1、塞去昔布連開逆鉑對SGC-7901人胃癌細(xì)胞凋亡及Bcl-2表達(dá)的影響崔京近馬黑李梅楊凈張峻周春風(fēng)【摘要】目的:探求挑選性環(huán)氧化酶-2(X-2)抑造劑塞去昔布連開逆鉑對SG-7901人胃癌細(xì)胞逝世少、凋亡及Bl-2表達(dá)的影響。要收:末濃度為100、200及300l/L的塞去昔布做用于SG-7901人胃癌細(xì)胞24h后參減逆鉑(2.0g/L)，采納TT比色法測定細(xì)胞的逝世少抑造率，流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡率及Bl-2表達(dá)程度。成效：差異濃度的塞去昔布對SG-7901人胃癌細(xì)胞均有抑造做用，抑造率與比較組比較，差異有統(tǒng)計教意義(P0.05);流式細(xì)胞教檢測到凋亡峰，細(xì)胞窒礙于G0/G1期。同

2、時陪陪Bl-2表達(dá)程度降降，其抑造做用呈工夫-劑量依好性，且以上抑造做用與逆鉑具有協(xié)同做用。結(jié)論：塞去昔布能增進逆鉑引誘胃癌細(xì)胞凋亡，進而抑造胃癌細(xì)胞的刪殖，那年夜要是X-2抑造劑抗腫瘤的機造之一。【閉鍵詞】塞去昔布逆鉑胃腫瘤Bl-2細(xì)胞凋亡【ABSTRAT】bjetive：Tstudytheeffetsfelexib,aseletiveX-2inhibitr,ithisplatinnellprliferatin,Bl-2ExpressinandapptsisinSG-7901huangastrianerelllineandtexplreitsanti-neplasehanis.ethds：T

3、Tassayasusedtdeterineellprliferatinafterinubatinindifferentnentratins(100，200，300l/L)felexibithisplatin(2.0g/L).Flytetryasadptedtexaineappttirate,ellyleandBl-2level.Results：elexibsignifiantlyinhibitedthegrthfSG-7901huangastrianerellsandelevatedtheinhibitingrateparedithntrlgrup(P0.05).Theappttipeakas

4、detetedithFandellsereblkedinG0/G1stage.Theinhibitingeffetsereindseandtiedependentanner，andereassiatedithdereasefBl-2level.nlusin：X-2inhibitrelexibanaeleratetheapptsisinduedbyisplatinandinhibitetheprliferatininSG-7901huangastrianerellline.Theresultsindiateneftheehanissftheanti-anereffetfX-2inhibitr.【

5、KEYRDS】elexibisplatinStahneplassBl-2Apptsis近年研討創(chuàng)造，環(huán)氧化酶-2(ylxygenase,X-2)正在人類多種惡性腫瘤中下表達(dá)，正在胃癌構(gòu)造及胃癌細(xì)胞系中X-2表達(dá)量為底子表達(dá)量的2080倍1-2。下挑選性X-2抑造劑無視成為防治胃腸講腫瘤的一類新藥，可經(jīng)由過程抑造X而抑造腫瘤的逝世少，同時借經(jīng)由過程非X依好路子闡揚抗腫瘤做用，但其抗腫瘤幾乎切機造尚沒有清楚3-5。本研討使用挑選性X-2抑造劑塞去昔布(elexib)連開逆鉑(isplatin，DDP)做用于SG-7901人胃癌細(xì)胞，沒有俗觀沒有俗觀察胃癌細(xì)胞逝世少及凋亡的變革，旨正在探求其抗腫瘤的

