1、桔梗總皂苷含量測定要領(lǐng)研究李妍張崇禧魏建和許旭東褚慶龍【摘要】目的創(chuàng)立一種香草醛-硫酸比色法測定桔梗中總皂苷含量的要領(lǐng)，為桔梗的質(zhì)量操縱提供科學根據(jù)。要領(lǐng)索氏提取器提取，大孔吸附樹脂純化，香草醛-硫酸比色法測定桔梗總皂苷含量。效果比色法測定的線性方程為A=0.0034+0.0064，相干系數(shù)為r=0.9997，均勻加樣接納率為96.97%，RSD=1.51%(n=6)。對差異泉源桔梗中總皂苷含量舉行測定，其含量范疇為1.07%3.76%。結(jié)論該法測定正確，重復(fù)性好，可用于桔梗藥材中桔梗總皂苷的含量測定，便于對桔梗藥材舉行質(zhì)量評價。【關(guān)鍵詞】桔梗；總皂苷；桔梗皂苷D；比色法Keyrds：Radi

2、xPlatydnis;Ttalsapnins;PlatydinD;lrietry桔梗(RadixPlatydnis)為桔梗科(apanulaeae)植物桔梗PlatydngrandiflruJaq.A.D的枯燥根1，是一種藥食同源的植物，用途普及。桔梗性味苦、辛、平，歸肺經(jīng)，有宣肺、利咽、祛痰、排膿之成果，用于咳嗽痰多，胸悶不暢，咽痛，音啞，肺癰吐膿，瘡瘍膿成不潰，被普及應(yīng)用于祛痰止咳藥2。桔梗中的皂苷類身分，是桔梗藥用品格的重要評價指標，桔梗中含有大量的三萜皂苷，已經(jīng)分散區(qū)分出四十多種單體皂苷，如桔梗皂苷D、桔梗皂苷A、桔梗皂苷B、桔梗皂苷D2、D3、桔梗皂苷E等35。當代藥理學研究表白，桔

3、梗皂苷為桔梗重要的藥理活性身分6。?中國藥典?(2022年版)接納重量法測定桔梗總皂苷含量，該要領(lǐng)操縱繁瑣，特殊是此中糖類身分等雜質(zhì)會對測定效果產(chǎn)生嚴峻滋擾，造成檢測效果大大高于現(xiàn)實總皂苷的含量7,8。本實行以桔梗皂苷D為尺度品，接納香草醛-硫酸顯色，比色法對桔梗總皂苷的含量舉行了測定。1儀器與質(zhì)料1.1儀器與試劑UV2550型紫外可見分光光度計(日本島津)；TB-214型電子闡發(fā)天平北京賽多利斯儀器體系產(chǎn)物；數(shù)顯恒溫水浴鍋HH-6國華電器產(chǎn)物；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀R-205BHI產(chǎn)物；電熱恒溫鼓風枯燥箱DHG-9240上海精宏實行裝備產(chǎn)物；SK8200H型超聲波洗濯器(上海科導超聲儀器)；SHZ-型循

4、環(huán)水真空泵上海亞榮生化儀器廠；大孔樹脂層析色譜柱(內(nèi)徑3，長30)。尺度品桔梗皂苷D(HPL制備純化，純度用歸一化法盤算在98%以上)；AB8型大孔吸附樹脂(南開大學化工場)；其他試劑均為闡發(fā)純。1.2質(zhì)料2要領(lǐng)與效果2.1尺度品溶液的制備細密稱取經(jīng)60減壓枯燥至恒重的桔梗皂苷D3.5g，加70%甲醇適量溶解，置1l量瓶中，用70%甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。2.3測定波長的選擇細密移取80l的尺度品及50l的供試品溶液，置10l具塞磨口試管中，于70水浴蒸發(fā)至干，細密參加10%香草醛試液0.5l，60%硫酸5l，搖勻，于60水浴加熱15in，冰水浴中冷卻3in，隨行試劑做空缺，在紫外分光光度

5、計于400700n波長范疇全程掃描11，尺度品及供試品的最大汲取波長均在472n，且空缺比較無滋擾，應(yīng)選擇472n為測定波長。2.4尺度曲線的繪制細密汲取桔梗皂苷D尺度品溶液0，40，80，160，200l,置10l具塞磨口試管中，于70水浴蒸發(fā)至干，細密參加10%香草醛試液0.5l，60%硫酸5l，搖勻，于60水浴加熱15in，冰水浴中冷卻3in，以同法平行處置懲罰的空缺溶劑為空缺，在472n處測定吸光度。以尺度品濃度(l/l)為橫坐標，吸光度A為縱坐標繪制尺度曲線，得到回歸方程為:A=0.0034+0.0064，r=0.9997，效果看出在此濃度系列范疇內(nèi)與A出現(xiàn)精良的線性干系。2.5細密

