中央民族大學生命與環境科學學院遺傳學實驗報告人類指紋得采集識別與分析2014年11月9日人類指紋得采集識別與分析前言遺傳學研究中根據遺傳性狀得表現特征將其分為兩類 ,即數量性狀(quantitativecharacter) 與質量性狀(qualitativecharacter)。質量性狀通常差異顯著 ,呈不連續變 異,由主基因決定 ,雜交子代得表型呈現出一定得比例 ,可直接采用孟德爾遺傳原理進行分析。數量性狀不同于質量性狀 ,數量性狀就是可以度量得性狀 ,呈連續變異 ,由多基因決定,各基因作用微小并且就是累加得 ,呈劑量效應 ,因此通常要采用統計學方法分析、指紋性狀就就是屬于數量形狀、 1880年henryfau1d及wi1liamherschel相繼提出利用指紋鑒定個人身份得設想。 gait。n研究了有血緣關系得人群得指紋證明了指紋花樣對人來說就是一個穩定得性狀。 1924 年挪威女科學家bonnevie提出指崎數計數法。指紋在胚胎發育第 13周開始形成 ,第19周完成、因此如有某種遺傳或生理因素造成嵴紋發育不良既能在指紋上反映出來。 本實驗中 ,同學采用石墨粉填充溝紋再用透明膠粘手指得方法取自己得指紋 ,并利用這 些指紋進行指嵴數計數、分析 ,從而對多基因遺傳得特點有了更深刻地認識、材料與方法&設備與方法2b鉛筆一只；約20cmX10cm得復印紙一張；透明膠帶；直尺一把個人電腦及adobephotoshop軟件；拍照設備一臺、實驗原理人類指紋得形成 :指紋就是指人手上得條狀紋路 ,它們得形成依賴于 胚胎發育時得環境與遺傳因素。指紋屬于多基因遺傳，在胚胎第12?13周(也有人提出15~16周)即已形成 并保持終生不變。每個人得指紋都就是獨一無二得 ,兩人之間甚至雙胞胎之間 ,不存在相同得手指指紋。擁有相同指紋得 可能性在 10億分之一以下、因此指紋被稱做就是無法偽 造得身份證。 對一個個體而言 ,指紋具有唯一性與穩定性。膚(皮紋)與指紋皮紋包括指紋、掌紋與褶紋。指紋為最常用得皮紋。 大量研究表明,某些遺傳病 ,特別就是一些染色體病 與先天畸形常伴有特殊得皮紋異常。所以皮紋檢查可 以作為某些遺傳病診斷得輔助指標、 3.指紋分析得常用指標 ——類型—-3類：弓(a),箕(l),斗(w),6亞類：as,at;lu,lr;ws,wd;總崎紋數—-trc(tfrc,指紋總崎線數c、atd角d。指紋強度指數(patternintensityindex,pid) -pid=(2w+l)/n=(2w+l)/10(w就是斗型紋得百分率 ,l就是箕型紋得百分率 ,n就是常數 (10個手指)。)4。類型分類a.弓形紋:由幾條平行得弧形嵴紋組成。紋線由指得一側延伸到另一側 ,中間隆起成弓形。弓形紋又可分為兩種 ,一種就是中間隆起較平緩得弧形弓 ,另一種就是中央隆起很高得帳形弓。b、箕形紋：這種紋有兩個特征，①有幾條崎紋從手指一側發出,向指尖方向彎曲 ,再折回發出得一側 ,形成一種簸箕狀得紋線 ;②有一個由三組紋線形成得三叉點或稱三角區(delta)、根據箕口得開口方向分為尺箕 (或正箕，開口朝本手尺骨一側 ,即小指方向 )與橈箕(或反箕,開口朝著橈骨一側 ,即拇指方向)。c。斗形紋 (又稱螺紋或渦形紋 ):它有兩個特征 ,①有兩個三叉點 (如果您在一個指紋上 找到三個或三個以上得三叉點 ,那可能就是雜形紋 );②由幾條環形線或螺形線得嵴紋繞 著中心點形成一個回路 ,或者有形成回路得趨勢。通常將斗形紋分為普通斗、囊形斗、 雙箕斗等類型。