1、苛養菌及人畜共患詳解演示文稿第一頁，共四十五頁。（優選）苛養菌及人畜共患第二頁，共四十五頁。第一節 嗜血桿菌屬(Haemophilus)嗜血桿菌屬為一群無動力、無芽胞、菌體呈球桿狀的革蘭陰性小桿菌，生長營養需求高，培養時需人工加入新鮮血液(X因子和V因子)才能生長，故稱嗜血桿菌。對人類有致病意義的種有:流感嗜血桿菌(H.influenzae)、副流感嗜血桿菌(H.parainfluenzae)、杜克雷嗜血桿菌(H.ducreyi)、嗜沫嗜血桿菌(H.aphrophilus)第三頁，共四十五頁。一、生物學性狀形態與染色：菌體短小、兩端鈍圓、革蘭陰性小桿菌。從病灶中新分離的菌株多呈球桿狀或雙球狀，

2、有時可呈短鏈。在陳舊培養物中呈多形性，有長桿狀或絲狀體。粘液型菌株有莢膜，有莢膜菌株多伴較強的毒力。痰標本涂片革蘭染色（流感嗜血桿菌）第四頁，共四十五頁。培養特性:需氧或兼性厭氧，初次分離需510%CO2才能生長良好，營養要求苛刻，在加入新鮮血液（含X因子和V因子）的巧克力培養基上經24h培養，見灰白色、圓形、光滑、半透明、直徑 0.5 1mm小菌落。 部分毒性菌株(b型Hi) 可見粘液型菌落。第五頁，共四十五頁。X因子V因子X因子是對熱穩定的物質，存在于血紅蛋白中的一種血紅蛋白衍生物，是一種含鐵的卟啉。它是細菌合成過氧化物酶、過氧化氫酶、細胞色素氧化酶的輔基，這些酶類提供細菌氧化還原時進行電

3、子傳遞。V因子是對熱不穩定的維生素B類物質，存在于血液和某些植物組織中。它是一種脫氫酶的輔酶，在細菌的呼吸中起遞氫作用?？梢愿鶕毦鷮V因子需要的不同進行嗜血桿菌屬細菌的鑒定(見P295表19-1)第六頁，共四十五頁。培養特性:衛星現象：金黃色葡萄球菌和流感嗜血桿菌共同培養，由于金黃色葡萄球菌能合成較多的V因子，可以促進流感嗜血桿菌的生長，故在平板上可見金黃色葡萄球菌菌落周圍生長的流感嗜血桿菌菌落大，而相對較遠處的流感嗜血桿菌菌落較小，此現象稱為“衛星現象”第七頁，共四十五頁。衛星現象第八頁，共四十五頁。生化反應對流感嗜血桿菌和副流感嗜血桿菌的鑒別常使用吲哚、脲酶、鳥氨酸脫羧酶等試驗進行(見

4、P296表19-2)，由于嗜血桿菌屬細菌生化反應的不穩定性，現多采用半自動化鑒定。第九頁，共四十五頁。生化反應菌種和生物型吲哚尿素酶鳥氨酸脫羧酶流感桿菌生物型IIIIIIIVVVIVIIVIII副流感桿菌生物型IIIIIIIVVVIVIIVIII第十頁，共四十五頁。二、臨床意義流感嗜血桿菌：以b型有莢膜株致病為主，以兒童為主，成人較少。在引起肺炎的革蘭陰性菌中本菌占第3位，僅次于銅綠假單胞菌和肺炎克雷伯菌。副流感嗜血桿菌：在某些地區致病情況與流感相似，甚至超過前者。嗜沫、副嗜沫、溶血嗜血桿菌：上呼吸道常居菌，條件致病。杜克雷嗜血桿菌：軟性下疳的病原菌。第十一頁，共四十五頁。三、微生物學檢查(一

5、)標本采集 根據病變部位采集不同標本。肺部感染患者應盡量減少上呼吸道分泌物的污染。(二)檢驗程序:見P297流程圖第十二頁，共四十五頁。三、微生物學檢查(三)檢驗方法1、直接鏡檢:多用于腦脊液和膿液標本的檢驗，對呼吸道標本一般不采用直接鏡檢方法，總體意義不大。2、分離培養：氣體環境、培養基、XV因子需要、抑菌物質(每毫升巧克力瓊脂內加萬古霉素50ug，桿菌肽300ug，氯林可霉素1ug)、衛星現象第十三頁，共四十五頁。檢驗方法X因子V因子需要試驗菌 名生長需要X因子V因子流感副流感流感嗜血桿菌副流感嗜血桿菌第十四頁，共四十五頁。四、預防措施對Hib感染最有效的預防措施是肌肉注射Hib偶聯菌苗。

