔥、蛙、小白鼠等有絲分裂中期標(biāo)本和顯微攝影所得放大照片。要求染色體分散良好,無重疊或重疊很少,著絲粒、隨體等形態(tài)清晰可辨。三、實驗材料:25四、實驗用具藥品1.儀器用具:顯微鏡(附攝影裝置)、冰箱、恒溫水浴鍋、135膠卷、載玻片、蓋玻片、剪刀、漿糊、鑷子、白紙、解剖針、刀片及毫米尺。2.藥品試劑:無水酒精、70%酒精、冰乙酸、堿性品紅、苯酚、甲醛、山梨醇、對二氯苯、1N鹽酸、0.05%秋水仙堿。四、實驗用具藥品26五、實驗步驟:(以大麥2n=14為例)種子萌發(fā)和取材:大麥種子置于培養(yǎng)皿內(nèi)濕濾紙上,25℃恒溫箱中,根長2—3cm切取。預(yù)處理:a、幼根放在蒸餾水中,置0—4℃冰箱中處理20小時;b、幼根用0.05%秋水仙溶液處理7小時;固定:新配的材料用卡諾氏固定液固定24小時后,放入70%乙醇中置于冰箱中備用。解離:蒸餾水清洗后,放于1N鹽酸中,60℃恒溫水浴10分鐘。染色和壓片:鏡檢:五、實驗步驟:27五、實驗步驟:染色體照片的測量和對比:測量:依次測量染色體相對長度,長臂和短臂的長度和臂比(長臂/短臂)配對:剪下染色體,根據(jù)隨體有無及大小、臂比是否相等、染色體長度是否相等來配對;排列:染色體長的在前,帶隨體的染色體排在最后(大隨體在前,小隨體在后)五、實驗步驟:28五、實驗步驟:染色體照片的測量和對比:剪貼:將上述染色體按順序粘貼在實驗報告上,粘貼時,應(yīng)使著絲點處于同一水平線上,一律短臂在上,長臂在下,構(gòu)成核型圖。要求:染色體從大到小,短臂向上,長臂向下,各染色體著絲粒排在同一直線上。有特殊標(biāo)記的染色體(如含有隨體的)及性染色體可單獨排列。五、實驗步驟:29編號123456……絕對長度(μm)相對長度短臂(μm)長臂(μm)臂比著絲粒指數(shù)隨體有無染色體類型Totallength:μmP217染色體類型由臂比值確定。編號絕對長度相對長度短臂(μm)長臂(μm)臂比著絲粒指數(shù)隨30Totallength:μmP217染色體類型由臂比值確定。臂比(長臂/短臂)形態(tài)特征1-1.7m中著絲粒染色體1.71-3.0sm近中著絲粒染色體3.01-7.0st近端著絲粒染色體>7.01t端著絲粒染色體Totallength:μmP217染色體類型由臂比值31植物染色體常規(guī)壓片技術(shù)及核型分析課件32核型分析之染色體自動核型分析系統(tǒng)核型分析之染色體自動核型分析系統(tǒng)33核型分析之染色體自動核型分析系統(tǒng)核型分析之染色體自動核型分析系統(tǒng)34核型分析之染色體自動核型分析系統(tǒng)核型分析之染色體自動核型分析系統(tǒng)35核型分析之染色體自動核型分析系統(tǒng)核型分析之染色體自動核型分析系統(tǒng)36核型分析之染色體自動核型分析系統(tǒng)核型分析之染色體自動核型分析系統(tǒng)37核型分析之染色體自動核型分析系統(tǒng)核型分析之染色體自動核型分析系統(tǒng)38核型分析之教師
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