1、高效毛細管電泳及其在農藥分析中的應用0303600021一、問題的提出 我國現有中藥種類已達12807種，其中藥用植物11146種，藥用動物1581種，藥用礦物80種中草藥在保護人民群眾健康方面起著重要作用由于需求量大，野生中草藥遠遠不能滿足市場的需求，目前大部分中草藥都依賴人工栽培全國藥材種植面積超過580萬畝，藥材生產基地600多個，常年栽培的藥材達200余種為了保障種植藥材的產量，藥農不得不頻繁地使用各種農藥農藥殘留不僅影響群眾的健康，還影響我國名貴藥材的出口創匯如80年代末云南省出口日本的三七大量退貨，目前我國人參在海外市場日益受韓國高麗參的排擠等，都有農藥殘留超標的原因2二、CE的裝

2、置及基本原理3毛細管電泳儀在實驗室中4三、CE的特點高質量靈敏度：常用紫外檢測器的檢測限可達10-1310-15mol，激光誘導熒光檢測器(LIF)則達10-19-10-21。高分辨率：每米理論塔板數為幾十萬，高者可達幾百萬乃至幾千萬。高速度：許多分析可在10分鐘內完成，有的可在60秒內完成。所需樣品少：只需納升(10-9升)的進樣量。成本低：只需少量(幾毫升)的流動相和低廉的毛細管。應用范圍廣：除分離生物大分子（肽、蛋白、DNA和糖等）外，還可用于小分子(氨基酸、藥物等)及離子(無機及有機離子等)，甚至可分離各種顆粒(如硅膠顆粒等)。 ：三高二少一廣 5四、CE的分離模式 1 毛細管區帶電泳

3、(capilary zone electrophoresis,CZE) CZE的分離機理是基于各被分離物質的凈電荷與質量比(荷質比)間的差異。應用范圍包括氨基酸、肽、蛋白、離子分析、對映體拆分和很多其它離子態物質的分析。 2 膠束電動色譜(micellar electrokinetic capillary chromatography，MECC) MECC是唯一既能分離中性溶質又能分離帶電組分的CE模式。采用表面活性劑(如十二烷基硫酸鈉，SDS)在操作緩沖液內形成有一疏水內核、外部帶負電的膠束相。利用溶質具有不同的疏水性，在水相和膠束相(準固定相)間分配的差異得以分離。主要用于小分子、中性化合

4、物，手性對映體、各種藥物等。 63毛細管凝膠電泳(capillary gel electrophoresis，CGE) CGE是將凝膠移到毛細管中作支持物進行的電泳。不同體積的溶質分子在起“分子篩”作用的凝膠中電泳分離。常用于蛋白質、寡聚核苷酸、RNA、DNA片斷分離和測序及PCR產物分析。現在還有采用無膠篩分方法，同樣可達分離目的。 4毛細管等電聚焦(capillary isoelectric focusing，CIEF) CIEF是用兩性電解質在毛細管內建立pH梯度，使各種具有不同等電點的蛋白質在電場作用下遷移到等電點的位置，形成一非常窄的聚焦區帶。已成功用于測定蛋白質等電點，分離異構體或

5、用其它方法難于分離的蛋白質。 75毛細管等速電泳(capillary isotachophoresis ，CITP) CITP采用先導電解質和尾隨電解質，使溶質按其電泳淌度不同得以分離，是一種較老的方式。現在可作為柱前濃縮方法用于富集樣品。 6毛細管電色譜(capillary electrochromatography，CEC) CEC是將HPLC中眾多的固定相微粒填充到毛細管中，以樣品與固定相之間的相互作用為分離機制，以電滲流為流動相驅動力的色譜過程。雖然柱效有所下降，但增加了選擇性，是一種有發展前景的模式。 8五、 在農藥分析中的應用 1. 定量分析研究 2. 在農藥制劑和原藥中有效成分的

6、測定 3. 在農藥中雜質的分離和測定 4. 手性農藥分析9六、應用實例 毛細管電泳法研究提取劑對黃連黃柏共煎劑中生物堿含量的影響樣品制備 粉碎過篩浸泡回流用水提取提取劑提取2. 電泳分析 穩定儀器確定檢測波長選擇緩沖溶液電泳檢測 103、結果與分析11成分分析 按照圖1b中所示得試驗條件，采用加入法測定小檗堿等得溶液電泳圖，結果見圖2。1至6峰對應的化合物分別為黃連堿、小菜堿、麥小菜堿、巴馬汀、藥根堿、小菜紅堿。與圖1b的結果相比較，黃連。黃柏配伍后共煎浸膏中的主要成分為黃連堿、小果堿、麥小菜堿、巴馬汀和藥根堿。 12線性關系配制一系列小菜堿和巴馬汀的標準混合镕液，在同一條件下測定電泳圖，以峰面積對濃度作圖，結果小菜堿和巴馬汀分別在15.065.0mgL，12.550.0mg/L之間有良好的線性關系，回歸方程為：小檗堿：y1455.3C2134 r09984 (1) 巴馬汀：y79763C十34622 r09995 (2)131415八、結束語 CE作為一種新的分離手段，在農藥分析中有廣泛的應用前景。它的微量，解決了中藥提取的困難。它的高效，使中藥多種成分的同時分離成為可能，它的快捷提高了分析效率。與MS聯用，在定量的同時對