1、注：這個(gè)范本是根據(jù)師兄留下的遺產(chǎn)修改而成，基本了概括整個(gè)實(shí)驗(yàn)的流程，為了大家不要雷同，所以只寫了標(biāo)題，但是還是有一些小步驟沒(méi)有記錄進(jìn)去，如油鏡的使用，但是這些我們之前都學(xué)過(guò)了，所以有所取舍吧。大家認(rèn)真看看吧。里面可能編號(hào)有點(diǎn)不合理或者什么的，請(qǐng)大家根據(jù)自己情況修改，不用寫電子報(bào)告的實(shí)驗(yàn)的同學(xué)，也請(qǐng)按照這份報(bào)告寫在紙質(zhì)版的報(bào)告冊(cè)上，如果發(fā)現(xiàn)問(wèn)題，第一時(shí)間和遂和聯(lián)系。謝謝。膿汁和糞便標(biāo)本中病原菌的檢測(cè)年級(jí)專業(yè)：學(xué)號(hào)：姓名： 1.實(shí)驗(yàn)?zāi)康模海ㄖ饕獙懩撝图S便標(biāo)本中病原菌的檢測(cè)，另外附加一些輔助實(shí)驗(yàn)的目的，如了解并熟悉微生物實(shí)驗(yàn)操作方法，實(shí)驗(yàn)方法等等） 2.實(shí)驗(yàn)器材：（還沒(méi)有寫完） 接種針、接種環(huán)、油

2、性筆、打火機(jī)、試管架3.實(shí)驗(yàn)方法與步驟：3.1培養(yǎng)基的制備培養(yǎng)基制備的一般程序： 3.2空氣、手指皮膚的細(xì)菌學(xué)檢查3.3細(xì)菌的分離與培養(yǎng)：采用平板劃線分離法，取膿汁標(biāo)本在普通平板表面劃線，取糞便標(biāo)本在伊紅美藍(lán)固體培養(yǎng)基表面劃線，使之分散成單個(gè)細(xì)菌，在37培養(yǎng)1824h ，從而分離出單個(gè)菌落。3.4細(xì)菌的純培養(yǎng)：取膿汁標(biāo)本在普通平板上的黃色、白色單菌落，糞便標(biāo)本在伊紅美藍(lán)平板上的紫黑色、淡粉紅色單菌落接種在四個(gè)斜面培養(yǎng)基，標(biāo)記，在37培養(yǎng)18h。3.5細(xì)菌的形態(tài)學(xué)檢查3.5.1革蘭染色法觀察細(xì)菌形態(tài)涂片 干燥 固定染色。涂片：取一玻片在玻片的左右兩側(cè)上加生理鹽水34ul，2滴，分別取黃色和紫黑菌

3、菌苔少許（1mm小菌落的半量）與左右兩側(cè)鹽水混勻，涂成1cm2。干燥：在空氣中放置至干燥。固定：在酒精燈上來(lái)回橫穿2到3次對(duì)其進(jìn)行固定。染色：結(jié)晶紫 初染1分鐘水洗盧戈碘液媒染1分鐘水洗95乙醇脫色約20秒鐘水洗稀釋復(fù)紅復(fù)染1分鐘水洗吸干,鏡檢。3.5.2取另一玻片，取白色和粉紅色菌苔，操作與上述同。3.6細(xì)菌的生化試驗(yàn) 3.6.1糖發(fā)酵試驗(yàn) 用接種針?lè)謩e挑少許紫黑和粉紅色的細(xì)菌接種到葡萄糖發(fā)酵管和乳糖發(fā)酵管中，在37下，培養(yǎng)24小時(shí)，觀察其產(chǎn)酸產(chǎn)氣情況。3.6.2細(xì)菌藥物敏感性試驗(yàn) 接種環(huán)分別取黃、白、紫黑、粉紅色四種菌液36ul×2環(huán)，各自在四個(gè)平板上，作平板密集劃線接種細(xì)菌（紗