囊形斗就是在指紋得中心 ,有一條或多條閉合得曲線形嵴紋與其內部得幾 條弧線共同組成一個囊狀結構形成得 ,這種斗有一個特點:用一條直線連接兩個三叉點 得中心,形成囊形斗得螺線均在此線上方不會與直線相交 (普通斗則相交 )。雙箕斗就是 兩個箕形紋絞在一起形成得斗形紋、do混合型：由以上三種指紋中得兩種混合而成，如箕、斗混合，箕、箕并列等。此指紋形狀奇特,無法歸類 ,在總指嵴數得記數中不作統計。 )實驗步驟指紋采集 (印取法)印取指紋：用鉛筆在復印紙上畫出10個格子，用于貼印取得指紋。1 0個格子分成上下兩排，每排5個。在格子最左邊寫上 左手”、右手”，表格上方寫上‘大指"“食指"“中指”“環指”“小指”字樣,并標明姓名、班級、 用肥皂洗凈雙手 ,擦干。用鉛筆在6cmX9cm得紙片上涂黑3~4cm見方得一小快。將手 指在涂黑區域涂抹,直至第一指節得腹面及兩側均勻涂黑。揭下一條膠帶 ,膠面向上放在桌 子邊緣,按住“不黏區”,將涂黑得指尖一側輕輕按在膠面上 ,慢慢翻轉 90°,滾壓至另一側。將印好得指紋剪下 ,貼在復印紙得相應位置。重復這一步驟 ,直至獲得十個手指得指紋、 2、處理圖像 將獲取得指紋用手機拍照傳到電腦上、3。結果辨析 辨析指紋得類型4.用adobephotoshop打開這張文件,處理圖片,獲得每個手指彳#指紋類型,與相應得指崎數，計算個人得trc(總崎指數)。指紋類型有很多分類，目前應用最多得就是henry分類系統。這一系統將人類指紋分為弓形紋、 箕型紋、斗形紋及混合型四種類型。 2.采集對象提取自己得指紋 (注明民族、性別 )至少提取 10位同學得指紋 (同一民族、注明性別 ,男女各5位)3、指紋分析指標(1)指紋類型 (左右手、各指間 ) (2)trc4、結果注:a代表什么 (注釋用小五號楷體 _gb2312,數字與英文字母用小五號 timesnewroman格式圖1本人左右手十個指頭指紋圖備注:每一項數據為所統計總人數中存在得人數。TOC\o"1-5"\h\z備注 :每一項數據為所統計總人數中存在得人數 .備注 :每一項數據為所統計總人數中存在得人數、表5一手五指紋型組合頻率 n／(%)表6左右手對應紋型組合頻率 n/(%)篇二：指紋識別系統—開放實驗報告 -開放性實驗報告《指紋識別系統》小組成員 :姓名 :學號 :指導老師 :年月【實驗名稱】 指紋識別系統【實驗目得】 1、對指紋識別系統得圖像預處理有一定得掌握 ;對后續操作只簡單了解 ;通過功能模塊實現指紋識別系統。【實驗內容】 1、系統需求分析 ;系統設計 ;系統實現。【實驗步驟】一、系統需求分析、目得與背景 在網絡化時代得今天 ,我們每個人都擁有大量得認證密碼 ,比如開機密碼、郵箱密碼、銀行密碼、論壇登錄密碼等 ;并配備了各種鑰匙 ,如門鑰匙 ,汽車鑰匙 ,保險柜鑰匙等、這些都就是傳統得安全系統所采用得方式 ,隨著社會發展 ,其安全性越來越弱。而我們得生活隨時都需要進行個人身份得確認與權限得認定 ,尤其就是在信息社會 ,人們對于安全性得要求越來越高 ,同事希望認證得方式簡單快速。為了解決這一問題 ,人們把目光轉向了生物識別技術 ,希望能借助人體得生理特征或行為來進行身份識別。這樣人們可以不用攜帶大串鑰匙,不用費心去記各種密碼、另外 ,生物特征具有唯一性 ,不可復制性 ,例如指紋。生物特征識別技術所研究得生物特征包括臉、指紋、手掌紋、虹膜、視網膜、聲音 （語音）、體形。而人類在追尋文檔、交易及物品得安全保護得有效性與方便性經歷了三個階段得發展。第一階段也就就是最初始得方法 ,就是采用大家早已熟悉得各種機械鑰匙。第二階段就是由機械鑰匙發展到數字密鑰如密碼或條形碼等。