1、 分布分布植物細胞與組織的重要營養物質和支持物質，廣泛分布于植物各部位，根、莖、葉、花、果實、種子等多含葡萄糖、果糖、淀粉和纖維素等。 生物活性生物活性 香菇多糖抗腫瘤活性 黃芪多糖增強免疫功能糖的分布和生物活性 分布分布尤以高等植物分布最多。分布于植物各個部位，如人參的、根莖、莖、葉、花、種子均含三萜皂苷。 生物活性生物活性 人參皂苷免疫促進 天麻苷安神鎮靜 強心苷強心作用 黃酮苷抗菌、止咳、平喘、擴張冠狀動脈血管苷的分布和生物活性香菇多糖注射液香菇多糖注射液免疫調節劑，用于惡性腫瘤輔助治療。黃芪多糖注射液黃芪多糖注射液（熱毒干擾素） 提高人體白細胞誘生干擾素的功能。 產品開發復方甘草酸苷片

2、復方甘草酸苷片：慢性肝病，改善肝功能異常，用于治療濕疹，皮膚炎、斑禿。白芍總苷膠囊：抗炎免疫調節藥，用于類風濕關節炎。 黃芩片：消炎解毒。用于上消炎解毒。用于上呼吸道感染，細菌性痢疾等。呼吸道感染，細菌性痢疾等。 第一節第一節 糖的結構和分類糖的結構和分類 一、糖的結構一、糖的結構 糖（糖（saccharides）多羥基醛或多羥多羥基醛或多羥基酮及其衍生物、聚合物基酮及其衍生物、聚合物 結構表示方法：結構表示方法：FischerFischer式（直鏈式）式（直鏈式） HaworthHaworth式（透視式）式（透視式） ReeveReeve式（式（構象式）構象式） FischerFischer

3、式式 HaworthHaworth式式端基端基C與最遠的與最遠的*C（C5或或C4）上的）上的O成環成環 C5旋轉旋轉120使環張力最小使環張力最小 將投影式向右傾倒將投影式向右傾倒90 1、糖的絕對構型、糖的絕對構型 -距端基距端基C最遠的最遠的*C（C5或或C4）構型）構型 Haworth式：式：C5（或（或C4）-取代基：取代基： 向上向上D型，向下型，向下L型型2、糖的端基碳原子差向異構體（苷鍵構型）、糖的端基碳原子差向異構體（苷鍵構型） -C1與與C5（或（或C4）相對構型）相對構型 C1-OH與與C5（或（或C4）-取代基：取代基： 同側同側構型，異側構型，異側構型構型 -D-糖糖

4、 -L-糖糖 ROHOHHOHROHOHROROHOH-D-D-糖糖 -D-D-糖糖 -L-L-糖糖 -L-L-糖糖OROHHOROHHOROHHOROHH -D-D-糖糖 -D-D-糖糖 -L-L-糖糖 -L-L-糖糖 3、糖的氧環、糖的氧環吡喃糖：六元氧環吡喃糖：六元氧環 呋喃糖：五元氧環呋喃糖：五元氧環OOD-芹糖芹糖D-葡萄糖葡萄糖、糖的構象、糖的構象呋喃糖：平面信封式呋喃糖：平面信封式吡喃糖：椅式吡喃糖：椅式(eeveeeve式式)O41O41=1C=1C（A A式）式） =C1=C1（N N式）式）二、糖的分類二、糖的分類 根據能否水解和分子量大小分為根據能否水解和分子量大小分為:

5、單糖單糖(monosaccharides)低聚糖低聚糖(oligosaccharides):29個單糖個單糖多糖多糖(polysacchari des):10個以上單糖，個以上單糖， 一般幾百甚至幾萬個單糖組成。一般幾百甚至幾萬個單糖組成。 （一）單糖（一）單糖 三碳糖三碳糖八碳糖，五碳（戊）糖和六碳（己）八碳糖，五碳（戊）糖和六碳（己）糖最常見，衍生物中糖醛酸和糖醇最常見。糖最常見，衍生物中糖醛酸和糖醇最常見。H,OHHOOOHOH五碳醛糖：五碳醛糖：D-木糖木糖(D- xyl) 甲基五碳糖：甲基五碳糖：L-鼠李糖鼠李糖(L-rhamnose，L-rha)OHHOH,OHOHOCH3D- x