6、芬蘭赫爾辛基于70年代后期在04歲兒童中Hib腦膜炎的發病率為43/10萬。注射上述菌苗后到1991年發病率降為0。Hib的PRP可與4種蛋白載體（變異性白喉桿菌蛋白Oligosaccharide CRM197 protein, HbOC、白喉桿菌類毒素Diphtheria toxoids, D、腦膜炎雙球菌外膜蛋白復合物Outer membrane protein compound, OMPC和破傷風桿菌類毒素Tetanus toxoid，T）偶聯，分別構成4種類型的偶聯菌苗：PRP-HbOC、PRP-D、PRP-OMPC和PRP-T。目前至少有25個國家將Hib偶聯菌苗列入兒童的免疫計劃。

7、Hib偶聯菌苗價格較昂貴，限制了它在發展國家內應用，因此有人報道了一種經濟的接種方案，即是給嬰兒接種1/2或1/3 三針全劑量的Hib偶聯菌苗，借此替代常規3針全劑量免疫的接種方案。以替代方案接種后91100的嬰兒仍可達到保護性抗體的濃度30.15mg/ml），與3針全劑量的接種方案所產生的結果相似。若采用替代的接種方案可減少菌苗接種的費用，以利于在發展國家中推廣應用Hib偶聯菌苗。第十五頁，共四十五頁。補充資料 軟下疳1:該圖為典型的鏈狀排列的杜克雷嗜血桿菌，用人血液培養后取材涂片，革蘭氏染色陰性，鏈狀排列。第十六頁，共四十五頁。補充資料軟下疳3:左側腹股溝部有一個潛行性較深潰瘍，邊緣不整齊

8、，略呈蛇形，潰瘍基底有膿性滲出物，潰瘍周圍皮膚呈現紫紅色暈。另有三個豆大、一個指頭大衛星狀潰瘍性病損。病損觸之疼痛。橫痃第十七頁，共四十五頁。第三節 鮑特菌屬(Bordetella)百日咳鮑特菌(B.pertussis)俗稱百日咳桿菌副百日咳鮑特菌(B.parapertussis)支氣管敗血鮑特菌(B.branchiseptica)鳥鮑特菌(B.avium)第十八頁，共四十五頁。一、生物學性狀（百日咳鮑特菌）形態染色：革蘭陰性小桿菌，無芽胞，有莢膜。在液體培養基中可呈短鏈狀存在。培養：專性需氧。營養要求高，在鮑-金培(bordet-gengou)養基上需3-5天才能長出可見菌落。生化反應：見P

9、301表19-5對抗生素的敏感性:紅霉素首選,其次氨芐青霉素、阿莫西林、利福平、復方SMZ等。第十九頁，共四十五頁。二、臨床意義:百日咳鮑特菌是百日咳的病原菌1、疾病分期:卡他期：癥狀無特異性，與病毒性感冒類似，1-2周，此期傳染性最強，采集標本陽性率最高。痙攣期：以陣發性劇烈咳嗽為主，1-4周，日平均發生10-20次（類似雞鳴），但嬰幼兒的咳嗽癥狀可以不明顯，而以合并癥為主，如肺炎、出血、神經系統癥狀等。恢復期：陣咳減輕，完全 恢復需數周到數月。第二十頁，共四十五頁。痙咳期:咳嗽由單聲咳變為陣咳，連續十余聲至數十聲短促的咳嗽，繼而一次深長的吸氣，因聲門仍處收縮狀態，故發出雞鳴樣吼聲，以后又是

10、一連串陣咳，如此反復，直至咳出粘稠痰液或吐出胃內容物為止。每次陣咳發作可持續數分鐘，每日可達十數次至數十次，日輕夜重。陣咳時患兒往往面紅耳赤，涕淚交流、面唇發紺，大小便失禁。少數病人痙咳頻繁可出現眼瞼浮腫、眼結膜及鼻粘膜出血，舌外伸被下門齒損傷舌系帶而形成潰瘍。成人及年長兒童可無典型痙咳。嬰兒由于聲門狹小，痙咳時可發生呼吸暫停，并可因腦缺氧而抽搐，甚至死亡。此期短則12周。長者可達2月。二、臨床意義(補充)第二十一頁，共四十五頁。二、臨床意義:2、毒素(共有3種)百日咳毒素(PT):該菌的主要毒力因子，與陣發性劇咳等臨床表現有關。絲狀血細胞凝集素(FHA):促進病原體與纖毛上皮細胞粘附。腺嘌呤