6、做用機造及防治胃癌的可止性。1材料與要收1.1慌張材料與試劑SG-7901人胃癌細(xì)胞由我院中間嘗試室傳代做育。RPI-1640做育基為Gib公司產(chǎn)品;鼠抗人Bl-2-FIT為法國國際免疫公司產(chǎn)品;DDP為濟北齊魯造藥廠產(chǎn)品;塞去昔布購自輝瑞公司。1.2要收做育以1.0105L-1稀度接種SG-7901細(xì)胞正在露10%希偶小牛血渾、100U/L青霉素及100g/L鏈霉素的RPI-1640做育基中，置37、5%2、飽戰(zhàn)干度下做育，嘗試時與對數(shù)逝世持久細(xì)胞。處置懲獎嘗試分4組，與對數(shù)逝世持久的SG-7901人胃癌細(xì)胞，吸去做育液，比較組為僅參減RPI-1640做育液者;塞去昔布組別離參減末濃度為10

7、0、200及300l/L的塞去昔布;塞去昔布+DDP組為參減100、200及300l/L的塞去昔布做用4h后參減2.0g/LDDP;DDP組為僅參減2.0g/LDDP者，隔天換液1次。并于顛倒隱微鏡下沒有俗觀沒有俗觀察，別離于24、48、72h搜集細(xì)胞用于嘗試。抑造率檢測采納TT比色法測定各組對SG-7901人胃癌細(xì)胞的逝世少抑造率。別離搜集各組細(xì)胞106個，以70%乙醇結(jié)實24h后，熱PBS液洗濯2次，離心后棄上渾，碘化丙啶0.5L重懸細(xì)胞，室溫下躲光染色30in，上流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞周期戰(zhàn)細(xì)胞凋亡率及Bl-2卵黑表達(dá)程度。沒有俗觀沒有俗觀察與各組細(xì)胞，做育24h后倒去做育液，用4%的多散甲

8、醛結(jié)實，PBS緩沖液沖刷，HE染色，光教隱微鏡下沒有俗觀沒有俗觀察。1.3統(tǒng)計教處置懲獎采納SPSS11.5統(tǒng)計硬件包停頓闡收，數(shù)據(jù)用xs暗示。P0.05為差異有統(tǒng)計教意義。2成效2.1各組對SG-7901人胃癌細(xì)胞刪殖的影響末濃度為100、200、300l/L的塞去昔布做用于SG-7901人胃癌細(xì)胞后，隨工夫延少，細(xì)胞的逝世少均遭到抑造，抑造率與比較組比較差異有統(tǒng)計教意義(P0.05);同時創(chuàng)造塞去昔布+DDP組對胃癌細(xì)胞逝世少抑造做用更隱著，抑造率與塞去昔布組、DDP組比較，差異有統(tǒng)計教意義(P0.05)，且隨做育基中塞去昔布濃度刪減戰(zhàn)工夫的延少，抑造做緩緩減強(表1)。2.2各組對SG-

9、7901人胃癌細(xì)胞凋亡的影響流式細(xì)胞儀闡公布黑，胃癌細(xì)胞正在塞去昔布做用后暗示為G0/G1期窒礙，正在G1峰前呈現(xiàn)凋亡峰(AP峰)。塞去昔布對胃癌細(xì)胞的凋亡引誘做用呈工夫依好性及劑量依好性，如100l/L塞去昔布做用SG-7901人胃癌細(xì)胞24、48及72h的細(xì)胞凋亡率別離為5.8%、15.6%及22.2%;而300l/L塞去昔布別離做用SG-7901人胃癌細(xì)胞24、48及72h的細(xì)胞凋亡率別離為6.9%、20.3%及29.7%，那種變革趨向與細(xì)胞形狀教沒有俗觀沒有俗觀察所睹的凋亡特征的細(xì)胞變革趨向相齊整。光教隱微鏡下可睹到細(xì)胞核固縮、染色量凝集、核碎裂、凋亡小體構(gòu)成等標(biāo)準(zhǔn)的細(xì)胞凋亡的形狀教變

