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文檔簡介
1、人體及動物生理學實驗課緒論一、生理實驗課的重要性、目的和特點人體及動物生理學的知識來自對生命現象的客觀觀察和科學實驗。生理學實驗課程不僅能強化理論課的教學,還具有獨自的教育作用。培養學生實際操作能力和實驗報告寫作能力,培養學生提出問題、分析問題、解決問題的科學思維方法,養成實事求是、嚴謹求證的工作態度和規范操作、分工協作的工作作風,以及愛科學、愛公物的素養。通過本課程學習,學生應獲得以下知識和能力:1.掌握基本生理指標測量方法;2.掌握生理實驗技能和生理手術基本操作技能;3.了解電生理基本操作技能;4.能獨立分析實驗結果、寫出規范的實驗報告;5.知道生理實驗設計的一般原則和方法,并作初步嘗試。
2、實驗課成績評定強調全面性與全程性,包括每次實驗操作和報告撰寫、自行設計實驗和期末考核。實驗課成績占最后總評分的2030。二、生理學實驗的特點所謂生理學實驗,就是人為地創造一定條件,以利于對平時不能從外表觀察到的隱蔽或細微的生理活動能被觀察,或某種生理過程能被認識。生理學實驗的基本模式:刺激 stimulation反應 reaction記錄 recording。例如:刺激神經肌肉收縮記錄收縮曲線生理學實驗的特點:1. 影響因素較多 2. 實驗結果的多樣性,可能與理論結果不符 3. 實驗結果必須有參照(control)三、生理學實驗課的要求一堂完整的實驗課包括實驗前、實驗和實驗后三個環節。實驗前:
3、應有目的地做好充分準備,仔細閱讀和研究實驗指導,了解實驗原理和基本操作方法,復習有關解剖、生理知識,預期實驗中可能出現的結果和問題。這是避免被動盲目操作、提高實驗課質量的重要前提。實驗時:1.必須遵守實驗室規則,入室前穿好實驗服,室內保持安靜,不隨意走動,不做與實驗無關的事。2.節約實驗用品,實驗動物只能由教師統一發給。3.實驗器材每次專人負責,領取清點,歸還復核,損壞登記,丟失賠償。4.已調試好的儀器不要任意調動,實驗器具不得與其他組調換,如需要可向準備教師要求添加或更換。5.實驗時要注意動腦思考,實驗中自行更改或設計項目應征求同伴和教師意見。6.組內分工合作,認真有條理地操作,耐心細致地觀
4、察,及時準確地記錄,原始記錄交教師簽字認可后方能結束實驗。7.實驗完成較早,通過教師允許可以利用動物預習下次操作、補做上次內容或自行練習等,此時仍要注意規范操作和動物人道主義。特別強調要珍惜實驗條件和機會,保證實驗課質量;絕對不許用動物和手術器械開玩笑。有興趣的同學可以申請參加實驗準備和預備實驗。實驗后:1.各組清理好自己的場地、物品,歸還實驗用品,廢棄物(紗布、棉簽等)絕對不能丟進水池。2. 動物尸體放指定位置,集中歸還動物房處理。3.值日同學清理好公共用品和場地,打掃衛生(水池、實驗臺、室內外地面),報教師同意后方可離開。4.每人轉錄、整理原始記錄,及對寫好實驗報告上交。四、 生理學實驗報
5、告的寫作寫實驗報告是對所做實驗的再理解再創造的工作,是檢查學生知識掌握和衡量能力的重要尺度之一,是今后撰寫科學論文的初始演練。使用統一印制的實驗報告冊。填全各欄目,卷面整潔、圖表準確、字跡端正、簡明精練,按時上交。實驗報告大體上有兩種格式:一種是一般實驗報告式,另一種是仿學術論文式,其對應關系如下表。一般認為操作類宜選用前者,而側重結果的實驗后者更適用。表1 實驗報告的基本格式一般實驗報告式仿學術論文式題目(內容) 題目目的原理引言(導言)實驗對象與用品材料與方法方法步驟 結果與分析結果與分析討論討論與結論(語)(結論或結語) 注意事項原始記錄附錄(含原始記錄,公式實驗分工
6、體會與建議推導,參考文獻,致謝等)實驗報告寫作說明:1實驗方法 應根據教師的具體要求寫。一般情況下或重復使用的方法,可作簡要說明。2實驗結果 實驗結果是實驗報告的重要部分,應將實驗過程中所觀察或記錄到的生理效應忠實地、正確地記述和說明。結果部分常需用實驗記錄,這就需要將實驗記錄進行合理地加工與剪貼,并加圖號、圖注及必要的文字說明。不得將原始記錄原封不動地附在報告上。凡屬定量的測量資料,均應以正確的單位和數值嚴格地寫在報告上。為了便于說明和比較,有些實驗結果可以列表或繪圖表示。3討論與結論 討論是根據所學的理論知識,對實驗結果進行科學地分析和解釋,并判斷實驗結果是否是預期的。如果出現非預期的結果
7、,應分析其可能的原因。討論是實驗報告的核心部分,可以幫助學生提高獨立思考和分析問題的能力。不應盲目抄襲書本,應提倡學生根據自己的實驗結果提出創造性的見解和認識,但必須是嚴肅認真、有科學依據的。結論是從實驗結果和討論中歸納出一般的概括性的判斷,也就是這一實驗所驗證的基本概念、原則或理論的簡明總結。結論的書寫應該是簡明扼要的。注意事項:寫報告應以事實為根據,盡量用自己的話表述,忌抄書,不許修改、編造實驗結果(如果與理論結果有較大偏差,在結果欄另外寫上理論結果)。 “討論”是一篇報告的核心,應緊扣結果聯系相關理論進行,忌就事論事或離題萬里;結果也不可輕易推斷或引申,可在實驗小組內討論,必要時也可以參