6、ylL-rha六碳醛糖：六碳醛糖：D-葡萄糖葡萄糖(D-glucose，glc)H,OHOOHOHOHHO六碳酮糖：六碳酮糖： D-果糖（果糖（D-fru）OOOOHHH(OH)CH2OH糖醛酸：糖醛酸： D-葡萄糖醛酸葡萄糖醛酸OHH,OHOOHOHCOOH （二）低聚糖（二）低聚糖 1、單糖數目：、單糖數目： 二糖（蔗糖、麥芽糖）、三糖、四糖等二糖（蔗糖、麥芽糖）、三糖、四糖等 例：環糊精例：環糊精68個葡萄糖組成，六聚體：個葡萄糖組成，六聚體：-環糊精，環糊精， 七聚體：七聚體：-環糊精環糊精，八聚體：，八聚體：-環糊精。環糊精。 環狀分子內側疏水性，增大難溶性藥物溶解性，提高穩定性。環

7、狀分子內側疏水性，增大難溶性藥物溶解性，提高穩定性。2、是否含游離醛基或酮基：、是否含游離醛基或酮基： 還原糖還原糖:有游離醛基或酮基，如麥芽糖。有游離醛基或酮基，如麥芽糖。非還原糖：兩個單糖以端基羥基脫水縮合形成，非還原糖：兩個單糖以端基羥基脫水縮合形成， 無游離醛基或酮基。如蔗糖。無游離醛基或酮基。如蔗糖。蔗糖蔗糖 麥芽糖麥芽糖 （三）多糖（三）多糖1植物多糖植物多糖 （1）纖維素（）纖維素（cellulose） （2）淀粉（）淀粉（starch） （3）粘液質（）粘液質（mucilage） （4）樹膠（）樹膠（gum）2菌類多糖菌類多糖 豬苓多糖豬苓多糖抗腫瘤轉移和調節免疫功能抗腫瘤轉移

8、和調節免疫功能3動物多糖動物多糖 肝素肝素天然抗凝血物質天然抗凝血物質 甲殼素甲殼素甲殼類昆蟲外殼，濃堿處理得脫乙酰甲殼素。甲殼類昆蟲外殼，濃堿處理得脫乙酰甲殼素。制成透析膜、超濾膜，作藥物載體具緩釋、持效的優點，制成透析膜、超濾膜，作藥物載體具緩釋、持效的優點， 還用于人造皮膚、人造血管、手術縫合線等。還用于人造皮膚、人造血管、手術縫合線等。第二節第二節 苷的結構與分類苷的結構與分類 一、苷的含義一、苷的含義 糖糖+非糖物質非糖物質 苷苷OOHOHOHORO1H23456苷鍵原子苷鍵原子 苷元苷元 苷鍵苷鍵端基碳原子端基碳原子-D-D-葡萄糖苷葡萄糖苷 糖的端基碳原子糖的端基碳原子 非糖部分

9、非糖部分苷元苷元(genin)(genin) 苷鍵：苷元與糖之間的鍵，即苷鍵：苷元與糖之間的鍵，即苷鍵原子和端基苷鍵原子和端基C C原子之間的鍵。原子之間的鍵。 苷鍵原子：苷元上形成苷鍵以連苷鍵原子：苷元上形成苷鍵以連 接糖的原子，接糖的原子，O O、N N、S S、C C。苷苷 元元 + 糖糖 苷苷糖的構型糖的構型 絕對構型絕對構型 端基碳原子相對構型端基碳原子相對構型 依依C5-R取向取向 依依C1-OH與與C5-R相對位置相對位置 D-型型 （向上）（向上） L-型型（向下）（向下） -型型 （同側）（同側） -型型（異側）（異側） 多形成多形成 -D-葡萄糖葡萄糖 L-鼠李糖鼠李糖 二

