1、免疫組化4雙重或多重標記41、俯仰終宇宙，不樂復何如。42、夏日長抱饑，寒夜無被眠。43、不戚戚于貧賤，不汲汲于富貴。44、欲言無予和，揮杯勸孤影。45、盛年不重來，一日難再晨。及時當勉勵，歲月不待人。免疫組化4雙重或多重標記免疫組化4雙重或多重標記41、俯仰終宇宙，不樂復何如。42、夏日長抱饑，寒夜無被眠。43、不戚戚于貧賤，不汲汲于富貴。44、欲言無予和，揮杯勸孤影。45、盛年不重來，一日難再晨。及時當勉勵，歲月不待人。操作的原則和要求基本上與單標免疫組化方法雷同優點:不同抗原成分位置、功能關系更直觀缺點:流程長脫片機率更高前后重染色試劑間有交叉干擾z 信息技術與課程整合是課程改革的主要目

2、標之一，中小學教師也為之努力實踐，制作CAI課件輔助課堂教學、開展網絡自主學習、網絡協作教學等。但是在探索整合的過程中，遇到了不少的困惑和問題，有些理論層面的、有些是技術層面的。理論層面，缺乏課程整合的理論與方法指導；有些理論層次較高，在中小學操作起來難度較大。技術層面，在開展網絡自主學習、網絡協作學習過程中，電子作業、電子作文如何批改，如何給作業或作文的任一部分寫評語，電子作業又如何管理；如何進一步簡化演示文稿制作，能否將Word文檔直接在屏幕上演示，效果怎么樣；在語文教學中，如何為漢字加上拼音；在數學教學中，如何編寫數學公式等等。 Word是我們最常用的應用軟件之一，有些功能為我們課程整合

3、作好了準備。下面針對上面的幾個問題，介紹幾個Word應用小技巧（以Word 2003為例），使Word 更充分地應用到學科教學中去，應用小技巧也能進行有效整合。 一、“修訂”與“批注”功能相結合實現電子作業批改 很多中小學教師對電子作業的批改還不是很適應，通常的做法是對電子作業直接進行修改，在作業的最后以不同的格式寫一個評語，然后再發回給學生。但是這樣做破壞了作業的本來面目，學生也不容易一目了解地看到老師對那些內容作了批改，使學生感到電子作業的批改反而沒紙質作業的批改來得直觀。那么是否有比較方便、比紙質作業批改更直觀的方法批改電子作業呢？其實Word就提供了這樣的功能，用“修訂”功能可以方便地

4、對電子作業進行批改，用“批注”功能可以對作業中的任一部分內容寫評語，兩者相結合可以方便地實現電子作業的批改，效果比紙質作業的批改更加直觀，而且還保持學生作業的原貌，學生可以有選擇地接受或拒絕老師所作的修改。 二、用“索引和目錄”管理電子作業 信息技術與學科課程進行整合，學生的許多作業數字化了。如果每個作業都放在單個文件中，管理起來不是很方便，所以最好將同一課程一個學期的作業放在同一個文件中，就好比是一個作業本。這樣一來，這個Word文檔頁數就比較多。如果要經常翻頁，閱讀就不是很方便，有沒有較簡便的方法為這個作業做一個導航呢？Word的“索引和目錄”功能能為文檔快速地生成一個目錄，而且這個目錄具

5、有導航功能。有了這個具有導航功能的目錄就可以很方便地導航到每一個作業。 首先要說明一點，要使用“索引和目錄”功能，Word文檔的格式設置必須規范化。要生成目錄的要點必須設置為標題樣式，例如：作業的主題可設置為“標題1”樣式；“1、題目1；2、題目2；3、題目3”設置為“標題2”樣式；其它內容設置為“正文”樣式，默認是“正文”樣式。“樣式設置”選擇框在“格式”工具欄上，“字體”選擇框的左邊。設置好樣式后，插入頁碼，如果還有其它格式要求，仍可繼續設置。 把光標定位到要生成目錄的位置，單擊“插入”“引用” “索引和目錄”；單擊“目錄”選項卡，單擊“確定”按鈕，Word就自動生成了文檔的目錄，而且像超

6、鏈接一樣，可以通過單擊目錄的條目直接跳轉到文檔中相應的位置。如果以后對文檔內容再次進行了修改，改變了頁數，只需在目錄上右擊，選擇“更新域”，出現對話框，再選擇“更新整個目錄”，單擊“確定”即可，目錄又和文檔內容保持一致了。 三、用“閱讀版式”視圖簡化多媒體教學 新課程實施后，要求對教學內容進行教學設計，大部分老師用Word編寫；然后再將教學設計中“教學過程”部分制作成PPT演示文稿或其他形式的課件，用于課堂多媒體教學。但課件制作增加了老師的工作量，能不能直接將Word用于多媒體教學。Word的“閱讀版式”視圖，具有較好的演示功能，可以代替PowerPoint演示文稿直接用于多媒體教學，提高了工