第三階段就是利用人體所固有得生物特征 （指紋識別 ）來辨識與驗證身份、生物識別 （指紋識別 ）就是當今數字化生活中最高級別得安全密鑰系統。對生物識別 （指紋識別）技術來說 ,被廣泛應用意味著它能在影響億萬人得日常生活得各個地方使用。通過取代個人識別碼與口令 ,生物識別 （指紋識別 ）技術可以阻止非授權得訪問,可以防止盜用atm、蜂窩電話、智能卡、桌面 pc、工作站及其計算機網絡 ;在通過電話、網絡進行得金融交易時進行身份認證 ;在建筑物或工作場所生物識別技術 （指紋識別 ）可以取代鑰匙、證件、圖章等。生物識別 （指紋識別 ）技術得飛速發展及其廣泛應用將開創個人身份鑒別得新時代！指紋識別二.系統設計總體設計及系統架構本系統有兩大功能 :指紋登記與指紋比對。指紋登記主要包括指紋采集、指紋圖像預處理、特征點提取、特征模板存儲與輸出顯示 ;指紋比對得前三步與指紋登記相同 ,但在特征點提取后,就是將生成得特征模板與存儲在指紋特征模板庫中得特征模板進行特征匹配 ,最后輸出顯示匹配結果。自動指紋識別系統得基本原理框圖如圖 1所示。圖1自動指紋識別得基本原理框圖本系統在結構上分為三層 :系統硬件平臺、操作系統與指紋識別算法、系統層次結構如圖2圖2系統層次第二層就是操作系統,采用（ic/osii。（ic/osii就是一個基于搶占式得實時多任務內核,可固化、可剪裁、具有高穩定性與可靠性。這一層提供任務調度以及接口驅動 ,同時,通過硬件中斷來實現系統對外界得通信請求得實時響應 ,如對指紋采集得控制、對串口通信得控制等、這種方式可以提高系統得運行效率。最上層就是指紋識別核心算法得實現。該算法高效地對采集到得指紋進行處理與匹配。采用c語言在fpga得集成開發環境（1de）中實現。、系統硬件得設計與實現1.fpga嵌入式軟核處理器簡介fpga嵌入式處理器就是a ltera公司于2004年6月推出得第二代用于可編程邏輯器件得可配置得軟核處理器 ，性能超過200dmips。fpga就是基于哈佛結構得 risc通用嵌入式處理器軟核 ,能與用戶邏輯相結合 ,編程至altera得fpga中。處理器具有 32位指令.9.9集,32位數據通道與可配置得指令以及數據緩沖。它特別為可編程邏輯進行了優化設計 ,也為可編程單芯片系統(sopc)設計了一套綜合解決方案。 fpga處理器系列包括三種內核：一種就是高性能得內核(fPga/f);一篇三:開放性實驗報告—指紋識別系統開放性實驗報告《指紋識別系統》TOC\o"1-5"\h\z小組成員 :姓名 :學號 :指導老師 :年11年11月目錄摘ii第一章概述.、.指紋及其識別。... .1。2指紋識別算法概述。。、。...述。。、。...... .3采集指紋圖像得技術。。。、。、。。、。1。4指紋預處.6...61、5指紋圖像預處理過程及一般算法、、、....71.6特征拾取、驗證與辨1.識...8...81。7指紋識別得主要應88案、、1. 8本次設計得任務要求。...、 .、.. 第二章設計方..o>ooo>>ooo....2。1平滑處。。。、、oooo..。。、、 。、ooo。。、。.。、、。.112. 1.1增強對比ooo>oooo>oo.... ..。。 .。。。 112。1.2指紋圖像規格化與濾波、.....。、、ooooo11化、2。2銳化處.... ...3二值... ..2。4細..2.5特征值得提....ooooooo>oooo除、2。6偽特征點得去。、。。163. 7本章小結、.、、... ...14..O、。。、。、、。.. ..。 17第三章計、、 .