11、環酶毒素(ACT):使吞噬細胞內cAMP濃度升高從而抑制其氧化活性，使呼吸道粘膜的抵抗力下降。第二十二頁，共四十五頁。三、微生物學檢查(一)標本采集： 通常在發病早期(1周內)采集鼻、咽拭子，做床邊接種或立即送至實驗室，采時間越遲陽性率越低，對小兒也可用咳碟法。(二)檢驗程序：見P302流程圖第二十三頁，共四十五頁。三、微生物學檢查(三)直接檢查（無特異性）DFA直接熒光抗體檢查：可見外周黃綠色螢光，中心暗色的球桿菌，5個典型形態者為陽性?？乖瓩z出：用單克隆抗體如ELISA法。PCR法檢測核酸：目前缺乏統一的質量控制標準。第二十四頁，共四十五頁。(四)分離培養培養基：鮑-金培養基或活性炭-馬血

12、瓊脂，培養3-5天可檢出菌落。第二十五頁，共四十五頁。(五)鑒定依據革蘭陰性小桿菌，無動力DFA法陽性普通血平板或巧克力平板不生長鮑-金培養基生長緩慢觸酶陽性，氧化酶陽性第二十六頁，共四十五頁。人獸共患病原菌布魯菌屬(小細菌)鼠疫耶爾森菌(腸桿菌科)土拉熱弗朗西斯菌(小細菌)鼻疽假單胞菌(假單胞菌)紅斑丹毒絲菌(需氧革蘭陽性桿菌)炭疽芽胞桿菌(需氧革蘭陽性桿菌)第二十七頁，共四十五頁。第二節 布魯菌屬Brceulla P298經DNA-DNA雜交證實只有一個種，其它均為生物變種。對人類有致病的生物變種有：牛布魯菌：流產布魯菌羊布魯菌：馬爾他布魯菌豬布魯菌犬布魯菌第二十八頁，共四十五頁。一、生物

13、學性狀形態染色：革蘭陰性小球桿菌，革蘭染色復染效果不好需延時至3min。培養特性：需氧，初次需5%-10%CO2。營養要求高。生化反應：觸酶、氧化酶陽性(對人類有致病者)第二十九頁，共四十五頁。二、臨床意義該病原菌引起人類布魯菌病，可以通過皮膚、呼吸道、消化道進入人體感染。感染人群多與動物性食品、毛皮加工或食用未消毒的牛奶感染?；颊咧饕獮榫Y表現：發熱(波浪熱)和其它全身癥狀。第三十頁，共四十五頁。第五節 弗朗西斯菌屬Francisella P304該屬只有一個種：土拉熱弗朗西斯菌，引起人類土拉熱。病原菌常由野兔攜帶，又稱野兔熱桿菌?？梢蛑苯咏佑|而感染，也可因動物咬傷、蚊蟲叮咬、食入污染食物

14、、吸入等途徑感染。感染后表現為發熱、劇烈頭痛、關節痛，甚至發生衰竭和休克，表現與傷寒類似。局部感染時可出現潰瘍，局部淋巴結腫大、壞死等。第三十一頁，共四十五頁。第三節 紅斑丹毒絲菌Erysipelothrix rhusiopathiae P262本菌為紅紅斑丹毒絲菌病的病原菌。急性傳染，多發于家畜，人也可因接觸而引起皮膚軟組織感染，稱類丹毒。生物學性狀：革蘭陽性桿菌，厭氧或微需氧，觸酶氧化酶均陰性。臨床意義：多發生于屠宰工人和魚、肉加工人員或獸醫。類丹毒為一種傳染性皮炎，常始于傷口，局部形成病灶，皮膚紅腫有水皰，局部淋巴結腫大，可伴有關節炎或全身癥狀。因可以產生蔓延性水腫，民間俗稱“流火”。第