8、考其他組數據(需注明),但報告必須按要求獨立完成,禁止互相抄襲。實驗一:生理實驗技術及常用儀器使用培訓一、實驗目的一、1掌握生物醫學信號采集處理系統的使用,了解刺激器、示波器、二導生理記錄儀和記紋鼓的使用。2掌握動物實驗基本技術:兔子的捉拿、固定、麻藥的計算及耳緣靜脈注射。3熟悉氣管分籬及氣管倒T插管方法、頸總動脈及頸外靜脈分離方法;交感、減壓、迷走神經的分離方法。二、實驗步驟(一)常用的小儀器的使用方法1電極在檢測生物電或進行電刺激時,電極是儀器系統與生物體連接的環節,根據對實驗的精確度以及結果的可重復性等要求的不同,電生理學中采用的電極種類也不同。普通電極(金屬宏電極)由銀、鉑、鎳、不銹鋼
9、或鎢制成的針形或片狀電極,電阻一般很小,制作也簡單。因其尺寸通常是毫米級的,為了與微米級尺寸的“微電極”區分,故常被稱為“宏電極”。由于其功能特點的不同,可分為多種。如實驗中常用的刺激電極、記錄電極(或引導電極)、保護電極、埋藏電極和表面電極等,都屬于此類電極。甘汞電極 甘汞電極是用途很廣的普通電極(也稱為乏極化電極)。它是由金屬、非溶性金屬鹽及含有非溶性金屬鹽同種陰離子的可溶性鹽或酸組成的電極。如Hg,Hg2Cl2,KCl溶液。如果用它作為陽極,則從組織來的陰離子,特別是Cl,就聚集在電極上而形成Hg2Cl2。如果用它作為陰極,則發生相反的反應。這樣,電極從定性的角度來講,沒有發生改變。銀氯
10、化銀電極 AgAgCl盤狀或杯狀電極是在銀電極的表面用電化學的方法將銀電極表面的銀氯化為一薄層氯化銀(電極厚度的1025)。該電極具有不易極化的性能,比純金屬電極具有更小的電噪聲,在低頻范圍內尤其如此。制備好的電極要避免干燥、摩擦和光照。因此,最好將其儲存在內充0.9NaCl溶液的不透光的容器內。常用來記錄腦電及誘發電位。微電極 微電極有金屬和玻璃兩類,其電學性質不同,適用范圍也略有差別。金屬微電極是一種高強度金屬針,尖端以外的部分用漆或玻璃絕緣。金屬電極絲由不銹鋼、鉑銥合金或碳化鎢絲在酸性溶液中電解腐蝕而成,有多種成品可供選擇,其缺點是微電極的幾何形狀與絕緣狀態難以保持一致。玻璃微電極可由用
11、戶根據需要用硬質毛細管拉制而成,用于測量細胞內靜息電位和動作電位時,其尖端需小于0.5m。2換能器(傳感器)醫用傳感器是用來將機體生理活動的信息轉換成與之有確定函數關系的電信息的變換裝置。它是醫學儀器中與機體進行直接耦合的環節,其功能是把機體的生理信息拾取出來,以便進一步實現傳輸、處理和顯示。生理學實驗常用的換能器主要有以下兩種:壓力換能器主要用來測量血壓、胸腔內壓、心內壓、顱內壓、胃腸內壓和眼內壓等。它可以把壓力的變化轉化為電阻率的變化,電信號的大小與外加壓力的大小呈線性相關。張力換能器主要用于記錄骨骼肌、心肌、平滑肌等組織的收縮曲線。它可以把張力信號轉換成電信號,再經放大器將轉換的電信號放
12、大后觀察或記錄。換能器的使用方法將在以后的相關實驗中介紹。3肌動器(肌板、肌槽)肌板(槽)由絕緣的電木底板(或槽)、電極等部分組成,是生理學實驗中的常用儀器。將制備好的坐骨神經?腓腸肌標本的股骨用股骨固定螺絲固定在肌板上,將神經放在肌板電極上。肌板電極的接線柱與電刺激器的輸出電極相連,標本跟腱上的線與張力換能器相連。4屏蔽盒屏蔽盒是用來放置并刺激神經標本的裝置,外殼一般由金屬銅或有機玻璃制成,內部有七個絕緣、固定于一側的可滑動銀質電極。它們分別是兩個刺激電極,一個地線,四個引導電極。有的屏蔽盒地線為圓盤狀,或串聯一個可變電阻,以調控刺激偽跡的大小。屏蔽盒可用于神經干動作電位的引導及其他電生理實
13、驗。使用時應注意接地良好,屏蔽盒底部可用濕潤的濾紙保持其中的濕度,以防標本干燥。5鋅銅弓鋅銅弓(雙極電極)是由鋅條和銅條組成兩臂,用錫在二者的一端焊接而成。在使用時,鋅銅弓兩臂構成了短路的、原始的伏打(volta)電池的兩個電極,被刺激組織的表面液體作為電解質,在金屬與溶液之間產生電位差,即電極電位。在實驗中常用于對神經肌肉標本施加刺激,以檢查其興奮性。(二)刺激器的使用方法能使活組織產生反應的刺激因素很多,如光、聲、電、熱、機械、化學等。目前應用最多的是電刺激,因為它不易損傷組織,并且可以重復試驗,容易控制刺激的強度、時間等參數。YSD4型藥理、生理實驗多用儀是常用的電刺激器,它還有其他多種
14、功能,現將生理實驗使用的功能分述如下:1矩形波刺激器(1)刺激方式:連續“A”:按“啟動”鈕即可輸出連續脈沖,按“停止”鈕則停止輸出。脈沖的頻率由“A頻率”決定,刺激強度由“強度”調節,每個脈沖的刺激時間由“波寬”調節。按“啟動”和“停止”鈕時后面板的電磁標均有輸出供作標記使用。連續雙次:本擋主要用于作心臟不應期的實驗,刺激輸出為一對一對的連續脈沖,對與對之間的周期由“B時間”決定,每對脈沖之間由“延遲”在300ms內連續可調,“波寬”和“強度”均起作用,一對脈沖的電壓相等,不能分別調節。定時:按“啟動”鈕即可輸出連續脈沖,脈沖的頻率由“A頻率”決定,輸出時間由“B時間”決定,到達“B時間”時