10、、苷的結構分類二、苷的結構分類1、氧苷：、氧苷：苷元通過氧原子和糖連接，苷元通過氧原子和糖連接， 依苷元依苷元-OH類型分為：類型分為： 醇苷：紅景天苷醇苷：紅景天苷 酚苷：天麻苷、白藜蘆醇苷酚苷：天麻苷、白藜蘆醇苷 酯苷：山慈菇苷酯苷：山慈菇苷A、B 氰苷：苦杏仁苷氰苷：苦杏仁苷 （一）苷鍵原子：（一）苷鍵原子： 氧苷、硫苷、氮苷、碳苷氧苷、硫苷、氮苷、碳苷OOHOHOHOHOHO紅景天苷（醇苷）紅景天苷（醇苷）致適應原致適應原 CHOHOHOCHglcCH2OHOglc白藜蘆醇苷（酚苷）白藜蘆醇苷（酚苷）保護心臟、抗血栓、降血脂保護心臟、抗血栓、降血脂 天麻苷（酚苷）天麻苷（酚苷）安神鎮靜

11、安神鎮靜OOHOHOHOOHOOHOHOHOCHCN苦杏仁苷苦杏仁苷（氰苷）（氰苷） OHHOHOOHOOCH2OHRO R=H R=H 山慈菇苷山慈菇苷 A A R=OH R=OH 山慈菇苷山慈菇苷 B B（酯苷）（酯苷）先緩慢分解成先緩慢分解成-羥基苯乙腈，再分解為苯羥基苯乙腈，再分解為苯甲醛（苦杏仁味）、氫氰酸（小劑量抑制甲醛（苦杏仁味）、氫氰酸（小劑量抑制呼吸中樞鎮咳，大劑量中毒甚至死亡）。呼吸中樞鎮咳，大劑量中毒甚至死亡）。2、硫苷：、硫苷：糖半縮醛羥基與苷元巰基縮合，常存在糖半縮醛羥基與苷元巰基縮合，常存在于十字花科植物，如黑（白）芥子苷、蘿卜苷于十字花科植物，如黑（白）芥子苷、蘿

12、卜苷 。CH2CHCH2CNSOSO3Kglc黑芥子苷黑芥子苷CCH2CH2CHCHSCH3NOS3HOOHOHOOOHSH蘿卜苷蘿卜苷3、氮苷：、氮苷：糖端基碳與苷元氮原子連接。腺苷、糖端基碳與苷元氮原子連接。腺苷、鳥苷等，生化中多見。如巴豆苷水解后產生苷元鳥苷等，生化中多見。如巴豆苷水解后產生苷元巴豆毒素具大毒。巴豆毒素具大毒。NNNNNH2OOHOHHOCH2腺苷（氮苷）腺苷（氮苷）ONNNNNH2OH巴豆苷（氮苷）巴豆苷（氮苷）4、碳苷：、碳苷：糖端基碳直接與苷元碳原子連接。糖端基碳直接與苷元碳原子連接。苷元多為黃酮、蒽醌類。水溶性小、難于水解。苷元多為黃酮、蒽醌類。水溶性小、難于水解

13、。蘆薈苷：蘆薈苷：致瀉致瀉 （蒽酮（蒽酮碳苷）碳苷） OOOHOHglcOH 牡荊素：牡荊素：抗腫瘤、抗腫瘤、降壓、抗炎及解痙降壓、抗炎及解痙 （黃酮碳苷）（黃酮碳苷） OOHOHOHOHOOHOHCH2OHH其他分類方法：其他分類方法： 苷元類型：黃酮苷、蒽醌苷、香豆素苷苷元類型：黃酮苷、蒽醌苷、香豆素苷 存在狀態：原生苷、次生苷存在狀態：原生苷、次生苷 特殊性質：皂苷特殊性質：皂苷 生理作用：強心苷生理作用：強心苷 糖種類和名稱：木糖苷、葡萄糖苷糖種類和名稱：木糖苷、葡萄糖苷 單糖基數目：單糖苷、雙糖苷單糖基數目：單糖苷、雙糖苷 糖鏈數目：單糖鏈苷、雙糖鏈苷糖鏈數目：單糖鏈苷、雙糖鏈苷 蘆