6、度實行細密汲取尺度品溶液80l，根據(jù)“2.4項下要領(lǐng)顯色測定吸光度，一連測定5次，效果RSD為0.30%，說明儀器的測試性能精良。2.6不變性實行細密汲取供試品溶液50l，根據(jù)“2.4項下要領(lǐng)操縱，按差異時間測定其吸光度變革，在安排5，10，20，30，40，50，60in后，吸光度別離為0.214，0.214，0.214，0.215，0.216，0.215，0.217。效果表白該法在60in內(nèi)，吸光度值不變。2.7重復(fù)性實行稱取桔梗藥材已枯燥粉末6份，每份1.0g，正確稱定，根據(jù)“2.2項下操縱，制備6份供試品溶液，各正確移取50l，根據(jù)“2.4項下要領(lǐng)操縱，測定吸光度A，盤算總皂苷含量。效

7、果均勻含量為3.07%,RSD為1.17%。2.8加樣接納率實行正確稱取含量的桔梗藥材已枯燥粉末6份，每份0.05g，參加桔梗皂苷D適量，根據(jù)“2.2項下要領(lǐng)制備樣品溶液，各取50l樣品液，根據(jù)“2.4項下要領(lǐng)顯色后測定吸光度，盤算接納率。效果見表1。均勻加樣接納率為96.97%,RSD為1.51%(n=6)。表1加樣接納率實行效果略2.9差異桔梗樣品中總皂苷含量測定正確稱取所網(wǎng)羅的14種差異桔梗選育品系12，各3份，根據(jù)“2.2項下要領(lǐng)制備供試品溶液，各細密移取50l，根據(jù)“2.4項下要領(lǐng)顯色后測定吸光度，從回歸方程中盤算供試品桔梗總皂苷的含量，其測定效果見表2。表2桔梗總皂苷含量測定效果略

8、3討論?中國藥典?(2022年版)接納重量法測定桔梗總皂苷含量，劃定其含量不得少于6%，但是重量法操縱繁瑣，重復(fù)性不高，特殊是此中糖類身分等雜質(zhì)會對測定效果產(chǎn)生嚴峻滋擾，造成檢測效果大大高于現(xiàn)實總皂苷的含量，效果偏向較大。本要領(lǐng)接納大孔樹脂純化桔梗總皂苷，然后用比色法測定，固然差異泉源桔梗中總皂苷的含量范疇為1.07%3.76%，低于藥典劃定，但是本實行所網(wǎng)羅樣品均為一年生植株，且測定的是較純的桔梗總皂苷，大大地淘汰了雜質(zhì)的滋擾。該要領(lǐng)輕便，正確，且細密度高，重復(fù)性、不變性均較好，均勻接納率為96.97%，可用于對桔梗藥材舉行質(zhì)量評價。GP代表桔梗不育系測交質(zhì)料，GS代表桔梗自交系質(zhì)料，K為比

9、較樣品;n=3通過大孔樹脂純化得到的提取液依“2.4項下要領(lǐng)顯色，舉行全波長掃描，得到的全波長掃描圖，其最大汲取波長與尺度品相差很校同時弱極性的AB-8型大孔樹脂的吸附率息爭吸附率均比力抱負，故AB-8型大孔吸附樹脂在樣品的純化中不失為較好的選擇。可見該要領(lǐng)可以有用的去除滋擾，使測定效果越發(fā)正確。結(jié)合文獻，為輕便桔梗總皂苷的提取，多接納超聲提取法取代回流提取法，筆者總結(jié)了超聲提取法的提取條件為：用10倍量甲醇在40，100%功率下超聲提取3次，30in/次。但與加熱回流提取法所得提取液同時用紫外分光光度計測定吸光值，超聲法所得提取液遠遠低于回流法。以是筆者放棄超聲提取法，選用了更為正確的加熱回

10、流提取法。【參考文獻】1國度藥典委員會.中國藥典,部S.北京:化學產(chǎn)業(yè)出書社，2022:196.2魏尚洲.桔梗資源的綜合開拓使用J.陜西科技大學學報,2022,23(5):141.3LeeJY，HangI，LiST.AntixidantandantianerativitiesfrganiextratsfrPlatydngrandiflruA，DeandllertsJJEthnpharal，2022，93(2-3)：409.4吳碧元，孫軍，蔣紅芳.桔梗提取工藝的研究J.中藥材，2002，256：430.5何美蓮，程小衛(wèi)，陳家寬，等桔梗皂苷類身分及其質(zhì)量闡發(fā)J中藥新藥與臨床藥理，2022，16(6)：457.6KiYS，KiJS，hiSUIslatinfanesapninandyttxieffetfsapninsfrthertfPlatydngrandiflrunhuanturelllinesJPlantaed，2022，71(6)：566.7石俊英，董其亭，鞏麗麗，等.差異產(chǎn)地桔梗中總皂苷身分與質(zhì)量的相干性研究J.山東中醫(yī)藥大學學報，2022，303：247.8李喜鳳，薛秋萍，董誠明.桔梗中總皂苷的含量測定J.中醫(yī)藥學刊，2022，1224：2232.9魏建和，黃璐琦，陳士林，等桔梗柱頭、花粉活力及自交親和性研究J中國中藥雜志，2022，31(5