15、自動停止輸出。“波寬”和“強度”均起作用。單次:按一次“啟動”輸出一單次脈沖,“波寬”和“強度”均起作用。(2)啟動:在采用“連續A”、“定時”、“單次”時使用。(3)停止:在“連續A”、計時、計數和復零時使用。(4)氖管:顯示刺激輸出的有無、刺激頻率快慢及波寬的大小,但不能顯示刺激強度。(5)A頻率:控制每秒種輸出的方波數,分十一擋,即1、2、4、8、16、32、64、128、256、512、1024Hz。(6)B時間:分十擋即0.125、0.25、0.5、1、2、5、10、15、30、60s。(7)波寬:控制脈沖方波寬度,即刺激的作用時間,從0.220ms連續可調。(8)強度:控制脈沖方波
16、的高度,即刺激的強度分02V、010、0100V三擋,微調旋鈕可在每擋范圍內使正脈沖連續調節。(9)同步輸出(在后面板):可輸出與刺激脈沖同步的觸發脈沖,輸入示波器的“外觸發”,供示波器觀察波形時使用。(10)延遲:使刺激輸出落后于同步輸出,延遲范圍為0.220ms,連續可調,與示波器連用時可調節波形的水平位置。使用連續雙次時,此鈕可在300ms內連續調節兩脈沖之間的間隔。2計時器前面板右邊的開關撥到“計時”,多用儀即按“B時間”選下的時間間隔計時,由熒光數碼管顯示累計的時間數,并由后面板的電磁標進行記錄。3計滴器前面板右邊的開關撥到“計數”,受滴器的引線插入“計數輸入”,數碼管即 顯示液滴的
17、滴數,并由電磁標進行記錄,此時電磁標仍可計時。4注意事項(1)先檢查后面板上“220V”的電源插座是否正確插好,再連接電源。關機時切忌不斷開電源而先拔此插座。(2)后面板上的鈕子開關若拔向“恒溫”,則兩蕊插座有交流220V輸出,須注意安全!平時應將開關拔向“電驚厥”一邊。(3)刺激輸出電纜線的兩頭不可短路,否則因輸出電流過大而損壞儀器。(4)波寬應小于周期,如果波寬等于周期則理論上輸出將是直流電。(5)延遲加波寬應小于周期。(6)為防止感應電流的影響,本機必須良好接地。(三)記紋鼓的使用方法主要用來記錄伴有機械變化的生理現象,如肌肉收縮、呼吸運動,以及借助其他裝置轉換為機械變化的生理變化。如血
18、壓波動、液體流量、流速等。根據動力不同,分為電動記紋鼓和彈簧記紋鼓。前者以交流電機為動力,后者以彈簧法條為動力。1結構(圖2-1)分為具有動力裝置的機座和能轉動的圓鼓兩部分。機座的主要部件是彈簧發條和齒輪。機座上面有開關、上緊發條和調節鼓速的操縱把手。扭動開關使己上緊的發條放松釋放勢能,借助齒輪帶動鼓軸轉動,從而使固定在鼓軸上的圓鼓隨之轉動。在鼓轉動過程中,如將粗調節器的把手提起,鼓速加快;放回原處,則鼓速減慢。如在調節器上加不同面積和重量的葉片以改變齒輪阻力,亦可調節鼓速,使之符合實驗需要。圓鼓部分由鼓和鼓軸管組成。鼓依靠螺絲釘固定在鼓軸管上,其位置可上下移動。2使用方法(1)慢鼓:將鼓軸管
19、套在鼓軸上,把頂釘逆時針擰轉,使鼓軸管下端的梢釘嵌入小凹中,則圓鼓即隨之而轉動,稱為慢鼓,最常用,使用中如發現描筆上下移動時不能完全與鼓面接觸,可調節機座部的三個調節螺釘來調節記紋鼓的水平位置。(2)手動鼓:把頂釘順時方向擰轉,使鼓軸管上提,其下端梢釘脫離鼓軸小凹,則圓鼓不隨鼓軸轉動,可用手自由轉動。3記錄紙的粘貼 將記錄紙光面朝下放在桌面上,把鼓軸管和鼓同時取下,在鼓上方的橫梁上系一根較鼓為長的細線,供以后撕開記錄紙之用。左手執鼓軸管下端,將鼓置于記錄紙中段,拉緊細線,使其恰在記錄紙的接縫處,用右手將記錄紙的右端復于鼓上,在紙的左端邊緣涂一薄層漿糊,然后將兩端粘合,粘合時要使記錄紙緊繞于鼓面
20、上。使用單鼓時可用橡皮筋固定記錄紙,不用漿糊粘貼。4墨水描記法 將描筆頭灌注適量墨水固定于描記杠桿上即可描記。也可用刨花剪成筆或塑料管制成彎頭筆尖,縛于描記杠桿上,醮以適量墨水來描記。停鼓時應使筆尖離開鼓面,以免墨水持續在一處重復描記,造成墨水沾污曲線和筆尖阻塞。實驗結束后,應清洗描筆頭,以免阻塞。5記紋鼓記錄的整理 先根據實驗目的對整張記錄進行全面仔細的分析和對比,找出能客觀而概括地反映實驗結果的部分將其剪下貼在實驗報告上。實驗記錄的保留部分應在滿足前述要求的條件下,盡量減少。但每張記錄圖在刺激所引起的反應前后必須有充分的對照部分。記錄圖的剪裁要整齊,粘貼時各圖的基線要在同一水平,圖間的距離
21、應一致。圖的正下方應附有說明,說明一般包括:實驗名稱或圖名,動物種類,性別和體重,麻醉藥的種類,用量和用法,各曲線的意義,實驗日期等。6使用記紋鼓的注意事項:(1)由于圓鼓是順時針方向轉動,故應將杠桿、電磁標和其他描筆置于計紋鼓的右側。(2)描筆應放在圓鼓的切線位置上,其筆尖與鼓在切點輕輕接觸。同時使用數根描筆時,必須使各筆尖在同一垂線上。(3)記錄應從記錄紙接縫處開始,取下記錄紙時亦于此處撕開,如果記錄簡單,一張記錄紙可分上下記錄兩次或多次。(4)鼓速應按記錄的生理反應速度選擇。一般應在保證清楚顯示所要觀察的現象的前提下,盡量慢些。使用粗調節器必須在鼓轉動過程中順勢將其把手提起或放回,不可用