14、丁蘆丁 七葉苷七葉苷 （黃酮苷）（黃酮苷） （香豆素苷）（香豆素苷）大黃素甲醚大黃素甲醚-8-O-D龍膽雙糖苷龍膽雙糖苷 （蒽醌苷）（蒽醌苷） 苦杏仁苷苦杏仁苷 野櫻苷野櫻苷（原生苷）（原生苷） （次生苷）（次生苷） 苦杏仁苷酶苦杏仁苷酶第二節第二節 苷的理化性質苷的理化性質 一、性狀一、性狀u形態形態 糖基少：結晶糖基少：結晶 糖基多：無定型粉末，吸濕性。糖基多：無定型粉末，吸濕性。 u顏色顏色 取決于苷元取決于苷元(共軛系統及助色團共軛系統及助色團) 如黃酮苷、蒽醌苷有顏色。如黃酮苷、蒽醌苷有顏色。 u氣味氣味 無味、苦味；個別甜味無味、苦味；個別甜味 （甘草皂苷（甘草皂苷 ），刺激性（皂

15、苷）。，刺激性（皂苷）。 二、旋光性：二、旋光性：變旋作用變旋作用苷有旋光性且多呈左旋，糖多為右旋。苷有旋光性且多呈左旋，糖多為右旋。苷苷 苷元苷元 + 糖糖 多呈右旋多呈右旋多呈多呈左左旋旋 混合物多呈混合物多呈右右旋旋應用：檢識苷和多糖。應用：檢識苷和多糖。苷：苷：變旋作用。變旋作用。 水解液含非糖（苷元）。水解液含非糖（苷元）。三、溶解性三、溶解性 水水 甲（乙）醇甲（乙）醇 苯、乙醚、氯仿苯、乙醚、氯仿 石油醚石油醚苷苷 （親水性）（親水性） + + - -苷元（親脂性）苷元（親脂性） - + + +（-）苷：苷：糖部分：糖基數目糖部分：糖基數目，親水性，親水性。 苷元部分：大分子苷元

16、苷元部分：大分子苷元(如甾醇、萜醇等如甾醇、萜醇等) 的單糖苷，的單糖苷， 極性較小，親水性極性較小，親水性，溶于低極性溶劑，溶于低極性溶劑(如氯仿如氯仿)。 碳苷：溶解度小（水和其它溶劑）。碳苷：溶解度小（水和其它溶劑）。四、苷鍵的裂解四、苷鍵的裂解酸水解、酶解、堿水解、氧化開裂法等酸水解、酶解、堿水解、氧化開裂法等（一）酸水解（一）酸水解 反應機理（以葡萄糖苷為例）反應機理（以葡萄糖苷為例） OOHOHORHOOH+OOHOHORHOOH+HHH+OOHOHHOOHH,OH+ROH 苷鍵原子質子化苷鍵原子質子化（水解難易關鍵）（水解難易關鍵）影響苷鍵原子質子化的因素影響苷鍵原子質子化的因素

17、 苷鍵原子周圍電子云密度苷鍵原子周圍電子云密度（電子云密度大，（電子云密度大，易于接受質子，易于接受質子，水解容易）水解容易） 空間環境空間環境（周圍取代基大，（周圍取代基大，不利于接受質子，不利于接受質子，水解困難）水解困難） 酸水解規律酸水解規律 1 1苷鍵原子苷鍵原子 : N: N苷苷 O O苷苷 S S苷苷 C C苷苷 （易接受質子）（易接受質子） （無孤對電子）（無孤對電子） 例：巴豆苷例：巴豆苷 天麻苷天麻苷 黑芥子苷黑芥子苷 蘆薈苷蘆薈苷水解規律水解規律2 2吡喃糖苷吡喃糖苷C C2 2取代：取代： 2-2-去氧糖苷去氧糖苷 2- 2-羥基糖苷羥基糖苷 2- 2-氨基糖苷氨基糖苷