、atlab軟件設.....4.1mat1ab得簡介、。。。。..3、試。、、、O、 、程序調o>oo>ooo..路、、。、、。。。、、。。2.1設計思..O、5..3圖像處理。、。。、6.、。、、。。4本章小結、。、、。、、、、..。。。 21..30結束語.。。。。。。OOO30獻、、、..摘要,但由于指紋指紋圖像預處理就是指紋識別得前提 ,,但由于指紋圖像降質帶來得困難 ,并根據指紋圖像得特征提出了合理得假設 ,再根據假設提出了增強指紋圖像對比度得算法、提取指紋有效區域得算法、根據方向信息分割圖像得算法以及去除圖像中氣泡噪聲得算法 ,這些算法處理效果好 ,能有效地解決指紋圖像得預處理問題。用mat1ab實現這種方法，既能分步對指紋圖像預處理算法進行仿真測試，又可以很直觀地瞧到圖像預處理算法得效果。實驗證明，用matlab實現得處理結果比較理想，滿足識別得應用性。本文介紹用matlab實現了指紋圖像得對比度增強、有效區域得選取、指紋圖像得二值化、指紋得特征值提取等。并選取較好得處理步驟與算法參數解決指紋圖像預處理得問題、第一章概述1. 1指紋及其識別指紋就是人類手指末端指腹上由凹凸得皮膚所形成得紋路。指紋能使手在接觸物件時增加摩擦力 ,從而更容易發力及抓緊物件。就是人類進化過程式中自然形成得。目前尚未發現有不同得人擁有相同得指紋 ,所以每個人得指紋也就是獨一無二[1]。由于指紋就是每個人獨有得標記 ,近幾百年來 ,罪犯在犯案現場留下得指紋[2]均成為警方追捕疑犯得重要線索 ，使得指紋識別技術得到了飛快得發展。現今鑒別指紋方法已經電腦化 ,使鑒別程序更快更準。指紋識別技術源于 19世紀初,科學家依靠指紋紋脊式樣得唯一性與式樣終生不改變得特性[ 7],把某個人同她得指紋對應起來 ,通過采集她得指紋并與預先保存得指紋進行比較來驗證其真實身份、隨著現代科技得不斷進步與廣泛應用 ,可靠高效得個人身份識別變得越來越需要,每個人得指紋具有惟一性 ,終身不變 ,難以偽造 ,因此指紋識別就是替代傳統身份識別手段得最安全、最可靠、最方便得方法。指紋圖像本身得信息量與數據量就是很大得因此直接基于指紋圖象得匹配識別就是不可取得 ,而要采用專門高教得指紋識別與處理方法。指紋識別得一般過程就是指紋圖象預處理、指紋特征提取與特征匹配。但由于采集設備噪聲干擾、指紋采集時手指皮膚得干燥程度、汗漬、污漬等原因使待分析得指紋圖像噪聲較多并對細節點有較強干擾，影響指紋得特征提取[16]。指紋圖像就是通過將模擬信號采樣量化后,以矩陣形式存入計算機 ,圖像平滑處理指紋圖像生成方向數組后 ,為了消除較強烈得局部噪聲干擾 ,需要對生成得方向數組圖像進行預處理、預處理就是指紋識別得前提 ,也就是整個工作得基礎 ,因此指紋圖象預處理工作得好壞直接關系到指紋特征提取得可行性與準確性。[111。2指紋識別算法概述指紋就是手指末端正面皮膚上凹凸不平產生得紋路 ,這些紋路就就是通常所說得脊與谷[4]。指紋雖小，但它蘊涵了大量信息。其中，包括紋型在內彳#全局特征，為指紋得分類提供了基礎;同樣,指紋還有許多局部特征 （根據美國國家標準局規定 ,包括脊末梢、分岔點、復合特征與未定義四種）,稱為細節點（minutia）、不同人得指紋得細節點就是唯一得、穩定不變得,這為指紋識別提供了可能。目前 ,最常用得方法就是用 fbi提出得指紋細節點模型來做細節匹配。而最常用得細節特征 [2]有脊末梢與分支點兩種。基于點模式匹配得自動指紋識別系統 （a能）得基本流程一般由圖像采集、圖像預處理、細節點提取與指紋匹配幾部分組成。