22、力硬提或硬壓。(5)開始記錄前,應先上緊彈簧記紋鼓的發條,并檢查記紋鼓是否運轉正常。實驗完畢,應將發條放松以保持發條的彈性。(6)不可將圓鼓從機身取下橫放于實驗臺上,以免滾落于地上摔壞。搬動記紋鼓時應雙手托住機座,切不可手執鼓軸提起。(四)二道生理記錄儀的使用方法LMS2B型二道生理記錄儀使用方法1儀器通電前的操作電源開關及各放大器開關均置于“斷”的位置,控制走紙的琴鍵也置于“?!?,連接好各有關連線(如電源線、換能器輸入線等),接好地線。2記錄紙的安裝扳動抬落筆架將所有筆尖抬起,離開書寫板面。用兩指捏著書寫板的提手部份,輕輕向上提起,取出機內的儲紙軸,裝好記錄紙。輕壓書寫板的提手,使書寫板恢復
23、原位。抬起橡皮壓輪,使記錄紙穿過壓輪,然后放下橡皮壓輪。放下抬落筆架。注意:在安裝記錄紙的過程中切勿碰到記錄筆尖,以免影響記錄性能。3墨水的使用取下墨水壺蓋子,注入記錄墨水至墨水壺的2/3處,蓋上蓋子,用指尖堵住蓋子中央的小孔向下一壓一放,使墨水從筆尖流出,要多按幾次,直至把導管中氣泡排除干凈。注意:必須使用專用記錄墨水。導管中氣泡必須排除,否則墨水不會流出來。實驗完畢,應將筆尖浸泡在盛有清水的清洗槽內,以免描筆堵塞。兩次實驗間隔時間較長時,應將墨水吸出,并用清水清洗墨水壺。4測試前的操作接通電源,開啟電源開關,指示燈亮,機器進入正常工作。放下抬落筆架,使記錄筆尖接觸在記錄紙面上。控速板上的時
24、間標記旋鈕可分別置于“1s”、“10s”或“1min”檔,可分別使時間標記筆在記錄紙上每1s、10s或1min作一次標記。事件標筆由面板上方的鈕子開關控制,當開關扳向“內”時,每按一次“標記”按鈕或短路一次外接標記電纜中黃、白兩線所接的兩個鱷魚夾,都可使事件標記筆在記錄紙上方作一標記。當開關扳向“外”時,事件標記筆通過外接標記電纜中黃、白兩線所接的鱷魚夾由外部信號控制(注意:此時最好不要按“標記”按鈕,否則會將外部信號短路)。5FG直流放大器調整將FY2血壓放大器的輸出開關置于“斷”,將二芯的后級輸入電纜插入FD2多功能放大器的FG輸入插孔(此插孔在機器的右側面上),打開FG放大器開關,分別旋
25、轉兩個FG放大器的零位旋鈕,使兩記錄筆尖位置與機械零位(FG放大器關閉時筆尖的位置)在同一點上,按FG校對按鈕,便可使兩筆尖上移10mm,此時FG放大器便調好了。6FD2多功能放大器調整使用拔去FG放大器輸入插頭,FG放大器開關置于“通”,FG2放大器測量開關置于“斷”,將靈敏度開關置于最低(“10”)檔,用調零使筆尖于零位,再將靈敏度開關置于最高(“0.02”)檔,如筆尖移動,調“直流平衡”使筆尖保持原零位。如此反復兩次,靈敏度 開關換檔時,基線位置便不再改變。在以后測試記錄信號波形時,不可再調“直流平衡”。放大器的高頻特性由“濾波”控制 ,分為10、30、100、1kHz、OFF五檔。放大
26、器的低頻特性由“時間常數”控制 ,分 DC(直流)、2、0.2、0.02、0.002s五檔,其相應的低頻截至頻率為0、0.08、0.8、8、80Hz。 若不記錄被測信號的直流成份就不要采用DC檔。放大器的靈敏度由“靈敏度”和“時間常數”共同決定。當“時間常數”置于“DC”檔時,放大器的靈敏度就是“靈敏度”各檔的系數乘50,即直流靈敏度為1、25、5500mV/cm,當“時間常數”置于其他檔時,其交流靈敏度就是“靈敏度”波段開關上各分檔數。測試時“靈敏度”應從最低檔(“10”)開始,逐漸轉向高檔。機內提供校對電壓,“1mV”用于直流靈敏度校對,“50V”用于交流靈敏度校對。當“靈敏度”、“時間常
27、數”、“濾波”調好后,打開測量開關,如筆尖偏離零位,可調節換能器引線中部的調零電位器。換能器與標本連好,選擇適當的走紙速度即可記錄。如需移動基線用“調零”旋鈕調節。張力換能器使用注意事項:(1)不要用手壓彈性梁,以免變形太大影響靈敏度或損壞。(2)防止水滲進換能器。(3)換能器應水平裝在支架上。(4)在正式記錄前,換能器應先通電預熱30分鐘,以確保精度。 (5)在測量時應避免風直接吹在測量物體上。7FY2血壓放大器的調整使用輸出開關置于“通”,“靈敏度”置于12kPa/cm(90mmHg/cm),調節“調零”旋鈕,使筆尖在零位線上。將“靈敏度”從最低檔逐漸轉向最高檔看筆尖零位是否偏?如有偏移,
28、用“直流平衡”調至零位。機內提供12kPa和12kPa的校對信號,以校對各檔位的靈敏度。調畢后,將“靈敏度”置于“6kPa/cm檔,關閉“測量”開關,將換能器與動物血管接好,打開“測量”開關,即可描記血壓波形。欲觀察血壓波形的細節,可將“靈敏度”開關逐步旋至高檔,調節FY2“調零”旋鈕,使波形位于記錄范圍,同時選擇適當的紙速,以便觀察。壓力換能器使用注意事項:換能器充液體時,必須將壓力倉、膠管和動脈插管中的氣泡排盡,膠管盡可能短。換能器應水平固定在支架上,高度和被測動物心臟等高,不得隨意改變其位置。使用前通電30分鐘,待零位穩定后方可進行測量。使用中要輕拿輕放,避免摔碰及劇烈震動。:8測試后的