18、 （無）（無） （競爭性吸引質子）（競爭性吸引質子）3 3吡喃糖苷吡喃糖苷C C5 5取代：取代： 五碳糖苷五碳糖苷 甲基五碳糖苷甲基五碳糖苷 六碳糖苷六碳糖苷 糖醛酸苷糖醛酸苷（空間位阻小）（空間位阻小） （大）（大）6 6芳香族苷芳香族苷 脂肪族苷脂肪族苷（苷元供電性）（苷元供電性）4 4呋喃糖苷呋喃糖苷 吡喃糖苷吡喃糖苷 （分子平面性，張力大）（分子平面性，張力大）5 5酮糖苷酮糖苷 醛糖苷醛糖苷 （多為呋喃糖）（多為呋喃糖） （多為吡喃糖）（多為吡喃糖）（二）堿水解（二）堿水解 苷鍵的縮醛結構（苷鍵原子的負電性）苷鍵的縮醛結構（苷鍵原子的負電性） 對稀堿（對稀堿（OH-）穩定）穩定 ，

19、很少用堿水解。，很少用堿水解。 酯苷、酚苷、烯醇苷、酯苷、酚苷、烯醇苷、吸電子基取代的苷吸電子基取代的苷（苷鍵原子的正電性）（苷鍵原子的正電性）堿水解。堿水解。 COOROCCOCCOglcglcglcglc吸電子 基（三）酶水解（三）酶水解 條件溫和條件溫和 專屬性高專屬性高（水、（水、3040） 苷酶苷酶 苷（苷（麥芽糖酶麥芽糖酶 水解水解 -葡萄糖苷鍵）葡萄糖苷鍵） 苷酶苷酶 苷（苷（苦杏仁苷酶苦杏仁苷酶 水解水解 -葡萄糖苷鍵和其它六碳醛糖葡萄糖苷鍵和其它六碳醛糖-苷鍵）苷鍵） 獲得真正苷元獲得真正苷元 苷鍵構型（苷鍵構型（、）的判斷）的判斷（四）氧化開裂反應（四）氧化開裂反應（Smi

20、thSmith降解降解法）法） 步驟步驟-三步：三步：-D-葡萄糖苷葡萄糖苷 1.過碘酸過碘酸 二元醛二元醛 2.四氫硼鈉四氫硼鈉 二元醇二元醇（O-苷）苷） （氧化鄰二醇）（氧化鄰二醇） （還原）（還原） （穩定性差）（穩定性差）3.稀酸室溫稀酸室溫 多元醇多元醇 羥基乙醛羥基乙醛 苷元苷元（溫和）（溫和） 難水解的碳苷難水解的碳苷 苷元不穩定的苷（人參皂苷）苷元不穩定的苷（人參皂苷）氧化開裂法氧化開裂法 Smith Smith降解法降解法獲得真正苷元獲得真正苷元 OOHOHOHOHRIO4IO4-BH4-H+123CH2OHCHOHCH2OHCHOHCH2OHR-R-CHOHCOOH-D-

21、葡萄糖苷（葡萄糖苷（C-苷）苷） 帶醛基的苷元帶醛基的苷元 用途用途 五、顯色反應五、顯色反應Molish反應：反應： -萘酚和濃硫酸萘酚和濃硫酸樣品樣品 紫紅色環紫紅色環結果：含糖或苷，鑒別苷與苷元結果：含糖或苷，鑒別苷與苷元.注意：注意：C-C-苷苷和糖醛酸呈陰性。和糖醛酸呈陰性。例：丹皮苷例：丹皮苷 （+） 丹皮酚丹皮酚 （-）苯胺苯胺-鄰苯二甲酸反應：鄰苯二甲酸反應： 105 棕色斑點棕色斑點 糖糖PC檢識顯色劑檢識顯色劑第三節第三節 糖和苷的提取分離糖和苷的提取分離一、糖的提取一、糖的提取水（堿）提醇沉法水（堿）提醇沉法藥材藥材水（堿水）提取，濃縮水（堿水）提取，濃縮水提液水提液高濃