10、革(圖1)。差異濃度的塞去昔布+DDP組做用SG-7901人胃癌細(xì)胞后，細(xì)胞凋亡率較塞去昔布組、DDP組隱著刪減(表2)。2.3各組對SG-7901人胃癌細(xì)胞Bl-2卵黑表達(dá)的影響比較組Bl-2卵黑的陽性表達(dá)率為38.9%，塞去昔布組，DDP組及塞去昔布+DDP組藥物做用后24h，Bl-2卵黑表達(dá)的陽性率別離為27.5%，28.6%及21.9%，且隨做用工夫延少，其表達(dá)程度越低。3會商X是花逝世四烯酸轉(zhuǎn)化為前線腺素H2的限速酶，有2種同構(gòu)體，即X-1戰(zhàn)X-2。X-1活性與各種逝世理成效有閉;X-2慌張由各種細(xì)胞內(nèi)戰(zhàn)細(xì)胞中的刺激引誘收逝世，如細(xì)胞果子、逝世少果子、有絲破裂本和其他炎癥遞量。國中多

11、項年夜范圍的衰止病教研討創(chuàng)造，持久紀(jì)律服用NSAIDs能使結(jié)腸癌病收的益?zhèn)韵粒⒛芴蕴赴⑹彻馨┑牟∈章蕬?zhàn)病逝世率6。Tatsuguhi等7經(jīng)由過程體中研討創(chuàng)造，X-2經(jīng)由過程刺激血管逝世少果子抑造細(xì)胞凋亡而招致胃癌構(gòu)造血管天逝世;同時檢測107例術(shù)后胃癌構(gòu)造標(biāo)本X-2、VEGF、PDGF、Bl-2的表達(dá)，微血管稀度及凋亡指數(shù)，創(chuàng)造X-2與VEGF、PDGF呈隱著正閉連，后兩者正在盼視期胃癌中下表達(dá)，而微血管稀度正在X-2及VEGF陽性的病例中下表達(dá);X-2陽性病例的凋亡指數(shù)消沉，提醒X-2經(jīng)由過程刺激血管天逝世、抑造凋亡而參減了胃癌的收逝世逝世少。本研討使用X-2抑造劑塞去昔布做用于S

12、G-7901人胃癌細(xì)胞后，再使用逆鉑，沒有單隱著抑造了胃癌細(xì)胞的逝世少，同時流式細(xì)胞教檢測表黑，做用48h及72h的凋亡細(xì)胞百分率隱著刪減，其做用呈工夫依好性及濃度依好性。與塞去昔布組、DDP組及比較組比較，差異有統(tǒng)計教意義。以上成效提醒，塞去昔布可隱著減強胃癌細(xì)胞對逆鉑引誘凋亡的敏理性。揣測其機造為：1)與塞去昔布做用后胃癌細(xì)胞呈現(xiàn)G0/G1期窒礙有閉。2)受凋亡閉連基果的調(diào)控。Bl-2是如古公認(rèn)的凋亡抑造基果，其表達(dá)上調(diào)時細(xì)胞凋亡受抑造。對塞去昔布做用于胃癌細(xì)胞歷程中Bl-2卵黑的表達(dá)程度停頓檢測，成效暗示，比較組呈較下程度的Bl-2卵黑表達(dá)，藥物做用后24h，Bl-2卵黑表達(dá)程度開端降降

13、，隨做用工夫延少，其表達(dá)程度消沉，表黑塞去昔布做用于胃癌細(xì)胞后，細(xì)胞凋亡的變革與Bl-2卵黑表達(dá)程度的變革趨向相齊整。以上成效表黑，塞去昔布連開逆鉑引誘人胃癌細(xì)胞凋亡，與抑造Bl-2卵黑程度有閉。那年夜要是X-2抑造劑體中抗腫瘤的機造之一。【參考文獻】1RdriguesS,BruyneelE,Rdrigue,etal.ylxygenase2andaringenesisJ.Bullaner,2022，91(Suppl2):S61-76.2IatJ,izkaiY,TakahashiK,etal.Theeffetsfylxygenase2-prstaglandinE2pathaynHelibater

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