29、操作按下走紙“?!辨I,關閉FG放大器開關,FD2和FY2放大器靈敏度調至最小關閉“測量”開關,取下換能器,關閉電源,拔下電源插頭,抬起壓紙輪,取下實驗結果,清潔儀器,最后套上儀器保護罩。9二道生理記錄儀使用注意事項:FD2和FY2的“測量”開關接通以前,一定要接上換能器。“靈敏度”從低檔逐步調至所需檔位。在配接換能器時應將FG放大器置于“斷”,即關閉。在使用FD2或FY2的高靈敏度檔位時,若出現50Hz交流干擾,可將FG放大器的“50Hz抑制”鍵按下,以減少影響。停機時將各種開關均置于“斷”。若長時間不用,應取下各輸入線,并將筆尖放至清洗槽內,用吸管吸盡壺內墨水,用酒精清洗筆尖管道,套上保護罩
30、。對于FD2每次儀器重新通電后,第一次使用“AC”檔時,記錄筆可能偏向一邊,需30秒后才會回到零位,這屬于正常現象。(五)SBR1型示波器的使用方法1.示波管控制部分(1)聚焦:調節熒光屏上圖形的線條,使之聚集成最細最清晰。(2)輝度:調節熒光屏上圖形亮度的強弱,順時針旋轉時亮度逐漸增強。(3)標尺亮度:順時針方向旋轉時,熒光屏前坐標刻度線發亮,且亮度逐漸增強。2時間基線(簡稱時基)控制部分:時基的作用是使電子束從左至右進行水平掃描。其工作方式有往復掃描和觸發掃描。(1)時間/厘米(掃描速度鈕):可以調節光點的水平掃描速度從5s/cm至1s/cm共分21擋。(2)觸發選擇鈕:選擇觸發信號的來源
31、。外觸發:當有一定幅度的脈沖信號由觸發信號端輸入時,光點即被觸發掃描。在觀察由刺激引起的電信號的實驗中,經常選用此方法。觸發信號來自刺激器輸出的同步脈沖。內觸發:觸發信號由輸入至垂直放大器的信號通過儀器內部的線路提供,內觸發分“上線”和“下線”兩種,表示觸發信號來自Y軸上線和下線。內、外觸發又各自分為“AC”和“DC”兩檔分別表示觸發信號以電容偶合和直接偶合方式輸給觸發線路。觸發信號頻率在15Hz以上時,一般選用電容偶合(AC)輸入方式;15Hz以下時,可選用直接偶合(DC)方式輸入。電源觸發:觸發信號來自50Hz交流電源,這種方式對側量信號中分辨交流電干擾非常方便。(3)觸發電壓極性選擇鈕:
32、用來選擇觸發電壓的極性,分“+”和“”兩檔。分別在有正相和負相觸發信號輸入時才能使時基觸發。(4)觸發電平鈕:與時基工作方式選擇合一旋鈕,用來調節觸發電位的幅度。一般在此鈕置中間位置時,略向左右旋轉剛好能達到穩定的觸發掃描的最低觸發電平位置。(5)時基工作方式選擇鈕: 連續掃描:光點按掃描速度控制鈕所指示的速度往復掃描。 觸發掃描:在“連續”與“自動”之間,調節其至某一位置,能呈觸發掃描狀態。注意:在沒有觸發信號輸入時,不應把選擇鈕長時間置于此位置,以免燒毀熒光屏。自動掃描:無觸發信號輸入時光點可自動掃描。有觸發信號輸入時,光點能在很寬的范圍內(501MHz)與觸發信號取得穩定的同步 (見圖2
33、5)。(6)水平移位鈕:調節光點在屏幕上的水平位置。調此鈕,使基線從屏幕左側第一條縱線刻度處起始,或移動圖形的水平位置移動。(7)X軸作用掃描擴展:調節此鈕可將屏幕上的圖象在水平方向展開。正常(×1)時,呈不擴展掃描狀態,在×2等掃描擴展檔位時,則掃描速度作×2等擴展,如對1ms/cm的掃速,則此時實為0.5ms/cm,“掃描擴展”指示燈亮。若將此鈕置“外接”側,則隔斷由“時基”提供的掃描脈沖。此時外來所選脈沖可通過“外接”鈕輸入以代替“時基”脈沖。3垂直放大器(Y軸放大器)(1)輸入端:接受需要放大的待測信號。SBR1型為雙端輸入,分別標有“A”和“B”字樣。同
34、時輸至兩個輸入端的信號互相作為參考電平。它放大兩個輸入端的差值。(2)輸入選擇:選擇開關置于“A”時,放大器B端接地,信號由A端輸入,此時辨差放大器成為單端放大器。正信號輸入“A”端時,光點向上偏轉。反之,光點向下偏轉。選擇開關置于“B”時,信號由B端輸入,此時“A”端接地。正信號輸入時,光點向上偏轉。反之,光點向下偏轉。在電生理實驗中,由于視覺上的習慣,常使信號向上偏轉。選擇開關置“AB”時,信號由“A”和“B”兩端輸入,為辨差輸入方式。以上三種輸入方式又分別分為交流輸入(AC)和直流輸入(DC)兩種方式?!癆C”:放大器和輸入端間串入一個電容器,此時直流信號不能進入放大器。當信號中的直流成
35、分不需要時,以及為了消除由于外來的直流電壓所引起的基線漂移時,可采用“AC”偶聯?!癉C”:放大器為直流輸入,此時信號中的交、直流成分均被放大。(1)增益控制鈕(Y軸靈敏度):表明有V/cm、mV/cm和V/cm字樣,從20V/cm至20V/cm共分16擋。用它來調節垂直放大器的放大倍數。(4)垂直移位鈕:調節此鈕可使掃描線上下移位。(5)直流平衡鈕:調節此鈕可防止在改變垂直放大器的增益時出現基線垂直移位。“直流平衡”四字為紅色字樣,還有暗旋鈕。如需調整,應在開機30分鐘后進行,一旦調定好,不可輕易再調。(6)地線插孔:是放大器的接地端,有標志,儀器面板,機殼的金屬端均于此相通。使用前注意事項