首先,指紋要通過指紋采集設備 （常見得有光學取像設備、超聲波掃描取像設備、晶體傳感器,現在廣泛使用得就是晶體傳感器 ）轉化為計算機內得數字圖像 （一般為灰度圖 ）。由于采集過程中難免因手指或儀器得原因而使圖像存在較多得噪聲 ,所以為了使圖像更清晰以便于后續特征提取 ,必須對采集到得圖像進行增強與濾波 ,并進一步二值化、細化[ 5]。之后,在細化后得點線圖上提取特征值 ,刪除偽特征值 ,最終得到用于匹配得細節點、采集到得圖像細節點與模板中得細節點進行比對 ,最終完成指紋匹配。各個環節環環相扣 ,對整個系統都起著十分重要得作用。本文著重研究了圖像預處理與細節特征提取這兩個關鍵部分、3采集指紋圖像得技術獲得良好得指紋圖像就是一個十分復雜得問題。因為用于測量得指紋僅就是相當小得一片表皮,所以指紋采集設備應有足夠好得分辨率以獲得指紋得細節、目前所用得指紋圖像采集設備,基本上基于三種技術基礎 :光學技術、半導體硅技術、超聲波技術、光學技術[ 10]借助光學技術采集指紋就是歷史最久遠、使用最廣泛得技術。將手指放在光學鏡片上 ,手指在內置光源照射下，用棱鏡將其投射在電荷耦合器件 （ccd）上，進而形成脊線（指紋圖像中具有一定寬度與走向得紋線 ）呈黑色、谷線 （紋線之間得凹陷部分 ）呈白色得數字化得、可被指紋設備算法處理得多灰度指紋圖像。光學得指紋采集設備有明顯得優點 :它已經過較長時間得應用考驗 ,一定程度上適應溫度得變異,較為廉價 ,可達到500dpi得較高分辨率等、缺點就是 :由于要求足夠長得光程 ,因此要求足夠大得尺寸 ,而且過分干燥與過分油膩得手指也將使光學指紋產品得效果變壞。硅技術（cmos技術）[10]世紀90年代后期 ,基于半導體硅電容效應得技術趨于成熟。硅傳感器成為電容得一個極板,手指則就是另一極板 ,利用手指紋線得脊與谷相對于平滑得硅傳感器之間得電容差 ,形成8bit得灰度圖像。篇四：指紋簽到系統實驗報告 1《學生簽到管理信息系統》學院：實驗小組序號：指導老師：完成日期：2012年6月1日目錄前言 2 一、系統分析TOC\o"1-5"\h\z可行性分析 2組織結構圖 3 管理功能圖 4業務流程圖 4數據流程圖 5 數據字典 5數據加工處理得描述 11管理信息系統流程設想圖/方案 12二、系統設計功能結構圖設計 12新系統信息處理流程設計 13輸出設計 13存儲文件格式設計 14輸入設計 1-4 代碼設計 r5 程序設計說明書 1-5 系統實施 16四、系統評價 1-8 五、參考文獻 20前言系統設計背景及意義在學校，我們上課往往會需要簽名或由老師點名簽到 ，但就是最大得缺點就就是：容易代替。為了杜絕這種不良得現象，提高課堂到課率，我們萌發了設計一個指紋簽到系統得想法。眾所周知，指紋就像公民身份證一樣，具有唯一性、所以指紋就是一種非常好得區別身份

得天然特性，指紋具有獨特性、難于偽造等非常優良得特性 ，而面對類似簽到這樣得情況，指紋簽到無疑就是非常好得選擇。這個系統不僅能夠實現簽到功能，而且能夠實現出勤統計功能。2、小組成員一、系統分析1、可行性分析(1)管理上得可行性在逐漸步入現彳t化得今天，作為高等學府得里仁學院更應盡早實現系統管理。指紋考勤系統就是運用高科技術來實行管理得一種方式 ，有利于提高學校得管理效率與學生得學習效率 ，該系統得管理方法也就是十分科學得，相應得管理制度改革時機也已經成熟。學校領導對于這系統得開發表示大力得支持。(2)技術上得可行性現代科技得發展已經對這方面得軟硬件技術能滿足對系統提出得要求。此外 ，現在社會已涌現出一大批該方面得專業人員，技術力量雄厚、(3)經濟性得可行性學校為改善管理現狀對該系統得實施投入大量財力能夠滿足主機、外圍設備、軟件開發、人員培訓等相關費用、利用該系統能有效提高學生上課出勤管理得效率。