7、作效率。 Word 2003在原有的“普通”、“Web版式”、“頁面”和“大綱”四種瀏覽視圖基礎上，又增加了“閱讀版式”視圖，以便于更方便地閱讀Word文檔。啟動“閱讀版式”視圖的方法：選擇“視圖”“閱讀版式”，或者單擊常用工具欄中的“閱讀”按鈕。在閱讀版式視圖中，字號變大了，每一行變得短些，適合在大屏幕上演示，閱讀起來比較貼近于自然習慣，使閱讀變得更輕松；在閱讀的同時，還能對文檔進行修訂。 四、用“拼音指南”為文字標注拼音 Word通過微軟拼音輸入法2003實現了在漢字上標注拼音的功能。您可以用以下步驟實現拼音標注功能：1）在Word中選定要標注拼音的漢字；2）單擊“格式”“中文版式” “拼

8、音指南”，或者單擊“格式”工具欄中的“拼音指南”按鈕；3）出現“拼音指南”對話框出現，設定拼音的“字號”，單擊“確定”按鈕，漢語拼音就自動標記在選定的漢字上了。例1：那(n) 只(zh) 敏(mn) 捷(ji) 的(de) 棕(zng) 毛(mo)狐(h) 貍(li) 躍(yu) 過(gu) 那(n) 只(zh) 懶(ln) 狗(gu)。 當我們遇到不認識的漢字時，也可以用拼音指南查看它的拼音。 整合是一個不斷發展的過程，不同的學科的整合模式也是有差異的，要一步一步來，我們不可能一下子就做到信息技術與學科課程的全面整合。 在小學數學教學中,提問是課堂教學的重要組成部分,也是教學中使用頻率最高的

9、教學手段,越來越多地受到教師們的重視。目前的研究表明,教師和學生之間的語言交流有40%到60%是以教師提問的形式進行的,教師大約平均每70秒左右便提出一個問題。如果教師的提問平平淡淡,總是“老調重彈”,就不可能吸引學生;相反,如果我們使用一些小策略來提問,不僅能激發學生學習興趣,啟發學生深入思考,也有助于進一步開拓學生的學習思路,發掘學生的學習潛能,并培養學生分析、解決問題的能力及創新精神,從而提高課堂教學效率。 一、創設問題小策略 1.創設問題要目的明確 提問是為了引起學生的思考,從而讓學生掌握知識、發展學生的智力、技能、情感。所以,提問不僅要有目標,而且目標要十分明確。因為提問本身就是達到

10、目標的重要手段之一。教師應認真鉆研教材,根據學生的認知基礎,圍繞教學目標,精心設計出突破重點、難點的主要問題。根據教學內容的主次設計個別提問、整體提問,使課堂提問有的放矢。 2.創設問題要有科學性 設計問題時要考慮問題在教學中的作用、意義和效果,對提問所產生的實際影響進行科學的評估,把握問題的難易程度。這樣會隨著問題的解決,學生的思路也一步步展開,學生才能循序漸進地認識問題,掌握知識。 此外,提問時教師要留給學生一定的思考時間,要注意防止隨意性問題和抽象性問題過多,更要防止事實性問題過多。要善于創設問題情境,面向全體學生,特別要“偏愛”后進生。 3.創設問題要控制“度” 首先,課堂提問次數應控

11、制數量,不宜過頻。“滿堂問”被認為是“填鴨式”教學,是被否定的;想到什么就問什么的隨意的提問過多,會導致無效提問。這使師生糾纏于無關緊要的細節,無益于掌握教學的重點、難點,從而影響教學目標的完成。因此,教師的提問次數應保持在一定范圍內。 其次,教師要把握好問題的難易度。我們都知道,人的認知水平可劃分為三個層次:已知區、最近發展區、未知區。那么我們的課堂提問就不能提得太簡單(已知區)或太難(未知區),提問要與學生的智力和知識水平相適應,使問題符合學生的“最近發展區”,讓學生“跳一跳就能摘到桃子”。 4.創設問題要有趣味 激發學生積極思維的最佳策略便是激發學習興趣。蘇霍姆林斯基指出:當課堂上所講的

12、教材里既包含一定“份額”的已知的東西,又包含一定“份額”的新的東西,才能喚起建立在思維本質上面的穩定的興趣。教師要把握教學目標,依據教材,構思既有知識情趣,又能引導學生深入思考的問題。教學“圓的認識”時,教師可設問:“你們見過的自行車輪是什么形狀的?”“有正方形、三角形的車輪嗎?為什么?”“那么橢圓形的行不行?”隨著對這幾個新奇問題的思考、討論,學生思維逐步接近圓的本質,思維狀態積極興奮。 二、課堂提問小策略 1.課堂提問語言要準確 數學語言的特點是嚴謹、簡潔、符號化,教師的提問語言既要顧及數學的特點,又要結合學生的認知特點,能用準確精煉地用自然語言表述,讓學生明確無誤地找到思考的方向。像“你