36、1此儀器在環境溫度為+1035,相對濕度為65±15%,及大氣壓為750±30mmHg的正常氣候條件下,經預熱30分鐘后,能連續工作8小時。2檢查電源電壓是否正常,此儀器工作電源電壓為220V±10%3電源開啟前儀器各主要控制器應置下列位置:輝度置中心位置觸發電平“自動”X軸作用“正常”靈敏度20V/cm移位置中心位置4電源開啟,冷卻風扇工作,儀器預熱30分鐘,性能穩定,達到技術指標。5順時針方向旋動“輝度”鈕,直至有掃描線顯示,調節上、下Y軸可同時得到兩條掃描線。調節“聚焦”使掃描線清晰。6當儀器內部溫度升高超過55時,儀器即自動停止工作,此時應采取適當降溫措施
37、,以使儀器正常工作。7電源關閉后,一定要經過3分鐘才能再開啟電源。(六)微機化實驗教學系統使用指南 隨著計算機技術的發展,計算機輔助教學(CAI)在高等醫學教育領域的應用日漸廣泛,尤其給傳統的實驗教學帶來了巨大的變革,CAI在生理學實驗教學方面已經普遍采用。目前基于生理學實驗教學的CAI系統較多,如D-951 Super Lab(南京)、RM6240(成都)、PowerLab(澳大利亞)和PclabUE(北京)等,其原理和使用方面大同小異,下面就我們使用的CAI系統作一簡介。1.系統原理及構成微機化生理實驗教學系統由微機、采樣及程控專用接口、程控生物電放大器、換能器接口、程控刺激器、專用軟件和
38、打印機等組成。通過記錄電極或換能器引導出的生物電信號,經放大后通過 A/D 轉換送入微機處理。同時微機還可通過專用接口控制放大器的參數和狀態。放大器的輸出信號可供其它儀器使用;同時計算機采樣系統也可與普通放大器或記錄儀連接。2. D-951 SuperLab系統2.1硬件系統硬件系統包括輸入面板和放大卡(集成有放大、A/D以及通訊模塊)和換能器、導線等輔助設備。注:1、2通道輸入電信號,3、4通道輸入換能信號。2.2軟件操作指南本系統提供中文下拉菜單、“熱鍵”及鼠標幾種操作方式,供使用者選擇。快捷操作:Step 1 開機自動進入D-95 Super Lab實驗系統,選擇“生理”。Step 2
39、選擇實驗模塊,按空格鍵或點擊開始采樣,采樣過程中點擊作相應的標記,按空格鍵或點擊停止采樣,及時點擊存盤。Step 3 結果處理,點擊選取所要的結果, 點擊打印,選擇“2正常”模式打印。界面介紹 以下是記錄儀(二道)方式的主控界面。 上半部分左側為Windows式功能按鈕,由左至右其功能分別為開關(退出)、讀盤、存盤、打印、測量、幫助、標記、項目和剪貼。用鼠標即可直接選中(按左鍵)某一功能,按照提示進行后續操作即可完成某項特定的功能。(在記錄狀態下上述功能按鈕除標記和項目外均處于休眠狀態)。 上半部分右側為程控刺激器,在記錄狀態時可給出刺激信號,用鼠標操作相應的推鈕即可改變刺激的頻率和幅度,頻率
40、最低時為單刺激。推鈕上下的三角形可精細調節推鈕的位置,在調節的同時系統顯示刺激參數。下方的開停按鈕可控制刺激器的開與停。 下半為記錄“走紙”控制,為仿錄像機結構。 記錄、 停止、圖形左右移動, 移動至一段的頭端或尾端(50頁為一段)。、按鈕可調節“走紙”速度(即采樣速度SR), “壓縮”即波形的橫向(X軸方向)壓縮,在需要采樣快而走紙慢的場合使用。其上的窗口顯示采樣周期(SR)和壓縮比。在采樣期間記錄數據以臨時文件自動存盤,無需使用者作另外的操作,臨時文件在下次記錄時,自動覆蓋。功能按鈕上的“存盤”功能是指將編輯好的部分數據起名存盤,作永久保留。存盤文件名前加 A: 即可將數據保存到軟盤。下圖
41、是程控放大器控制界面。右半用于控制放大器參數,包括增益(gain)、濾波(filter)和時間常數(time constant)。左邊的兩個推鈕用于調節顯示基線和顯示幅度。需要說明的是,顯示基線和顯示幅度的改變不影響內部記錄數據和測量結果,因此可以任意調節。點擊推鈕上下的三角形可精細調節推鈕的位置下圖是壓力放大器控制界面。面板上的旋鈕和按鈕用以調節:壓力放大器的增益,完成定標 和調零 。當曲線的顯示位置不合適時,用鼠標點一下“自動基線”按鈕,曲線即自動回到合適位置.本操作只對顯示基線起作用,并不影響內部記錄數據,也不影響測量結果。因此可以任意調節。左圖是張力放大器控制界面,基本操作與壓力放大器
42、相同,直流補償推鈕用以調節換能器的直流偏移。 系統同時提供下拉菜單操作方式,其功能與圖標方式一致。功能操作 本系統提供了三種兼容的操作方式,即下拉菜單,快捷鍵和圖標按鈕。使用者可根據自己的習慣及熟練程度任意選擇。作者推薦圖標按鈕操作方式。讀盤:將以前存盤的數據裝入計算機。輸入文件名,回車即可完成。文件名中可使用“*”代表不確定的部分。存盤:將當前數據存入磁盤。輸入文件名,回車即可。存盤文件名前加 A: 即可將數據保存到軟盤。在示波器模式存盤時,需輸入存盤頁數。打?。捍蛴‘斍爱嬅?。有正常大小和縮小兩種方式。也可“打印”為圖形(BMP)文件,以便剪貼到 WORD,Powerpoint上。測量:建立