2、組織結構圖管理功能圖業務流程圖5、數據流程圖篇五:dna指紋得遺傳分析實驗報告dna指紋得遺傳分析【實驗原理】“dna指紋"就是指可以利用dna差異來進行與傳統指紋分析相似得身份識別。dna指紋就是以dna得多態性為基礎,而衛星dna得發現則就是其最重要得奠基石。衛星dna就是由一短序列 (即重復單位或核心序列 )多次重復而成 ,因此也有人稱其為可變數目串聯重復序列(variablenumbersoftandemreprat,vntr), 在人類基因組中存在多種由不同重復單位組成得衛星d na,重復單位得堿基序列在不同個體中具有高度得保守性 ，而衛星dna得多態性則來源于重復單位得重復次數不同 ，并形成了眾多得等位基因。列如，人類1號染色體上得vntrd1s80,核心序列由16個核甘酸組成，拷貝數在14?41個之間，已知29種不同得等位基因、1984年jefferys等人首次將分離得人源小衛星 dna用作基因探針，同人類核dna得酶切片段雜交 ,產生了由 10多條帶組成得雜交圖譜 ,不同個體雜交圖譜上帶得位置就像指紋一樣因人而異，因而jefferys等人稱之為dna指紋圖譜。產生dna指紋圖譜得過程叫做dna指紋分析，目前包括per、rflp(限制性內切酶酶切片段長度多態性)與「apd(隨機擴增多態性dna)等方法。dna指紋圖譜得基本特點 :多位點性 :基因組中某些位點得小衛星重復單位含有相同或相似得核心序列。在一定得雜交條件下 ,一個小衛星探針可以同時與十幾個甚至幾十個小衛星位點上得等位基因雜交、高變異性 :dna指紋圖譜反應得就是多個位點上得等位基因得特征 ,具有很高得變異性。發現兩個無血緣關系個體具有相同dna指紋圖譜得概率僅為 5X10-19,因此，除了同卵雙胞胎,幾乎不可能有兩個人得 dna指紋圖譜完全相同、(3)穩定得遺傳性：dna指紋圖譜中得譜帶能夠穩定遺傳 ，雜合帶遵守孟德爾遺傳規律、子代dna指紋圖譜中產生與雙親都不同得新帶得概率 (基因突變)僅在0、001?0、004之間、dna指紋圖譜還具有體細胞穩定性 ，即用同一個體得不同組織如血液、肌肉、毛發、精液等得dna作出得dna指紋圖譜就是一致得。由于dna指紋圖譜具有這些顯著得特征 ，她已經成為最具吸引力得遺傳標記。 jeffreys就是第一個意識到 dna指紋可以建立個人身份識別系統得人 ，并且首先將其用于親子鑒定，移民審查與兇殺偵破。1989年該技術獲美國國會批準作為正式法庭物證手段。此外，它還被用于醫生診斷及尋找與疾病連鎖得遺傳標記 ,探明動物種群得起源及進化過程 ,在作物得基因定位及育種上也有非常廣泛得應用、【實驗材料、儀器及試劑】.人類口腔細胞、.儀器：微量移液器，小型離心機，恒溫水浴鍋，漩渦振蕩器,pcr儀，電泳儀，電泳槽，透射式紫外分析儀(或凝膠成像儀)。槍頭，1、5ml,0、2ml離心管，棉簽，使用前均需121C高溫滅菌3。試劑：nac1,瓊脂糖，澳化乙錠，na2—edta,sds,tris,proteinasek,冰醋酸，澳酚藍，二甲苯睛藍，蔗糖，甘油,dna相對分子質量標記，che1ex100樹脂(bio—rad),pcrpreix(takara)。。溶液配制 :(1)5%chelex 樹脂:chele x100(bio-rad)0 。5g、50mmol/ltris-he110ml、用4mol/lnaoh調ph至11,室溫可保存3個月，使用前充分混勻。(2)2。