1、第一節臨床標本的處理一. 臨床標本處理的一般原則（一 ）標本采集的時間和注意事項（二 ）標本的類型和數量（三 ）標本采集部位的準備（四 ）標本的運送（五 ）標本的保存（六 ）標本處理中的生物安全問題二、常見臨床標本的處理方法（一 ）血液標本. 全血標本.血清 （漿 ）標本.外周血單個核細胞（二 ）棉拭子（三 ）體液標本（四 ）痰液標本（五 ）組織標本（六 ）細胞標本第二節生物樣本分離純化與質量鑒定一、生物樣本分離純化策略、 DNA 的分離純化（一 ）基因組DNA 的純化（二 ）吸附柱法提取DNA（三 ）質粒DNA 的分離純化（四 ）線粒體DNA 的分離純化（五 ）血漿中游離DNA 的分離純化.

2、 RNA 的分離純化（一）總 RNA 的制備（二） mRNA 的制備（三 ）循環miRNA 的制備（四 ）長鏈非編碼RNA 的制備四、自動化核酸提取系統五、蛋白質的分離純化（一 ）蛋白質的性質與純化原則（二 ）從細胞或組織中提取蛋白的常用方法. 根據蛋白分子大小不同分離純化.根據蛋白分子溶解度不同分離純化.根據蛋白表面電荷不同分離純化.采用配體的特異性親和力分離純化（三 ）膜蛋白的分離與純化六、核酸和蛋白的鑒定（一 ）核酸的鑒定. 核酸含量測定.核酸的純度鑒定.核酸的完整性檢測（二 ）蛋白質的鑒定第一節臨床分子生物學檢驗技術的發展一.從分子生物學到臨床分子生物學檢驗二. 臨床分子生物學檢驗技術

3、的發展第二節臨床分子生物學檢驗技術應用一.病原生物基因組.菌種鑒定.確定病毒感染和病毒載量.病毒分析.細菌耐藥監測和分子流行病學調查二、基因變異.致病基因的分子缺陷.線粒體基因突變.腫瘤相關基因. DNA 重排形成融合基因三、基因多態性.基因定位和遺傳病相關性分析.藥物代謝酶與血藥濃度.疾病診斷和遺傳咨詢.多基因病的研究.器官移植配型和個體識別四、循環游離核酸.循環游離核酸與腫瘤.游離核酸與產前診斷.循環 microRNA 與腫瘤診斷第三節臨床分子生物學檢驗發展與應用. 臨床分子生物學檢驗與感染性疾病診斷與治療二、遺傳性疾病的臨床分子生物學檢驗三、腫瘤的臨床分子生物學檢驗四、臨床分子生物學檢驗

4、與個體化醫學第一節分子生物標志物的概念與分類一、生物標志物的概念與分類.分子生物標志物的概念與分類（一 ） DNA 生物標志物（二 ） RNA 生物標志物（三 ）蛋白質生物標志物第二節核酸分子生 物標志物一、基因組和基因組特征（一 ）原核生物基因組. 原核生物基因組特征.質粒（二 ）病毒基因組. 基因組的堿基組成.基因組的核酸類型.基因組中有基因重疊現象.基因組中具有操縱子結構.病毒基因可連續也可間斷.基因組中重復序列少.基因組中非編碼區少.基因組是單倍體.相關基因叢集. 病毒基因組含有不規則結構基因（三 ）人類基因組. 單一序列.重復序列.多基因家族和假基因二、基于基因突變的分子生物標志物（

5、一 ）點突變錯義突變無義突變RNA 加工突變（二 ）插入 / 缺失突變（三 ）動態突變三、基于基因多態性的分子生物標志物（一 ）限制性片段長度多態性（二 ）小衛星和微衛星多態性（三 ）單核苷酸多態性（四 ）拷貝數多態性四、基于 DNA 甲基化修飾的分子生物標志物五.基于轉錄產物的分子生物標志物mRNA 標志物miRNA 標志物（三）長鏈非編碼RNA 標志物六、基于線粒體DNA 的分子生物標志物七、基于循環核酸的分子生物標志物（一 ）循環腫瘤細胞DNA（二 ）母體血清中的胎兒DNA（三 ）循環DNA 的其他應用（四 ）血漿RNA第三節分子生物標志物的發 現與評價一.高通量技術與分子生物標志物的發

6、現（一 ）基因組學（二 ）轉錄組學（三 ）蛋白質組學（四 ）代謝組學二、分子生物標志物的特征和評估（一 ）分子生物標志物的特征（二 ）分子生物標志物評估的基本統計學方法（三 ）生物標志物的評價階段第一節核酸分子雜交的概念一.核酸探針（一 ）核酸探針的種類DNA 探針RNA 探針寡核苷酸探針（二 ）探針的長度.DNA 和 RNA 探針.寡核苷酸探針（三 ）核酸探針的標記. 探針標記物的選擇.探針標記方法的選擇二、分子雜交信號檢測（一 ）放射性標記探針檢測. 放射自顯影.液體閃爍計數法.（二 ）非放射性標記探針的雜交檢測. 酶促顯色檢測.熒光檢測.化學發光檢測.多探針檢測第二節經典的核酸分子雜交技

7、術一、固相雜交（一 ）反向點雜交1. 反向點雜交的原理2.反向點雜交法的應用（二 ） Southern 印跡雜交1.Southerm 印跡雜交的原理2.Southern 印跡雜交的應用（三 ） Northem 印跡雜交.Northerm 印跡雜交的原理.Northem 印跡雜交的應用二、液相雜交三、原位雜交第三節 DNA 芯片技術. DNA 芯片的概念、 DNA 芯片原理三， DNA 芯片技術（一 ）芯片制備探針的設計載體選擇與預處理DNA 芯片制備（二 ）樣品的制備四、雜交與結果分析. 雜交反應.雜交信號的檢測.數據分析五、 DNA 芯片在醫學中的應用1. 基因表達分析.基因型、基因突變和多態性分析.疾病診斷.藥物篩選.指導用藥及治療方案.預防醫學第四節影響雜交信號檢測的因素一.探針的選擇二、探針的標記方法三.探針的濃度四、雜交率五、雜交溫度六，雜交的嚴謹性七、雜交反應時間八、雜交促進劑第一節靶序列擴增一.PCR擴增技術（一）PCR技術原理及基本過程（二）PCR反應體系及擴增參數. 反應體系.擴增參數二、其他PCR技術，（一）多重 PCR（二）序列特異PCR（三）逆轉錄PCR（四 ）巢式 PCR（五）轉錄依賴擴增系統（六）隨機引物PCR（七）全基因組擴增（八）微乳液擴增（九）錨定擴增（十）長片段PCR三、PCR產物分析（一）PCR-限制性片段長