43、測量光標,顯示測量結果。顯示結果為光標與圖形交叉點的數據,一條光標時,顯示壓力或電壓的絕對值;兩條光標時,顯示兩交叉點之間的差值和該區域的其他數值(如差分、積分、均值、計數等)。光標可被鼠標拖動,也可用“-”和 “=”鍵移動。用鼠標右鍵或“ESC”鍵取消光標。幫助:顯示幫助信息,用戶可用書寫器自由編輯該信息。標記:為記錄曲線提供項目標記。此項在記錄和停止時均有效首先用鼠標選擇欲標記的項目,再將其標記到曲線上。按右鍵可放棄標記。擦除:用以擦除項目標記剪貼:實驗結束后,對記錄曲線重新剪輯。用鼠標拖動(按住左鍵)選擇需要的部分,經重構后,重組記錄曲線。對重構結果不滿意,可令其復原,重新剪輯。剪輯可反
44、復進行,直至滿意為止。按確定退出編輯狀態。建議不要改變曲線的前后順序。為了防止由于編輯時誤操作所造成的數據丟失,建議編輯之前先將原始數據存盤備份。模擬實驗:部分實驗在“幫助”欄目下的“模擬顯示”項可運行模擬實驗程序。選擇操作項目時,鼠標應Hold(按住左鍵)一段時間。做模擬實驗時“-”和 “=”調節顯示速度。打“空格”鍵或ESC退出模擬實驗。特殊操作恢復數據:由于意外停電、設備障礙等原因導致程序運行中斷或退出記錄系統時。所記錄的數據并沒有丟失,依然可以恢復出來。操作方法是:再次進入系統后,在進行其它操作之前首先選擇菜單上的恢復功能,再輸入所要恢復數據的頁數,即可完成。附:常見生物信號記錄參數(
45、參考)表實 驗 項 目采樣周期(ms)壓縮1:增益濾波時間常數靈敏度備注神經干動作電位0.03±20010K.001S皮層誘發電位.05-.220001K0.1疊加肌電(蛙腓腸肌).0520010K.001S膈神經放電210244K-10K10K.01S減壓神經放電25244K-8K10K.01S蛙心電(直接)20±2200.1K0.1S兔、鼠心電21021000.1K.1-1S腦電(兔)55015000.1-.01.1-.01S動脈血壓,心室壓105041中心靜脈壓1050242-4呼 吸(小膈肌)10501.5-1腸,血管平滑肌條50500121-2記 滴205040.
46、5直方圖3Pclab-UE生物醫學信息采集系統31 生物醫學信號放大器外形硬件放大器分前后兩個面板,前面板用來做常用操作,后面板主要用來連接線路,其中前面板的各部分功能如下:PCLAB-UE生物醫學信號采集處理系統電源開關通道1通道2通道3通道4刺激輸出5V10V100V后面板的各部分功能如下:北京微信斯達科技發展有限責任公司USB接口監聽輸出地線接口電源接口32 Pclab-UE應用軟件窗口界面功能介紹Pclab-UE應用軟件運行時窗口如下圖:界面自上而下為:(1)標題欄:用于提示實驗名稱。(2)菜單欄:含有主要的下拉主菜單。(3)工具欄:提供了最常用的快捷工具按鈕,依次為:新建、打開、記錄
47、存盤、打印預覽、復制、取消、采樣、記錄、刺激、面板切換、測量、鎖定。(4)實時計算工具欄:提供了實時計算的計算結果輸出。(5)采樣窗:四個采樣窗分別對應放大器的四個物理通道,用于采樣時的波形顯示,數據處理,標記測量等功能,是主要的顯示區域。(6)狀態欄:從左到右依次為命令提示區、狀態提示區、標記或幀數提示區、采樣時間、硬件狀態提示區。(7)控制面板:位于整個界面的最右側,是各通道的控制中心,針對當前通道進行不同的控制調節,如下圖所示。(8)計算結果顯示面板;浮于整個窗口的上方,用于對選定的波形進行計算分析并顯示結果,如下圖所示。33 軟件設置第一步,執行“設置”菜單中的“采樣條件”菜單項,打開
48、采樣條件設置窗口見下左圖:該窗口中有四個下拉列表框,分別用來設置采樣頻率、通道個數、顯示方式、觸發方式。其中采樣頻率可以根據實驗做出選擇,通道個數用來確定實驗中使用的通道個數,顯示方式有記錄儀方式和示波器方式兩種,可根據實驗需要選擇,當使用示波器方式顯示時,還可以進一步選擇觸發方式是自動觸發還是刺激器觸發,如果是刺激器觸發則采樣的啟停由刺激按鈕來控制。第二步,為每個通道在控制面板的通道功能列表框中選擇對應的功能及數據單位,同時確定要計算的內容。如下右圖: 第三步,適當調節放大倍數,時間常數,低通濾波,陷波等參數。第四步,如果使用直流狀態,即使用傳感器進行實驗時,要對通道進行調零,執行“設置”菜
49、單中的“當前通道調零”菜單項進行自動調零。第五步,對非電信號如血壓等可以進行定標,執行“設置”菜單中的“當前通道定標”菜單項進行定標。詳細定標過程見后。第六步,單擊工具欄上的“采樣”按鈕開始采樣,在采樣的過程中可以實時調整放大倍數等各項指標以使波形達到最好的效果,再次單擊此按鈕則可停止采樣。34 刺激器的設置與調整為了方便電生理實驗,Pclab-UE硬件部分內置了一個全程控的刺激器,該刺激器所提供的功能與性能指標完全能夠滿足實驗的要求,且工作穩定可靠。恒壓源設計,0-100V電壓選擇令實驗效果十分理想,為了正確使用刺激器可進行如下設置:第一步:打開刺激器設置面板,可以通過“設置”菜單下的“刺激