4、窗樣）。設(shè)計(jì)三點(diǎn)，三點(diǎn)之間等邊三角距離，點(diǎn)距離平皿邊緣約15mm。作標(biāo)記：青、鏈、慶。鑷子火焰消毒，夾取相應(yīng)的藥物紙片，平貼在已設(shè)定的位置上，按壓，最后鑷子火焰滅菌。371824小時(shí)培養(yǎng)，觀察結(jié)果。3.6.3血漿凝固酶試驗(yàn) 取二滴兔血漿置于潔凈的玻片上，分別用接種環(huán)取白色和黃色菌苔(23個(gè)菌落的菌量)與血漿研磨混合，涂勻呈云霧狀，立即觀察結(jié)果。3.6.4半固體接種法 接種針斜面取四種不同顏色的細(xì)菌，各自接種進(jìn)四個(gè)半固體培養(yǎng)基，從半固體培養(yǎng)基中心，垂直刺入，到達(dá)培養(yǎng)基底部4/5處，再循原來(lái)的路線，退出接種針。 在37下,培養(yǎng)24小時(shí)，觀察結(jié)果。3.6.5 痢疾血清玻片凝集反應(yīng) 取載玻片1張，滴加

5、痢疾血清和生理鹽水各15ul，2滴。用接種環(huán)挑取少許紫黑色菌落和粉紅色菌落，各自與上述混合液液滴混勻，觀察結(jié)果。4.結(jié)果觀察，記錄，分析討論4.1結(jié)果觀察(注：凡是有實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象的都記錄下來(lái)，可以放圖片，最好和實(shí)驗(yàn)記錄相對(duì)應(yīng)，有怎樣的實(shí)驗(yàn)觀察就有對(duì)應(yīng)的實(shí)驗(yàn)記錄)4.2實(shí)驗(yàn)記錄（我只提供部分的記錄表格，也可以用文字記載，有一些需要大家自己作表格；另外，里面的表格有一些是附表，不是實(shí)驗(yàn)記錄表）空氣的細(xì)菌學(xué)檢查 采樣時(shí)間(min)采樣地點(diǎn)菌落形成單位(CFU) 15 手指的細(xì)菌學(xué)檢查菌落抑菌圈直徑(mm)青霉素鏈霉素慶大霉素黃色菌落白色菌落紫黑菌落粉紅菌落藥敏試驗(yàn)結(jié)果分析青霉素鏈霉素慶大霉素黃色細(xì)菌白色

6、細(xì)菌紫黑細(xì)菌粉紅細(xì)菌注：耐藥，中度敏感±，敏感。4.2.4常見(jiàn)腸道感染細(xì)菌主要生化反應(yīng)特征葡萄糖乳糖半固體（動(dòng)力）大腸埃希菌 +福氏志賀菌+-傷寒沙門菌+-+霍亂弧菌+-+幽門螺桿菌不分解糖類+變形桿菌 - +糖發(fā)酵、動(dòng)力試驗(yàn)結(jié)果判斷紫黑菌落粉紅色菌落葡萄糖乳糖半固體葡萄糖乳糖半固體分解糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣+；分解糖產(chǎn)酸又產(chǎn)氣；不分解糖-細(xì)菌有鞭毛+；細(xì)菌無(wú)鞭毛-腸道桿菌科各菌屬生化反應(yīng)鑒別表葡萄糖乳糖麥芽糖甘露醇蔗糖半固體埃希菌屬 - 志賀菌屬+/-/+-沙門菌屬/+-霍亂弧菌+-+變桿菌屬-+產(chǎn)酸或陽(yáng)性， 產(chǎn)酸產(chǎn)氣，-陰性， +/-多數(shù)陽(yáng)性， -/+多數(shù)陰性， 不確定。血漿凝固酶實(shí)驗(yàn)記錄痢疾血清實(shí)驗(yàn)記錄由上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果可得膿汁和糞便標(biāo)本細(xì)菌檢測(cè)結(jié)果如下表：標(biāo)本菌落形態(tài)血漿 凝固酶葡萄糖乳糖半固體培養(yǎng)基