1、第四講 氣相色譜法在中成藥分析中的應用01020304原理及特點系統適用性實驗實驗條件的選擇定量分析方法 氣 相 色 譜01 原理及特點 氣相色譜是根據氣化后的試樣被載氣帶入色譜柱，由于各組分在兩相間作用不同在色譜柱中的移動有快有慢，經一定柱長后得到分離將各組分的濃度或質量轉換成電信號并記錄成色譜圖，利用色譜峰保留值進行定性分析，根據峰高或峰面積而進行定量分析的方法。01 兩個基本理論塔板理論速率理論熱力學觀點動力學觀點02系統適用性試驗01020304色譜柱的理論塔板數 n分離度R拖尾因子T重復性A固定相的選擇反映了固定液的選擇性，越大，表明固定液的選擇性好。當=1時，無論柱效有多高，為多大

2、，R都為零，兩組分不能分離。增加固定液的用量可增大保留因子從而提高分離度，但會延長分析時間，而且固定液若太厚，傳質阻抗增大，引起譜峰展寬。大多采用高分子多孔微球(GDX)，用于分離水及含羥基(醇)化合物。B柱溫的選擇根據樣品的沸點來選擇。（1）高沸點的樣品（300400），采用15低固定液配比，柱溫200250。（2）沸點為200300的樣品，采用510固定液配比，柱溫150180。（3）沸點為100200的樣品，采用1015固定液配比，柱溫選各組分的平均沸點2/3左右。（4）氣體等低沸點樣品，采用1525高固定液配比，柱溫選沸點左右，在室溫或50下進行分析。（5）對于寬沸程樣品，需采用程序升

3、溫方法進行分析。D檢測器用于中藥制劑分析的檢測器有熱導檢測器（TCD）、氫焰離子化檢測器(FID)、氮-磷檢測器（NPD）、電子捕獲檢測器（ECD）。FID是中藥制劑分析中應用最廣泛的質量檢測器，適用于含碳有機物的測定，載氣多為N2。NPD為專屬性檢測器，對含N、P有機化合物特別敏感，可用于中藥及其制劑中農藥殘留量的檢測。ECD也是一種專屬性檢測器，適用于痕量電負性大的有機物，如含鹵素、硫、氧、硝基、碳基、氰基等化合物的分析。E其他條件的選擇氣化室(進樣口)溫度：高于柱溫3050。對于熱不穩定性組分應盡可能采用較低溫度，防止其分解。檢測室溫度：為了使色譜柱的流出物不在檢測器中冷凝而產生污染，一

4、般檢測室溫度需高于柱溫20-50進樣量：進樣必須快速，一般在1秒以內完成。盡量減少進樣量，若進樣量太多則會使柱超載時縫寬增大，峰形不正常。04定量分析方法內標法外標法歸一化法B外標法外標法分為工作曲線法及外標一點法等當工作曲線截距為零時可采用外標一點法定量外標法操作簡單，計算方便，不需要校正因子，但要求進樣量準確及實驗條件恒定。C歸一化法優點是簡便，定量結果與進樣量重復性無關，操作條件略有變化對結果影響較小。缺點是要求所有組分均要產生色譜峰，不適用于中藥中微量成分的含量測定。【含量測定】（2015版藥典）色譜條件與系統適用性實驗 以聚乙二醇20000（PEG-20M）為固定相的毛細管柱（柱長為

5、30m，內徑為0.25mm，膜厚度為0.32m）；柱溫為程序升溫，初始溫度為130，保存4分鐘，以每分鐘8的速度升溫至200 ，保持10分鐘；分流進樣，分流比為10：1.理論塔板數按龍腦峰計算應不低于10000.校正因子測定 取丁香酚適量，精密稱定，加乙酸乙酯制成每1ml含2mg的溶液，作為內標溶液。另取龍腦對照品適量，精密稱定，加乙酸乙酯制成每1ml含2mg的溶液，作為對照溶液。分別精密吸取上述兩種溶液各2ml，混勻，吸取1l，注入氣相色譜儀，測定，計算校正因子。測定法 取本品規格(1)、(2)6片或規格(3)3片，除去蓋襯，剪成小塊，置具塞錐形瓶中，精密加入乙酸乙酯25ml，密塞，稱定重量，超聲處理（功率250w，頻率33kHz）30分鐘，放冷，再稱定重量，用乙酸乙酯補足減失的重量，搖勻，濾過，分別精密吸取續濾液及內標溶液各2ml，混勻，吸取1l，注入氣相色譜儀，測定，即得。 本品每片含冰片以龍腦（C10H18O）計，規格(1)不得少