第九章生化藥品概述概述生化藥物：從生物體分離、純化所得的一類結(jié)構(gòu)上十分接近于人體內(nèi)的正常生理活性物質(zhì)，具有調(diào)節(jié)人體生理功能，達(dá)到預(yù)防和治療疾病目的的物質(zhì)。特點(diǎn)來源于生物體人體的基本生化成分一、生化藥品的分類藥物的化學(xué)本質(zhì)和化學(xué)特性分類核酸及其降解物和衍生物類藥物酶類藥物多肽和蛋白質(zhì)類藥物氨基酸及其衍生物類藥物糖類藥物脂類藥物二、生化藥物的特點(diǎn)11、原材料復(fù)雜同一種生化物質(zhì)的原料可來源于不同生物體同一種物質(zhì)也可由同種生物體不同部位產(chǎn)生同一種生物體或組織可產(chǎn)生結(jié)構(gòu)完全不同的物質(zhì)及結(jié)構(gòu)相似物質(zhì)23胰島素：豬、牛、人；菘藍(lán)：板藍(lán)根、大青葉；微生物：抗生素、蛋白質(zhì)、酶等；2、種類多、含量低3、種屬特性

紅豆杉——紫杉醇含量0.003%約從38000棵樹中方可分離提純得到99％純度的紫杉醇約25kg豬胰島素牛胰島素活性低高抗原性低高與人胰島素結(jié)構(gòu)相似性大小4、活性與空間構(gòu)象有關(guān)5、制備要求高高營養(yǎng)、低含量、特殊生物活性等決定三、傳統(tǒng)生化制藥的一般工藝過程生物材料的選取與預(yù)處理提取有活性部分有效成分的分離與純化制劑1、材料的選擇與保存原則：選擇富含所需目的物、易于獲得、提取的

無害生物材料1、材料的選擇與保存一、材料的選擇1、來源：來源豐富、盡量不與其他產(chǎn)品爭原料、最好能一物多用，綜合利用。2、雜質(zhì)：難于分離的雜質(zhì)會(huì)增加工藝的復(fù)雜性嚴(yán)重影響收率、質(zhì)量和經(jīng)濟(jì)效益