13、能提出什么問題?”“你得到了哪些信息?”這樣過大、過于寬泛的問題學生容易“跑調”,學生很難被引入課堂學習的正軌,造成課堂時間的不足,從而導致課堂效率低下。而像“你能提出一個加法問題嗎?”“圖中一共有多少只小鳥?”之類的準確的數學提問,學生就能馬上進入教師的設計中來。 2.課堂提問要找準時機 提問可以在一節課內任何時刻進行,但不同時刻的提問所取得的效果是不盡相同的。也就是說,提問存在著一個最佳時間,在一節課內,只有少數幾個瞬間時刻是提問的最佳時間。教師必須善于察言觀色,注意學生的表情和反饋信息,及時抓住這些最佳時刻。根據課前設計,在教學中提問要問到關鍵處,問到點子上,問出水平來。當學生對問題不能

14、正確回答時,提示與探詢是必要手段;對學生答案中出現的錯誤或不確切的內容,或者思維方法上的不足,要及時給予提示。要善于運用探詢的方法幫助學生更深入地思考,給出更完整的答案,并運用追問、解釋等幫助學生回答,最終達到滿意的效果。 3.提問要有啟發性 教師恰到好處的提問,不僅能激發學生強烈的求知欲望,而且還能促進其知識內化。課堂教學中教師的主導作用發揮得如何,取決于教師引導啟發作用發揮的程度,因此課堂提問必須具備啟發性。通過提問、解疑的思維過程,達到誘導思維的目的。要有展現思維過程的提問,不應滿足學生根據初步影響得出的判斷,而要強調學生說明怎樣分析理解的道理,也就是說學生不僅得知其然,還得知其所以然。

15、 4.課堂提問要靈活 教師在精心設計的前提下,還要做到隨機應變,靈活運用,才能達到事半功倍的效果。圍繞教學中心、重點和難點而精心設計幾個提問是十分必要的。但教學過程是師生雙方信息交流的過程,因而不排除在師生交流過程中出現一些教師在備課時沒有想到的事情發生,一旦問題出現,教師就要靈活地根據教學活動的情況,當場設計出一些提問,以調整和改善教與學的活動。 科學、適度的問題設計,靈活、精準的課堂提問,讓“問”能使課堂這片水池波瀾起伏、有聲有色, 激起學生思維的漣漪和心靈的浪花。因此,在整個教學過程中,教師只有從根本上形成對問的正確觀念,只有誠心誠意的把學生當作學習的主人,靈活應用問的策略,才能以不變應

16、萬變。讓我們問出“學問”、問出“精彩”,讓“小問”創造“大智慧”!免疫組化4雙重或多重標記41、俯仰終宇宙，不樂復何如。免疫組操作的原則和要求基本上與單標免疫組化方法雷同優點:不同抗原成分位置、功能關系更直觀缺點:流程長脫片機率更高前后重染色試劑間有交叉干擾操作的原則和要求基本上與單標免疫組化z免疫組化4雙重或多重標記共29張課件二、技術類型)雙重或多重免疫熒光標記染色采用呈現不同顏色的熒光色素配伍,分別標記不同的抗體,再通過各自與同切片上的相應抗原特異性結合而加以區別顯示所建立起來的雙重或多重免疫組化染色技術。二、技術類型優點:方法敏感、特異缺點:需選用各自特定的激發濾光片分別觀察或二次曝光

17、顯影樣本不能長期保存組織結構背景不清晰。優點:方法敏感、特異直接法-特異、快速技術類型間接法-敏感、多用異種動物抗體-常混合應用,操作步驟少,脫片率相對較低抗體試劑同種動物抗體-分別應用,操作步驟加倍,脫片機率較高;前后重免疫熒光標記交叉重疊機會多,需用酸性洗脫或多聚甲醛蒸氣處理直接法-特異、快速操作舉例:垂體腺瘤-ACTH與GH雙重免疫熒光標記染色(間接法)(1)石蠟切片,脫蠟,梯度酒精水化,入PBS(2)1%人血清白蛋白(HAS)孵育10min(3)抗ACTH血清(McAb)1:200,孵育(40.05mo/LTBs洗操作舉例:垂體腺瘤-ACTH與GH(5)羊抗鼠IgG- TRITC,避光

18、反應Ih(6)0.05mol/L TBS(pH7. 4)5(第一重 ACTH-TRITO標記染色已完成)。()切片脫水,二甲苯透明,空氣干燥后,置于裝有多聚甲醛粉末的密閉容器內,放在80烤箱或溫箱內以甲醛蒸氣固定24h,使第一重染色中二抗的抗原結合部位失活。(5)羊抗鼠IgG- TRITC,避光反應Ih(8)切片以TBS洗(9)1%HSA孵育30min(10)抗GH血清(McAb)1:400,孵育30min(11)0.05mol/L TBS(pH7. 4)6t(12)羊抗鼠IgG-FITC,避光反應1h(13)0.05mol/L TBS(pH7. 4)vt(第二重 GH FITO標記染色完成)。(14)緩沖甘油封片。(8)切片以TBS洗(15)熒光顯微鏡下分別以546mm及490mm波長的激發光觀察