15、三十二頁，共四十五頁。丹毒左側大腿內側鮮紅一片，境界清楚，稍高出皮表，壓之皮色變白，放手即紅。大腿根部起紫色水泡，水泡破潰，基底色赤，痛如火燎，伴惡寒發熱，腿根部有腫大臖核。第三十三頁，共四十五頁。丹毒耳郭局部潮紅，邊緣清晰，與正常皮膚界限分明，皮膚表面有光澤并稍隆起。第三十四頁，共四十五頁。第二節 炭疽芽胞桿菌Bacillus anthracis P256炭疽芽胞桿菌簡稱炭疽桿菌，引起人或動物炭疽病。宿主廣泛，傳播方式多樣，芽胞抵抗力很強，病死率很高。9.11事件后曾在美國部分地區引起大恐慌。第三十五頁，共四十五頁。(一)生物學性狀本菌為致病性細菌中最大的革蘭陽性桿菌。菌體兩端平齊，培養后呈

16、竹節狀排列。芽胞多在有氧條件下形成，產毒株有明顯的莢膜。需氧或兼性厭氧，普通培養基上形成灰、粗糙型菌落，邊緣不整、卷發狀。液體培養基中由于形成長鏈而呈絮狀生長，在明膠培養基中可使表面液化呈漏斗狀，在深部由于沿穿刺線擴散生長成倒松樹狀。第三十六頁，共四十五頁。炭疽芽胞桿菌在普通瓊脂平板培養24小時,長成直徑24mm的粗糙菌落。菌落呈毛玻璃狀，邊緣不整齊，呈卷發狀，有一個或數個小尾突起，這是本菌向外伸延繁殖所致 。第三十七頁，共四十五頁。炭疽芽胞桿菌炭疽芽孢桿菌的芽胞：芽胞細胞質（SMp），芽胞類核（SN），芽胞細胞膜（SM），芽胞細胞壁（SW），芽胞皮層（SCt），外芽胞膜（OSM），和芽胞殼（

17、SC） 超薄切片，81 000第三十八頁，共四十五頁。炭疽芽胞桿菌炭疽芽孢桿菌的芽孢：，發芽中的芽孢，芽胞殼（）已崩解；發芽的芽胞，芽胞殼和胞子囊（）均已崩解；，芽孢已釋放，僅存芽胞囊碎片（）超薄切片，28 000第三十九頁，共四十五頁。炭疽芽胞桿菌炭疽是炭疽桿菌所致人和畜類都可發生的急性傳染病，可分皮膚炭疽，肺炭疽和腸炭疽三型。診斷要點：皮膚炭疽通常發生于面，頸，手和前臂等露出部位的皮膚，往往單發。組織顯著腫脹及浸潤，由于組織出血壞死，在病灶的中心區可形成明顯凹陷的黑色干痂。局部淋巴結腫大且常化膿。病人常有發熱，嘔吐，頭痛，關節痛及全身不適等癥狀。大部分病例經1-2周后黑痂脫落而成潰瘍，愈合

18、成疤。少數嚴重病例。局部呈大片水腫及壞死。伴有高熱和嚴重的全身中毒癥狀，可致死亡。 第四十頁，共四十五頁。炭疽芽胞桿菌炭疽芽胞桿菌菌落表面的細胞呈曲線排列（）金屬鍍膜，1 500第四十一頁，共四十五頁。5、抗原結構莢膜多肽抗原，能抑制調理作用，與細菌的侵襲力有關，也能抗吞噬; 由D谷氨酸多肽組成，抗原性單一，若以高效價抗莢膜血清與具莢膜炭疽桿菌作用，在其周邊外發生抗體的特異性沉淀反應，鏡下可見莢膜腫脹。菌體多糖抗原， 由等分子量的乙?；咸烟前泛虳半乳糖組成，能耐熱，與毒力無關。這種抗原沒有特異性，能與其他需氧芽胞桿菌，肺炎球菌14型及人類A血型物質發生交叉反應。芽胞抗原，芽胞抗原有免疫原性及血清學診斷價值。保護性抗原，為一種蛋白質，是炭疽毒素的組成部分，具有很強的免疫原性； 第四十二頁，共四十五頁。6、毒素炭疽桿菌繁殖體能分泌炭疽毒素，此毒素由第因子（水腫因子，EF）、第因子（保護性抗原，PA）及第因子（致死因子，LF）所組成的復合多聚體。3種成分混合注入動物體內就出現炭疽病典型中毒癥狀。具有抗吞噬作用與免疫原性。 第四十三頁，共四十五頁。7、抵抗力繁殖體 562小時、751分鐘 可被殺滅。繁殖體 常用濃度的消毒劑也能迅速殺滅。芽 胞 抵抗力