22、度乙醇高濃度乙醇沉淀（粗多糖）沉淀（粗多糖）溶液溶液缺點：蛋白質較多缺點：蛋白質較多 除蛋白質方法除蛋白質方法 Sevag法法正丁醇正丁醇-氯仿按氯仿按1：4混合后與多混合后與多糖水溶液振搖，放置，使蛋白質變性沉淀。糖水溶液振搖，放置，使蛋白質變性沉淀。 TCA 法：法： 粗多糖提取液，加三氯乙酸溶液，粗多糖提取液，加三氯乙酸溶液，冰箱保存過夜，離心，得上清液。冰箱保存過夜，離心，得上清液。 實例香菇多糖的提取 香菇子實體加蒸餾水90-100加熱回流，提取，用氯仿-正丁醇去蛋白，經水流動透析，用72%乙醇沉淀多糖，得香菇多糖，收得率為3.32%。 二、苷的提取二、苷的提取 提取目的：原生苷提取

23、目的：原生苷 or 次生苷、苷元次生苷、苷元 ? 苷與酶共存苷與酶共存 避免避免 or 利用利用 酶解酶解? 溶解性差異溶解性差異 原生苷原生苷:親水性親水性 次生苷、苷元：親脂性次生苷、苷元：親脂性 提取原生苷提取原生苷 提取次生苷、苷元提取次生苷、苷元 抑制酶的活性抑制酶的活性甲醇、乙醇或沸水提甲醇、乙醇或沸水提藥材加鹽（碳酸鈣）拌勻藥材加鹽（碳酸鈣）拌勻避免酸、堿接觸避免酸、堿接觸 利用酶的活性利用酶的活性（水、（水、3040、2448）加酸或堿水解、預發酵等加酸或堿水解、預發酵等有機溶劑提取：醇、乙醚、氯仿有機溶劑提取：醇、乙醚、氯仿 提取注意事項提取注意事項 系統溶劑法系統溶劑法 次

24、生苷、苷元的提取次生苷、苷元的提取 三、苷的分離三、苷的分離 初步精制初步精制溶劑萃取法溶劑萃取法乙酸乙酯、正丁醇乙酸乙酯、正丁醇溶劑沉淀法溶劑沉淀法水液加丙酮或乙醚水液加丙酮或乙醚大孔樹脂法大孔樹脂法先水洗無機鹽、糖等，先水洗無機鹽、糖等， 不同濃度乙醇洗苷不同濃度乙醇洗苷 總苷總苷分離：色譜法（為主）分離：色譜法（為主） 硅膠：多用氯仿硅膠：多用氯仿-甲醇或氯仿甲醇或氯仿-甲醇甲醇-水系統洗脫。水系統洗脫。反相硅膠：反相硅膠：Rp-18、Rp-8（極性成分適用）；（極性成分適用）； 水水-甲醇或水甲醇或水-乙腈為流動相乙腈為流動相葡聚糖凝膠：葡聚糖凝膠：SephedexLH-20(有機相適

25、用有機相適用) 不同濃度乙醇洗脫（分子量不同）不同濃度乙醇洗脫（分子量不同）單體成分單體成分 白芍毛莨科植物芍藥 (paeonia lactiflora Pall) 干燥根。功效養血、柔肝、斂陰、收汗、緩急止痛等。成分芍藥苷 (paeoniflorin) 、羥基芍藥苷 (hydroxy-paeoniflorin) 、芍藥花苷 (paeonin) 、芍藥內酯苷 (albiflorin) 、苯甲酰芍藥苷 (benzoylpaeoniflorin) 等，總稱白芍總苷 (total glucosides of paeonia ，TGP) 。實例1：白芍總苷的提取分離白芍原植物白芍藥材 乙醇提取 白芍飲