50、器設置”菜單項來實現,也可以通過工具欄上的“切換”按鈕在控制面板和刺激面板間進行切換,此時刺激面板就會替代放大器控制面板以方便您進行刺激器設置。刺激面板如圖:第二步:選擇刺激模式為正確的選項,調整相關的波寬、幅度、周期、延時、間隔等參數到合適的數值,單擊工具欄上的“刺激”按鈕即可發出刺激35 實驗結果的存盤及打印輸出為了保證實驗數據的完整保存,Pclab-UE系統提供了強大的數據保存機制,并且采用了標準的文件存盤方式。根據用戶要保存的目的不同,本系統對數據的保存分兩種,一種是整個實驗過程中的全部數據的保存,一種是對某一段時間內較好的波形的記錄保存,下面分別予以介紹。全部數據保存是指從“新建實驗
51、”開始就對整個實驗過程中產生的全部波形數據的保存,其目的是在實驗結束后可再現實驗過程。這個保存是通過停止采樣后“文件”菜單中的“所有實驗數據保存”菜單項來實現的,用戶只需要輸入一個文件名即可,文件將被自動存放在本系統安裝后的UserData文件夾中以便用戶集中管理。記錄保存是針對實驗過程中出現的穩定而清晰的波形進行保存的,它可以保存一段時間內的較好的波形,其操作方法是當出現較好的或用戶認為需要記錄的波形后按下工具欄上的“記錄”按鈕,從此刻開始的波形將會被記錄起來,直到用戶再次單擊此按鈕停止記錄為止。在采樣的過程當中用戶可以多次通過此按鈕來記錄數據,當停止采樣后,用戶可通過工具欄上的“存盤”按鈕
52、或“文件”菜單中的“實驗記錄保存”菜單項來保存所記錄下來的文件,用戶只需要輸入文件名即可,文件將被自動存放在本系統安裝后的UserData文件夾中以便用戶集中管理。通過以上的兩種方式,用戶即可放心地保存實驗所取得的數據了。對于波形的打印輸出,用戶可以先通過工具欄上的“預覽”按鈕或“文件”菜單中的“打印預覽”菜單項來進行波形的預覽,也可以直接通過“文件”菜單中的“打印”菜單項直接打印輸出。36 Pclab-UE軟件使用說明361 菜單使用說明菜單欄包含了Pclab-UE軟件的功能,以下分別對每組菜單分別予以介紹:(1)文件菜單:打開“文件”菜單如右圖:A、新建實驗:建立一個新的實驗,將軟硬件環境
53、按新實驗的要求重新配置并做好采樣的準備。執行此菜單項會彈出“新建實驗”對話框如圖:該對話框將常用的實驗分為生理學實驗、病理學實驗、藥理學實驗、運動生理學實驗和自定義實驗五類,每一類實驗用戶由系統向用戶提供了一些預設的實驗配置,通常用戶只要選擇對應的實驗就可以直接進行采樣,當然如果與用戶所做的實驗有所不同也可以由用戶做適當調整。如果沒有提供用戶所要做的實驗,則要選擇“通用實驗”由用戶自行配置實驗環境。用戶選完對應的實驗并“確定”后,系統將彈出“實驗信息”對話框如圖:在這里要求用戶針對此實驗填入簡要的信息,用戶可以根據實際情況進行填寫。填寫完后就可以開始新的實驗了。B、打開實驗:打開一個以前做完的
54、保存起來的實驗。該功能可以打開以前保存下來的一個完整的實驗或以前經過“記錄”功能保存下來的一段波形數據文件,執行此命令后彈出“打開實驗”對話框如下圖,用戶可以選擇一個實驗即可將該實驗的波形顯示在屏幕上,用戶通過水平滾動條和垂直滾動條以及時間單位或縱向放縮的調整可以重現以前的波形,也可以通過“設置”菜單下的“工作方式選擇”來決定是接著采樣還是回放打開的波形數據。C、實驗記錄保存:將用戶在實驗過程中記錄下來的實驗片斷保存到用戶指定的文件中。執行此菜單會彈出“保存實驗”對話框如圖,用戶只需輸入文件名即可,文件將被存放在本系統所在文件夾的UserData文件夾里。 D、所有實驗數據保存:將本次實驗的所
55、有波形數據保存到用戶指定的文件中。執行此菜單會彈出“保存實驗”對話框,用戶只需輸入文件名即可,文件將被存放在本系統所在文件夾的UserData文件夾里。E、打印設置:用來設置打印機屬性,用戶可以通過它來設置打印機的屬性如上右圖:F、打印預覽:預覽打印輸出的結果,用戶可以先通過 “打印預覽”對話框選擇要打印的通道如圖,然后就可以預覽到打印輸出的效果。G、打?。合虼蛴C輸出波形,用戶一樣可以通過“打印預覽”對話框選擇要打印的通道,同時還可以選擇要打印的頁數即從當前屏幕的波形開始向后打印幾屏,確定后即可打印輸出。H、退出:退出本系統,如果用戶沒有存盤則會提示用戶存盤如圖:選擇“是”用戶可以按“所有實
56、驗數據保存”那樣操作以保存文件;選擇“否”則不存盤直接退出,所有實驗數據將全部丟失;選擇“取消”則取消此次操作,繼續使用本系統。(2)編輯菜單:打開編輯菜單如圖:A、取消:該菜單項用來取消用戶對波形的中值濾波和平滑濾波的操作,當用戶發現所做的濾波處理效果不好時可以取消操作恢復波形的原狀。B、復制:將用戶選擇的波形復制到系統剪切板上,用戶可以以圖片的形式向其他應用程序粘貼所選擇的波形。執行“復制”菜單項以后打開Windows自帶的“畫圖”程序,執行“畫圖”程序的“粘貼”菜單項,即可將所選的波形以圖片的形式粘貼到“畫圖”程序中,當然也可以向Word等支持圖形粘貼的程序粘貼。C、清除:此項功能是用來
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