甜菜堿含量檢測試劑盒說明書-可見分光光度法UPLC-MS-4566_第1頁
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電話：400-998-2324郵箱：service_uplc_ms@163.com網址：本產品僅供科學研究使用！請勿用于臨床、診斷、食品、化妝品檢測等用途！-上海液質檢測技術有限公司第第頁甜菜堿含量檢測試劑盒說明書貨號：UPLC-MS-4566規格：50T/48S

可見分光光度法產品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致，有疑問請及時聯系工作人員。試劑名稱規格保存條件提取液液體50mL×1瓶（自備）4℃保存試劑一粉劑×5瓶4℃保存試劑二液體100mL×1瓶（自備）4℃保存試劑三液體100mL×1瓶4℃保存試劑四粉劑×1瓶常溫保存標準品粉劑×1瓶4℃保存溶液的配制：1、提取液：自備80%甲醇。取40mL甲醇，加10mL蒸餾水；215mL蒸餾水，用濃鹽酸（37%）pH145min，過濾20mL；3、試劑二：自備乙醚；4、標準品：臨用前加入3mL蒸餾水溶解，即得10mg/mL甜菜堿標準液。產品說明：甜菜堿是一種廣泛分布于動植物及微生物體內的季銨型水溶性生物堿，是生物體內膽堿的氧化產物，可以增調節滲透壓、穩定維生素等多種生物作用，在化工、醫藥、食品添加劑等領域有較廣泛的應用。甜菜堿在強酸條件下和雷氏鹽發生反應產生沉淀，沉淀用丙酮溶解形成紅色溶液，在525nm處有特征吸收峰，測定525nm處的吸光值，可得樣本的甜菜堿含量。注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。需自備的儀器和用品：臺式離心機、可見分光光度計、水浴鍋、1mL玻璃比色皿、可調式移液槍、研缽/酸（37%、蒸餾水、30-50目篩。操作步驟：一、樣本處理（可適當調整待測樣本量，具體比例可以參考文獻）30-500.2g1L60℃30mi試劑四后充分震蕩，10000rpm，25℃15min70℃揮發甲醇(0.2mL揮發干凈)1mL。二、測定步驟1、可見分光光度計預熱30min以上，調節波長至525nm，試劑三調零。2、將10mg/mL甜菜堿標準液依次稀釋為9、8、7、6、5、4、3、2mg/mL的標準溶液備用。3、操作表：試劑名稱（mL）測定管標準管空白管樣本0.1--標準品-0.1-蒸餾水--0.1試劑一111充分混勻，4℃中反應2h，8000rpm，25℃，離心15min，棄上清試劑二1118000rpm，25℃，離心10min，棄上清。置于通風櫥使試劑二自然揮發干凈試劑三111AAAΔA標準=A標準管-A測定=A測定管-A空白管。三、甜菜堿含量計算公式1、繪制標準曲線：以ΔA標準為y軸，標準溶液濃度為x軸，繪制標準曲線，得到標準方程y=kx+b，將ΔA測定帶入方程，得到x（mg/mL）。2、甜菜堿含量的計算：甜菜堿含量（mg/g質量）=x×V提取÷WV提取：提取液體積，1mL；W：樣本烘干質量，g。注意事項：1、試劑一配制時pH嚴格控制為1，否則會導致反應不完全，配制后4℃只能穩

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