26、片100 g,粉碎成粗顆粒,70%乙醇回流提取兩次,第1次加8倍量提取60min,第2次加6倍量提取30 min,過濾,合并濾液,回收至無醇味,加水至藥液濃度1g生藥/ml。 大孔樹脂分離 2倍AB-8大孔樹脂吸附,柱徑高比為121,樹脂柱上吸附30 min后,以3BV蒸餾水洗去糖,收集5BV 70%乙醇洗脫液,流速為3BV/h。 結果：浸膏中白芍總苷含量達60%以上。 方法可靠,成本較低, 可進行工業化大生產。 柴胡傘形科植物柴胡Bupleurum chinense DC.或狹葉柴胡Bupleurum scorzonerifolium Willd.的干燥根。 實例2：柴胡總皂苷的提取 功效和

27、解表里，疏肝，升陽。用于感冒發熱， 寒熱往來，胸脅脹痛，月經不調，子官脫垂，脫肛。 用于寒熱往來、感冒發熱等癥。 成分柴胡皂苷（saikosapoins a、b、c、d等），甾醇，揮發油（柴胡醇、丁香酚等）等。柴胡制成的單味或復方注射液，對外感發熱有較好 的解表退熱作用。 柴胡總皂苷的提取柴胡總皂苷的提取 柴胡細粉用含5吡啶的甲醇提取(中和植物酸，防止皂苷次生化)，回收甲醇得濃縮物。加水后用水飽和正丁醇萃取，回收正丁醇， 加入乙醚使沉淀，過濾得粗總皂苷。 第四節第四節 苷的結構研究苷的結構研究研究一般程序：研究一般程序： 1.物理常數的測定物理常數的測定 mp，D等。等。2.分子式測定分子式測

28、定 元素分析：元素分析：定性定量分析元素種類和比例。定性定量分析元素種類和比例。 質譜分析法：質譜分析法：分子量和分子式。分子量和分子式。 電子轟擊質譜（電子轟擊質譜（EI-MS）：不易獲得分子離子峰（極性大）：不易獲得分子離子峰（極性大）化學電離質譜（化學電離質譜（CI-MS）、）、場解吸質譜（場解吸質譜（FD-MS）、）、 快原子轟擊質譜（快原子轟擊質譜（FAB-MS） ：可用：可用高分辨快原子轟擊質譜（高分辨快原子轟擊質譜（HR-FAB-MS）：直接測分子式）：直接測分子式 （1）酸水解得到苷元和糖）酸水解得到苷元和糖（2）苷元結構鑒定）苷元結構鑒定 （3）糖種類鑒定）糖種類鑒定u紙色譜

29、（紙色譜（PC）：分配原理）：分配原理l固定相：水固定相：水 展開劑：正丁醇展開劑：正丁醇-乙酸乙酸-水水(4：5：1，上層，上層) BAW 顯色劑：苯胺顯色劑：苯胺-鄰苯二甲酸試劑鄰苯二甲酸試劑3.3.組成苷的苷元、糖的鑒定組成苷的苷元、糖的鑒定 u薄層色譜（薄層色譜（TLC）：硅膠）：硅膠硼酸或無機鹽溶液鋪板硼酸或無機鹽溶液鋪板 如如0.3mol/L磷酸氫二鈉或磷酸二氫鈉水液磷酸氫二鈉或磷酸二氫鈉水液 增大溶解度，提高點樣量（可達增大溶解度，提高點樣量（可達400500g）。）。 降低吸附力，改善分離效果。降低吸附力，改善分離效果。u氣相色譜（氣相色譜（GLC）：水解、制備）：水解、制備T