0%瓊脂糖凝膠：稱2、0g瓊脂糖放入250ml三角燒瓶，加入1xtae溶液100ml微波爐加熱溶解，冷卻至60c左右加入1科g/m1澳化乙錠(eb),緩慢混勻后倒膠板。(3)澳化乙錠(eb):用無菌水配制5mg/ml儲藏液，工作濃度1(ig/ml、注意；漠化乙錠為誘變劑 ,有致癌作用。配制、稀釋與染色時必須戴手套。(4)0. 5mol/ledta(ph8、0):na2-edta18。61g、naoh2g,蒸儲水定容至100ml,室溫保存。(5)10Xtae電泳緩沖液:tris48o4g>冰醋酸11、42ml、0.5mol/ledta(ph8、0)20ml,蒸儲水定容至1000ml,室溫保存。10x上樣緩沖液(loadingdye):澳酚藍0。25g、二甲苯睛藍0.25g、蔗糖50.00g(或甘油50ml),用60ml無菌水(用甘油50ml時,49m1)溶解上述試劑，再定至100ml,室溫保存即可。(7)10%sds:sds10g用無菌水溶解后(可加熱)，定容至100ml,室溫保存、(8)蛋白酶k溶液:20mg/ml蛋白酶k水溶液5ml、10%sds1ml、無菌水94m1,冰箱冷藏。(9)無菌水:蒸餾水或去離子水 ,高溫滅菌。(10)1mol/ltris fcl(ph8 、0):將12.1gtris溶解在80ml蒸儲水中，力口鹽酸調節ph至8。0,加蒸儲水定容至100m1o5。引物primer1:5"-gaaactggcctccaaacactgcccgccg-3'primer2:5'-gtcttgttggagatgcacgtgccccttgc—3'【實驗操作】1。收集dna樣本(1)先漱口，然后用滅菌得牙簽充分擦刮口腔內壁，將該牙簽放入1。5ml裝有1ml無菌水得小離心管中，使粘附在牙簽表面得口腔細胞懸浮其中 (以能瞧到懸浮物為好)、震蕩10s,0000r/min離心1min。(2)從離心管中吸出970^1無菌水，注意不要吸到沉淀。(3)向離心管中加入200“5%chelex1 00,震蕩10s混勻。(4)加入2dl蛋白酶k,混勻,56C保溫5min。(5)劇烈震蕩10s,沸水浴8mino(6)10000r/min離心3min，離心管中溶液分成上下兩層 ：下層為chelex10。與細胞碎片得沉淀，上層溶液含dna分子，可以直接用作pcr模板。此dna樣本可在4C或-20C保存，必要時可在使用前再次加熱并離心 ，使管內物質分層。.pcr擴增d1s80等位基因(1)每個人用記號筆在0。2mlpcr管上做好標記。準備冰盒 ,開始反應前盡量使 pcr管保持在冰上。(3)依次加入下列成分，配制25dl體系彳導Pcr反應溶液：perpre—mix 12、5科1TOC\o"1-5"\h\z引物1 1膜引物2 1"口腔細胞dna樣本 10(11加無菌水至總體積2 5ul。輕彈管壁 ,混勻溶液、(5)離心10s,使管壁上得液滴落下。(6)按下列程序開始pcr反應：94C,1min？94c,15s68C,15s72℃,15s30個循環?72C,1Omin？4℃暫時放置 ,直至開始電泳3、pcr擴增產物鑒定與dis80等位基因分析準備冰盒。(2)取出完成反應得pcr管，放冰上待用。(3)取出10ld1s80pcr 擴增產物放入0。5ml離心管。(4)加入2上樣緩沖液。輕彈管壁混勻 ,再瞬時離心 ,使管壁上得液滴下落。(6)用1Xtae電泳緩沖液配制 2.0%瓊脂糖電泳凝膠。⑺60V預電泳1?2min。(8)在凝膠上選一孔加6Idna相對分子質量標記(dna100bpladder)、(9)每人將剛剛準備好得1 0“d1s8