。SOD植物血液一、材料的選擇3、有效成分的含量（1）合適的生物品種：催乳素，哺乳動(dòng)物（2）合適的組織器官：（胃蛋白酶，胃）（3）生物的生長期：胸腺素，幼齡動(dòng)物（4）合適的種屬：人，豬（5）合適的生理狀態(tài)：胰島素，飯后二、材料的采集與保存生理活性物質(zhì)易失活與降解，采集時(shí)必須保持材料的新鮮、防止腐敗、變質(zhì)與微生物污染。采摘必須新鮮、快速、及時(shí)速凍、低溫保存速凍、凍干、有機(jī)溶劑脫水等1、天然生物材料的保存2、動(dòng)物物細(xì)胞的的保存方方法及影影響保存存質(zhì)量的的因素保存方法組織塊保存法細(xì)胞懸液保存法單層細(xì)胞保存法低溫冷凍保存影響保存存質(zhì)量的的因素：：a、凍存存速度：：緩慢降溫溫、加速速融化b、保護(hù)護(hù)劑：甘油/二二甲亞砜砜c、凍結(jié)結(jié)方法：：收集細(xì)胞胞+保護(hù)護(hù)劑+低低溫d、細(xì)胞胞復(fù)蘇：：融化+培培養(yǎng)液2、生物物材料的的預(yù)處理理一、組織織與細(xì)胞胞的破碎碎物理法化學(xué)法生物法磨切法壓力法震蕩法凍融法組織自溶溶法酶解法噬菌體法法滲透壓法高壓法減壓法二、細(xì)胞胞器的分分離為獲得結(jié)結(jié)合在細(xì)細(xì)胞器上上的一些些生化成成分或酶酶系，常常常要先得得到細(xì)胞胞器再進(jìn)進(jìn)一步分分離有效效成分。。方法：勻漿破碎碎細(xì)胞，，離心分分離（差差速/密密度梯度度）3、生物物活性物物質(zhì)的提提取提取是利用制制備目的的物的溶解特性性，將目的的物與細(xì)細(xì)胞的固固形物成成分或其其它結(jié)合合成分分離，使其由由固相轉(zhuǎn)入入液相或從細(xì)胞胞生理狀態(tài)態(tài)轉(zhuǎn)入特特定溶液液環(huán)境的過過程。浸漬法：：用冷溶劑溶出出固體材材料中的的物質(zhì)浸煮法：：用熱溶劑溶出出目的物物一、提取取方法的的選擇目的物與與雜質(zhì)在在溶解度度與穩(wěn)定定性方面面的差異異選擇合適適的溶劑劑系統(tǒng)與與提取條條件除去與目目的產(chǎn)物物性質(zhì)差差異較大大的雜質(zhì)質(zhì)、濃縮縮目的物物注意事項(xiàng)項(xiàng)：酶類輔輔酶丟丟失和其其他失活活因素蛋白質(zhì)類類高高級(jí)結(jié)構(gòu)構(gòu)的破壞壞多肽及核核酸類酶酶水解、、抑制劑脂類氧氧化二、生物物活性的的保護(hù)措措施采用緩沖沖系統(tǒng)：：防止pH變化帶帶來失活活、提取取效率下下降磷酸鹽緩緩沖液、檸檬酸鹽鹽緩沖液液等添加保護(hù)護(hù)劑：保護(hù)酶活活性中心心及某些些活性基基團(tuán)還原劑、金屬螯合合劑、適量底物物等抑制水解解酶的作作用：ETDA、熱變變性、pH值、、抑制劑劑其他保護(hù)護(hù)措施：：根據(jù)目的的物不同同性質(zhì)具具體對(duì)待待溫度、紫紫外線、、強(qiáng)酸堿堿、氧化化劑等三、影響響提取的的因素1、溫度度提取溫度度↑溶解度↑溫度↑物料的粘粘度↓，有利于分子擴(kuò)散散和機(jī)械械攪拌對(duì)不耐熱的生物活活性物質(zhì)質(zhì)的提取取，一般般在0~10℃℃有機(jī)溶劑劑提取一一般在較低溫度度下進(jìn)行2、酸堿堿度：抑制有害害酶類的的水解破破壞作用用，防止止降解，提高高收率中性：避免過酸酸或過堿堿及等電電點(diǎn)，pH4~9酸性：偏酸性介介質(zhì)（胰胰島素等等），破破壞細(xì)胞胞堿性：堿性系統(tǒng)統(tǒng)提取（（多糖類類等）3、鹽濃濃度鹽溶作用用：鹽離子作作用于生生物大分分子表面面，增加加了表面電電荷，使使之極性性增加，，水合作作用增強(qiáng)強(qiáng)，促使其形成成穩(wěn)定的的雙電層層，此現(xiàn)現(xiàn)象為鹽鹽溶作用用。與濃度和和離子強(qiáng)強(qiáng)度有關(guān)關(guān)，高價(jià)酸酸鹽作用用＞單價(jià)酸鹽鹽四、常用用的提取取方法提取方法法用酸、堿堿、鹽水水溶液提提取用表面活活性劑提提取用有機(jī)溶溶劑提取取離子型非離子型型在適當(dāng)?shù)牡膒H和和低離子子強(qiáng)度條條件下，，與脂蛋蛋白形成成微泡，，使膜滲滲透性改改變或使使之溶解解固液提取取液液提取取相似相溶溶原理溶解度差差異分配系數(shù)數(shù)與溶劑劑的用量量雙水相萃萃取法超臨界流流體萃取取法Xn=X0{}KmKm+Vn(1)分分配系系數(shù)↑，殘留物質(zhì)質(zhì)↑(2)溶溶劑↑，殘留量↓(3)提提取次數(shù)↑，殘留量↓殘留量計(jì)算算公式提取次數(shù)↑生產(chǎn)設(shè)備負(fù)負(fù)擔(dān)↑能耗↑周期↑勞動(dòng)生產(chǎn)率率↓產(chǎn)品失活生產(chǎn)上一般般提取2~3次，溶溶劑為2~5倍材料料4、生物活活性物質(zhì)的的濃縮與干干燥鹽析濃縮：：添加中性鹽鹽使Pr沉沉淀，(NH4)2SO4有機(jī)溶劑沉沉淀濃縮：：易于回收、、不必除鹽鹽、低溫葡聚糖凝膠膠濃縮：葡聚糖凝膠膠吸收膨脹脹聚乙二醇濃濃縮：透析、吸水水、效率高高超濾濃縮：：根據(jù)分子量量不同而截截留真空減壓濃濃縮與薄膜膜濃縮：溫度低、速度快一、濃縮二、干燥干燥：使物質(zhì)從固固體或半固固體狀經(jīng)出出去存在的的水分或其他他溶劑，從從而獲得干干燥物品的的過程。干燥的目的：提高藥物或或藥劑的穩(wěn)穩(wěn)定性，以以利于保存存和運(yùn)輸達(dá)到規(guī)格標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)；便于進(jìn)一步步處理。干燥方法：減壓干燥、、噴霧干燥燥、冷凍干干燥等。膜分離技術(shù)術(shù)分離范圍分離動(dòng)力一般過濾>1μm壓力差微孔過濾0.01~1μm壓力差透析5~100?分子擴(kuò)散超級(jí)過濾5~100?壓力差反滲透<5?壓力差電滲析<5?電能應(yīng)用：海水脫鹽淡淡化；醫(yī)藥工業(yè)的的純化水、、注射用水水生物大分子子物質(zhì)的濃濃縮與純化化人工腎透析析；過濾除除菌（溶液液、空氣））VC大分子小分子它是將樣品品化合物通通過一定孔孔徑的凝膠膠固定相用用于流經(jīng)體體積的差異異，使不同同分子量的的組成得以以分離的層層析。凝膠層析親和層析LSLS＋配基樣品1)配基固固定化選擇合適的的配基與不不溶性的支支撐載體偶偶聯(lián)，或共共價(jià)結(jié)合成成具有特異異性親和性性分離介質(zhì)質(zhì)。L＋L2)吸附樣樣品親和層析介介質(zhì)選擇性性吸附酶或或其它生物物活性物質(zhì)質(zhì)雜質(zhì)與層層析間沒有有親和作用用，故不能能被吸附而而被洗滌去去除。3)樣品洗洗脫選擇適宜的的條件使被被吸附的親親和介質(zhì)上上的酶或其