30、MS衍生物（具揮發性）。衍生物（具揮發性）。u超導超導FT-NMR光譜光譜: 各糖不同質子的各糖不同質子的、J 與標準糖比較與標準糖比較 各糖不同碳原子的各糖不同碳原子的 與標準糖比較與標準糖比較（4 4）糖數目測定）糖數目測定 光密度掃描法：光密度掃描法：測定各糖斑點含量，計算各糖分子比，測定各糖斑點含量，計算各糖分子比，推算糖數目。推算糖數目。質譜法：質譜法：測定苷及苷元分子量，計算差值，求糖的數目。測定苷及苷元分子量，計算差值，求糖的數目。 1 1H-NMRH-NMR譜譜: :測定糖端基質子信號（測定糖端基質子信號（44 5ppm5ppm，較大）數目；，較大）數目； 制成全乙酰化或全甲基

31、化物，測定乙酰氧基、甲氧基信號制成全乙酰化或全甲基化物，測定乙酰氧基、甲氧基信號（、J J）數目。）數目。 1313C-NMRC-NMR譜譜: :測定糖端基碳信號（測定糖端基碳信號（9090112ppm112ppm）數目；）數目； 苷總碳信號數減去苷元碳信號數，推算糖數目。苷總碳信號數減去苷元碳信號數，推算糖數目。 4.4.測定苷元與糖、糖與糖連接位置測定苷元與糖、糖與糖連接位置（1 1）化學方法）化學方法: : 苷全甲基化物進行甲醇解，鑒定（與對苷全甲基化物進行甲醇解，鑒定（與對照品色譜）未全甲醚化單糖，游離羥基所在照品色譜）未全甲醚化單糖，游離羥基所在位置即糖與糖之間的連接位置。位置即糖與

32、糖之間的連接位置。 （2 2）13C-NMR13C-NMR譜法：譜法： 原理：原理：苷化位移（苷化位移（GSGS）規律規律糖和苷元成苷后，糖和苷元成苷后， 苷元苷元-C-C、-C-C和和糖的端基糖的端基C C化學位移改變。化學位移改變。p苷元和糖連接位置：苷元和糖連接位置： 方法：方法：比較苷和苷元比較苷和苷元1313C-NMRC-NMR譜，苷元譜，苷元-OH-OH成苷碳原子（成苷碳原子（-C-C）和相鄰碳原子（和相鄰碳原子（-C-C）信號發生位移，其它）信號發生位移，其它C C幾乎不變。幾乎不變。辯別辯別苷元的哪個碳原子與糖相連接。苷元的哪個碳原子與糖相連接。 醇羥基苷化醇羥基苷化苷元苷元-

33、碳向低場位移（碳向低場位移（+4+410ppm10ppm），）， -碳向高場位移（碳向高場位移（-0.9-0.94.6ppm4.6ppm） 酚羥基苷化酚羥基苷化苷元苷元-碳向高場位移，碳向高場位移， -碳向低場位移。碳向低場位移。 p糖與糖之間連接位置：糖與糖之間連接位置： 依據：依據：被苷化的糖中，被苷化的糖中，-C-C位移較大，位移較大，-C-C稍有位移。稍有位移。 方法：方法：比較苷與相應單糖的比較苷與相應單糖的1313C-NMRC-NMR譜，若內端糖的某譜，若內端糖的某C C原子向低場移動（原子向低場移動（+4+47ppm7ppm），相鄰兩），相鄰兩C C略向高場移動略向高場移動（-1-14ppm4ppm），），內端糖的內端糖的該該C C原子就是連糖的位置。原子就是連糖的位置。5.5.糖與糖之間連接順序的確定糖與糖之間連接順序的確定 苷苷 緩和酸水解緩和酸水解酶水解酶水解 乙酰解乙酰解 全甲基化甲醇解全甲基化甲醇解 部分苷鍵斷裂部分苷鍵斷裂的裂解產物的裂解產物 推斷糖和糖推斷糖和糖連接順序連接順序 （1）部分水解法）部分水解法（2 2）波譜分析法）波譜分析法 質譜（質譜（MS）法）法 :依據：依據：糖基碎片離子峰或分子離子脫糖基的碎片離子峰，糖基碎片離子峰或分子離子脫糖基的碎片離子峰，判斷糖的連接順序