4/4滅菌后小導(dǎo)管內(nèi)留有氣泡的原因分析及其解決辦法大腸菌群、大腸桿菌檢測(cè)時(shí)，所用培養(yǎng)基LST、BGLB、EC肉湯等這些需要用小倒管（杜氏管）考察產(chǎn)氣的培養(yǎng)基，滅菌后，偶爾會(huì)有小氣泡留在小倒管內(nèi)，導(dǎo)致培養(yǎng)基不能使用。重復(fù)滅菌不僅費(fèi)時(shí)，更重要的是會(huì)破壞培養(yǎng)基的有效成分。為了避免這類問(wèn)題的發(fā)生，根據(jù)實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)，做出以下幾種可能原因分析：

**原因一：過(guò)早打開滅菌鍋

當(dāng)滅菌鍋壓力表示數(shù)為0而溫度表示數(shù)還高于室溫時(shí)，不要打開滅菌鍋。因?yàn)榇蜷_鍋蓋瞬間，鍋內(nèi)大量熱量散出，溫度突然降低，試管內(nèi)溫度也隨著降低，導(dǎo)致管內(nèi)氣壓減小，沸點(diǎn)降低，部分水會(huì)汽化留在小導(dǎo)管內(nèi)。

解決辦法：等滅菌鍋內(nèi)氣壓和溫度都降到與室溫一致或相差不大時(shí)再打開滅菌鍋。

**原因二：試管塞塞得太緊

在滅菌時(shí)，試管塞塞得太緊（有些硅膠塞與試管不配套）會(huì)導(dǎo)致試管內(nèi)壓力與滅菌鍋內(nèi)壓力不一致。當(dāng)滅菌鍋升溫升壓時(shí)，鍋內(nèi)壓力會(huì)大于試管內(nèi)壓力，試管內(nèi)壓力不夠，不能將小倒管內(nèi)氣體排盡，就留有氣泡；當(dāng)滅菌鍋降溫降壓時(shí)，鍋內(nèi)壓力小于管內(nèi)壓力，可能會(huì)使試管塞和培養(yǎng)基崩出，培養(yǎng)基報(bào)廢。

解決辦法：改用塑料帽、不銹鋼管帽或者與試管相匹配的硅膠塞。

*原因三：小倒管口太小

我們可以把一根毛細(xì)管一端封口，另一端插進(jìn)水里，毛細(xì)管里怎么都不會(huì)進(jìn)水。同樣把一個(gè)燒杯倒扣進(jìn)水里就很容易進(jìn)水了。小倒管在加熱加壓后，一方面液體培養(yǎng)基要進(jìn)入小倒管，另一方面小倒管內(nèi)部的空氣要被排出，如果小倒管管口太小，液體不容易進(jìn)去，里面的空氣不容易被排出，就會(huì)導(dǎo)致有小氣泡生成。

解決辦法：改用開口比較大的倒管。

原因四：培養(yǎng)基質(zhì)量引起

由培養(yǎng)基質(zhì)量引起的氣體不能排盡或培養(yǎng)基含有高溫高壓分解產(chǎn)氣的成分。滅菌時(shí)用水做培養(yǎng)基組的對(duì)照試驗(yàn)，若培養(yǎng)基組有氣泡，而對(duì)照組沒(méi)有氣泡，可確定是由此原因引起。

解決辦法：改用其它培養(yǎng)基。

原因五：滅菌鍋工作壓力不夠，使氣體不能排盡

滅菌鍋?zhàn)畲髩毫Σ粔虿荒苁构軆?nèi)液體強(qiáng)行把氣體擠出，最后還留有小氣泡，高溫高壓滅菌鍋若是溫度上升緩慢或者達(dá)不到滅菌溫度，也會(huì)出現(xiàn)類似現(xiàn)象。此原因的可能性較小，我們可以在排除原因一、二、三、四的情況下，用不加試管塞、大口導(dǎo)管做試驗(yàn)，若還仍不能達(dá)到效果，就要檢查滅菌鍋了。

解決辦法：使用檢查滅菌效果的用品－壓力蒸汽滅菌指示卡，對(duì)高溫高壓滅菌鍋的滅菌情況進(jìn)行監(jiān)測(cè)。

以上提供幾種可能形成氣泡的主要原因，還有幾點(diǎn)建議：

1.可以在高壓鍋壓力降下來(lái)后，溫度不太高的時(shí)候?qū)⑴囵B(yǎng)基從鍋中拿出，迅速放在冷水中，急冷，注意要使冷水高度超過(guò)試管中液面高度。利用熱脹冷縮的原理，可以使小倒管中氣泡排出。

2.若使用非全自動(dòng)高溫高壓滅菌鍋（此類鍋一般需要在100℃手動(dòng)關(guān)閉放氣閥），則不要在鍋剛達(dá)到100℃時(shí)就關(guān)閉放氣閥，可以讓高壓鍋在100℃時(shí)多排一會(huì)兒熱氣，這樣有助于小倒管中氣體排出。

此外，盡量不要采用將滅菌后的